This study has shown that the suppl

This study has shown that the supplementation of
thawed boar semen with 50% seminal plasma caused
a dramatic effect in the plasma membrane status, accompanied by other physiological changes, whereas these
changes were not evident or much lower when adding 10%
seminal plasma. These observations could help explaining
the enhancing effect of seminal plasma on thawed semen
fertility observed in other studies[15,16,19]. The protection
that seminal plasma confers to boar spermatozoa against
cold shock has been known for a long time[25].ThePSP-I/
PSP-II heterodimer (non-heparin–binding spermadhesins
[26]) represent more than half of the seminal plasma
proteins in the boar. This heterodimer seems to be responsible, at least in part, of the beneficial effects of seminal
plasma on stressed spermatozoa (frozen-thawed[15,19],
highly extended[27], and sorted [28]). Other components
could be involved in important events, such as the modulation of the immune response in the uterus [29] or the
formation of the oviductal reservoir [30]. Different studies
have been defining these components and their effects
in vivo andin vitro, which may be very different depending
on the environment[31]
Our study follows García et al.[19], who found a fertility
improvement when supplementing thawed boar semen
with 50% seminal plasma. The most noticeable effect that
we have observed in our study is an important increase in
membranefluidity in the samples treated with 50% seminal
plasma, as assessed by merocyanine 540. These changes
have been associated with capacitation events by several
authors[32], although this has been put into question [33].
A modulation of capacitation by seminal plasma could be
related to the results observed by García et al. [19].
However, we could not detect large shifts in the intracellular calcium concentration in any treatment, which are
a clear indicator of capacitation [6]. Interestingly, we
could not detect a conspicuous “increased membrane
permeability”population in our analyses. This population is
stained by YO-PRO-1, and it has been related to low fertility
results in some species[34], although this relationship is
not clear for boar semen[35]. We found that membrane
changes in our experimental treatments could occur very
quickly; thus, we could only detect a very low proportion of
cells in the “transitional” state of increased membrane
permeability.
Except for García et al.[19], previous studies on thawed
boar spermatozoa have tested supplementation with seminal
plasma up to 20% (most of them 10%). For instance, Vadnais
et al.[7]reported that 10% and 20% of seminal plasma reduced
the proportion of capacitated spermatozoa (using the chlortetracycline assay) when frozen-thawed boar spermatozoa
were incubated in a capacitation-supporting medium.
However, when Vadnais et al.[7] used merocyanine 540 to
assess thefluidity of the plasma membrane[9],theyobtained
no differences among samples frozen with and without 10%
seminal plasma, resembling ourresults with that treatment.
Inthesamestudy,nodifferenceswerereportedamong
sperm samples assayed for Annexin V just after thawing, after
incubating in noncapacitating medium or after incubating
with 10% seminal plasma. The Annexin V assay allows to
recognize spermatozoa with “apoptotic-like” features, and,
therefore, these results seem to agree with our YO-PRO-1
results regarding the viable“apoptotic”subpopulation.
Interestingly, the membrane changes in our samples
incubated with 50% seminal plasma were accompanied by
an increase of intracellular ROS and by an increase in
the proportion of spermatozoa with damaged or reacted
acrosomes. These observations deserve further research to
determine if there is a causal relationship among them. Our
data suggest that a small population of spermatozoa (no
necessarily the same) respond very quickly to the exposure to 50% seminal plasma, undergoing the acrosome
reaction (viable acrosome-reacted population increasing
significantly at 0 hour) and an increase in membrane
fluidity (nonsignificant increase at 0 hour).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษานี้ได้แสดงที่แห้งเสริมของน้ำเชื้อสุกร thawed กับเกิดพลาสม่าบรรลุถึง 50%ลักษณะพิเศษในสถานะพลาสม่าเมมเบรน พร้อม ด้วยแปลงสรีรวิทยา ขณะนี้เปลี่ยนแปลงได้ไม่ชัด หรือต่ำกว่ามากเมื่อเพิ่ม 10%พลาสม่าบรรลุถึง ข้อสังเกตเหล่านี้อาจช่วยอธิบายการส่งเสริมผลของพลาสม่าบรรลุถึงน้ำเชื้อ thawedความอุดมสมบูรณ์ในการศึกษาอื่น [15,16,19] การคุ้มครองconfers พลาสม่าที่บรรลุถึงการ spermatozoa หมูกับเย็นช็อคที่รู้จักมานาน [25] ThePSP-ฉัน /Heterodimer PSP II (ไม่ใช่เฮพาริน – ผูก spermadhesinsแสดงถึง [26]) มากกว่าครึ่งหนึ่งของพลาสม่าบรรลุถึงโปรตีนในสุกร Heterodimer นี้น่าจะรับผิดชอบ น้อยบางส่วน ของผลประโยชน์ของการบรรลุถึงพลาสม่าใน spermatozoa เครียด (แช่แข็ง-thawed [15,19],ขยายสูง [27], และเรียงลำดับ [28]) ส่วนประกอบอื่น ๆสามารถมีส่วนร่วมในเหตุการณ์สำคัญ เช่นเอ็มของการตอบสนองภูมิคุ้มกันในมดลูก [29] หรือการก่อตัวของอ่างเก็บน้ำ oviductal [30] การศึกษาแตกต่างกันมีการกำหนดคอมโพเนนต์เหล่านี้และผลกระทบเครื่องในสัตว์ทดลอง andin ซึ่งอาจจะแตกต่างกันมากขึ้นอยู่สิ่งแวดล้อม [31]เราตาม García et al. [19], ที่พบมีความอุดมสมบูรณ์ปรับปรุงเมื่อใช้น้ำเชื้อสุกร thawedมีพลาสม่าบรรลุถึง 50% เห็นได้ชัดที่สุดมีผลที่เราได้พบในการศึกษาของเราเป็นการเพิ่มความสำคัญmembranefluidity ในตัวอย่างที่ถือว่าบรรลุถึง 50%พลาสม่า เป็นประเมิน โดย merocyanine 540 เปลี่ยนแปลงเหล่านี้มีการเชื่อมโยงกับเหตุการณ์ capacitation โดยหลายผู้เขียน [32], แต่นี้มีการวางไว้ในคำถาม [33]เอ็มของ capacitation โดยพลาสม่าบรรลุถึงอาจที่เกี่ยวข้องกับผลการสังเกตโดย García et al. [19]อย่างไรก็ตาม เราไม่พบกะใหญ่ในความเข้มข้นของแคลเซียม intracellular ในการรักษา ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ที่ชัดเจนของ capacitation [6] เป็นเรื่องน่าสนใจ เราไม่พบการเป้า "เพิ่มเมมเบรนpermeability "ประชากรในการวิเคราะห์ของเรา นี้เป็นสี โดย YO-PRO-1 และมีการเกี่ยวข้องกับความอุดมสมบูรณ์ต่ำผลบางชนิด [34], แม้ว่าความสัมพันธ์นี้ไม่ชัดเจนสำหรับน้ำเชื้อสุกร [35] เราพบว่าเมมเบรนเปลี่ยนแปลงในการรักษาของเราทดลองอาจเกิดขึ้นมากรวดเร็ว ดังนั้น เราสามารถพบสัดส่วนที่ต่ำมากของเท่านั้นเซลล์ในสถานะ "อีกรายการ" ของเยื่อเพิ่มขึ้นpermeabilityThawed ศึกษาก่อนหน้ายกเว้น García et al. [19],หมู spermatozoa ทดสอบแห้งเสริม ด้วยบรรลุถึงพลาสม่าถึง 20% (ส่วนใหญ่พวกเขา 10%) เช่น Vadnaisal. ร้อยเอ็ด [7] รายงานว่า 10% และ 20% ของพลาสม่าบรรลุถึงลดลงสัดส่วนของ spermatozoa capacitated (ใช้ทดสอบคลอร์เตตราไซคลีน) เมื่อสุกรแช่แข็ง-thawed spermatozoaมี incubated ในการสนับสนุน capacitationอย่างไรก็ตาม เมื่อ Vadnais et al. [7] ใช้ merocyanine 540 ไปประเมิน thefluidity ในพลาสมาเมมเบรน [9], theyobtainedไม่มีความแตกต่างระหว่างตัวอย่างแช่แข็งมี และไม่ มี 10%บรรลุถึงจอพลาสม่า คล้าย ourresults ด้วยการรักษาที่Inthesamestudy, nodifferenceswerereportedamongตัวอย่างอสุจิ assayed สำหรับ Annexin V หลัง thawing หลังจากincubating ใน noncapacitating หรือ หลัง incubatingมีพลาสม่าบรรลุถึง 10% วิเคราะห์ Annexin V ช่วยให้รู้จัก spermatozoa กับ "apoptotic " ต่าง ๆ และดังนั้น ผลลัพธ์เหล่านี้ดูเหมือนจะ เห็นด้วยกับเรา YO-PRO-1ผลเกี่ยวกับ subpopulation ได้ "apoptotic"เป็นเรื่องน่าสนใจ เมมเบรนนั้นในตัวอย่างของเราincubated 50% พลาสมาที่บรรลุถึงได้พร้อมด้วยการเพิ่มขึ้น ของ intracellular ROS และ โดยการเพิ่มสัดส่วนของ spermatozoa เสีย หรือปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นacrosomes ข้อสังเกตเหล่านี้สมควรได้รับการวิจัยเพิ่มเติมกำหนดว่า มีความสัมพันธ์เชิงสาเหตุระหว่างกัน ของเราแนะนำข้อมูลที่ spermatozoa (ไม่มีประชากรขนาดเล็กจำเป็นต้องเหมือนกัน) ตอบสนองได้อย่างรวดเร็วความเสี่ยง 50% บรรลุถึงพลาสม่า ระหว่างอะโครโซมปฏิกิริยา (ได้ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นอะโครโซมประชากรเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญที่ 0 ชั่วโมง) และการเพิ่มขึ้นของเมมเบรนข้อสรุป (nonsignificant เพิ่มที่ 0 ชั่วโมง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาครั้งนี้ได้แสดงให้เห็นว่าการเสริมของน้ำอสุจิหมูป่าละลาย 50% พลาสม่าเชื้อก่อให้เกิดผลกระทบอย่างมากในสถานะพลาสมาเมมเบรนที่มาพร้อมกับการเปลี่ยนแปลงทางสรีรวิทยาอื่นๆ ในขณะที่เหล่านี้มีการเปลี่ยนแปลงที่เห็นได้ชัดไม่ได้หรือต่ำกว่ามากเมื่อมีการเพิ่ม10% พลาสม่าน้ำเชื้อ ข้อสังเกตเหล่านี้จะช่วยอธิบายผลการเสริมสร้างพลาสม่าอสุจิในน้ำอสุจิละลายความอุดมสมบูรณ์ของการปฏิบัติในการศึกษาอื่นๆ [15,16,19] การป้องกันที่พลาสม่าน้ำเชื้อฟาโรห์จะหมูป่าตัวอสุจิกับช็อตเย็นได้รับการรู้จักกันมาเป็นเวลานาน[25] .ThePSP-I / PSP-II heterodimer (ที่ไม่ใช่เฮผูกพัน spermadhesins [26]) เป็นตัวแทนมากกว่าครึ่งหนึ่งของพลาสม่าน้ำเชื้อโปรตีนในหมูป่า heterodimer นี้น่าจะเป็นความรับผิดชอบอย่างน้อยในส่วนของผลประโยชน์ของเชื้อพลาสม่าในตัวอสุจิเครียด(แช่แข็งละลาย [15,19] ขยายสูง [27] และเรียง [28]) ส่วนประกอบอื่น ๆที่อาจจะมีส่วนร่วมในกิจกรรมที่สำคัญเช่นการปรับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในมดลูก [29] หรือการก่อตัวของท่อนำไข่อ่างเก็บน้ำ[30] การศึกษาที่แตกต่างกันได้รับการกำหนดองค์ประกอบเหล่านี้และผลกระทบของพวกเขาในร่างกายandin หลอดทดลองซึ่งอาจจะแตกต่างกันมากขึ้นอยู่กับสภาพแวดล้อม[31] การศึกษาของเราดังต่อไปนี้García et al. [19] ที่พบว่ามีความอุดมสมบูรณ์ของการปรับปรุงเมื่อเสริมละลายน้ำอสุจิหมูป่า50 น้ำเชื้อ% พลาสม่า ผลที่เห็นได้ชัดเจนมากที่สุดที่เราได้ตั้งข้อสังเกตในการศึกษาของเราคือการเพิ่มขึ้นที่สำคัญในการmembranefluidity ในตัวอย่างที่ได้รับเชื้อ 50% พลาสม่าเป็นการประเมินโดย merocyanine 540 การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ได้รับการเชื่อมโยงกับเหตุการณ์capacitation โดยหลายนักเขียน[32] แม้ว่าเรื่องนี้ ได้รับการใส่ลงไปในคำถาม [33]. ปรับ capacitation โดยพลาสม่าเชื้ออาจจะเกี่ยวข้องกับผลที่สังเกตโดยGarcía et al, [19]. อย่างไรก็ตามเราไม่สามารถตรวจพบการเปลี่ยนแปลงขนาดใหญ่ในความเข้มข้นแคลเซียมภายในเซลล์ในการรักษาใด ๆ ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ที่ชัดเจนของcapacitation [6] ที่น่าสนใจที่เราไม่สามารถตรวจสอบได้ชัดเจน"เมมเบรนที่เพิ่มขึ้นการซึมผ่าน" ประชากรในการวิเคราะห์ของเรา ประชากรกลุ่มนี้มีการย้อมสีโดย YO-PRO-1, และได้รับการที่เกี่ยวข้องกับความอุดมสมบูรณ์ต่ำส่งผลให้บางชนิด[34] แม้ว่าความสัมพันธ์นี้คือไม่ชัดเจนสำหรับน้ำอสุจิหมูป่า[35] เราพบว่าเมมเบรนการเปลี่ยนแปลงในการรักษาการทดลองของเราที่อาจเกิดขึ้นมากอย่างรวดเร็ว ทำให้เราสามารถตรวจสอบสัดส่วนที่ต่ำมากของเซลล์ใน "เฉพาะกาล" รัฐเมมเบรนที่เพิ่มขึ้นการซึมผ่าน. ยกเว้นGarcía et al. [19] การศึกษาก่อนหน้านี้ละลายอสุจิหมูป่ามีการทดสอบเสริมด้วยเชื้อพลาสม่าได้ถึง20% ( พวกเขาส่วนใหญ่ 10%) ยกตัวอย่างเช่น Vadnais et al. [7] รายงานว่า 10% และ 20% ของพลาสม่าน้ำเชื้อลดสัดส่วนของcapacitated ตัวอสุจิ (โดยใช้การวิเคราะห์คลอร์เตตราไซคลีน) ในเมื่อตัวอสุจิหมูแช่แข็ง-ละลายถูกบ่มในกลางcapacitation สนับสนุน. แต่เมื่อ Vadnais et al. [7] ใช้ merocyanine 540 เพื่อประเมินthefluidity ของเยื่อหุ้ม [9], theyobtained ความแตกต่างระหว่างกลุ่มตัวอย่างที่ไม่มีการแช่แข็งที่มีและไม่มี 10% พลาสม่าน้ำเชื้อคล้าย ourresults กับการรักษาที่. Inthesamestudy, nodifferenceswerereportedamong ตัวอย่างอสุจิ assayed สำหรับ Annexin V หลังจากที่ละลายหลังจากฟักในnoncapacitating กลางหรือหลังบ่ม10% พลาสม่าน้ำเชื้อ การทดสอบ V Annexin ช่วยให้การรับรู้อสุจิด้วย"apoptotic เหมือน" คุณสมบัติและดังนั้นผลลัพธ์เหล่านี้ดูเหมือนจะเห็นด้วยกับเราYO-PRO-1 ผลการเกี่ยวกับการทำงานได้ "apoptotic" subpopulation. ที่น่าสนใจการเปลี่ยนแปลงเยื่อในตัวอย่างของเราบ่มพลาสม่าที่มีเชื้อ 50% ได้รับการพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของROS ภายในเซลล์และการเพิ่มขึ้นของสัดส่วนของสเปิร์มที่มีความเสียหายหรือมีปฏิกิริยาตอบสนองacrosomes ข้อสังเกตเหล่านี้สมควรได้รับการวิจัยต่อไปเพื่อตรวจสอบว่ามีความสัมพันธ์เชิงสาเหตุในหมู่พวกเขา ของเราข้อมูลที่ชี้ให้เห็นว่าประชากรขนาดเล็กของสเปิร์ม(ไม่จำเป็นต้องเหมือนกัน) ตอบสนองอย่างรวดเร็วต่อการสัมผัสถึง 50% พลาสม่าน้ำเชื้อผ่าตัด acrosome ปฏิกิริยา (ที่ทำงานได้ประชากร acrosome-ปฏิกิริยาที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญที่0 ชั่วโมง) และการเพิ่มขึ้นของเมมเบรนไหล( เพิ่มขึ้นไม่มีนัยสำคัญที่ 0 ชั่วโมง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษานี้พบว่าการเสริม
ละลายน้ำเชื้อสุกรกับ 50% น้ำอสุจิทำให้
อย่างมากในสถานะพลาสมาเมมเบรนมีการเปลี่ยนแปลงทางสรีรวิทยาอื่นๆ ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้
ไม่ประจักษ์ หรือลดมากเมื่อเพิ่ม 10 %
น้ำอสุจิ ข้อสังเกตเหล่านี้อาจช่วยอธิบาย
เพิ่มผลของน้ำอสุจิในละลายน้ำเชื้อ
ภาวะเจริญพันธุ์ พบในการศึกษา 15,16,19 [ อื่นๆ ] การป้องกัน
ที่เกี่ยวข้องกับอสุจิน้ำอสุจิหมูป่ากับ
เย็นตกใจได้ว่าเวลานาน [ 25 ] thepsp-i /
psp-ii heterodimer ( ไม่ใช่ยา ) ผูก spermadhesins
[ 26 ] ) เป็นตัวแทนมากกว่าครึ่งหนึ่งของน้ำอสุจิ
โปรตีนในหมูป่า heterodimer นี้ดูเหมือนว่าจะต้องรับผิดชอบ อย่างน้อยในส่วนของผลประโยชน์ของเชื้ออสุจิแช่แข็ง
พลาสมาบนเน้นละลาย [ 15,19 ] ,
ขอขยาย [ 27 ] และเรียง [ 28 ] )
ส่วนประกอบอื่น ๆสามารถมีส่วนร่วมในกิจกรรมที่สำคัญ เช่น โครงสร้างของการตอบสนองของภูมิคุ้มกันในมดลูก [ 29 ] หรือ
สร้างอ่างเก็บน้ำ oviductal [ 30 ]
การศึกษาที่แตกต่างกันได้รับกำหนดส่วนประกอบเหล่านี้ และผลของพวกเขาในสัตว์ทดลองและหลอดทดลอง ,ซึ่งอาจจะแตกต่างกันมาก ขึ้นอยู่กับ
บนสภาพแวดล้อม [ 31 ]
การศึกษาของเราคือกาโอ การ์ซีอา et al . [ 19 ] ที่พบความอุดมสมบูรณ์ของการพัฒนาเมื่อเสริมละลายน้ำเชื้อสุกร
กับ 50% น้ำอสุจิ ผลกระทบที่เห็นได้ชัดที่สุดที่เราได้พบในการศึกษาของเรา

membranefluidity เพิ่มขึ้นที่สำคัญในตัวอย่างที่ได้รับ 50% อสุจิ
พลาสมาที่ประเมินโดยเมอโรไซยานีน 540 . การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้
ได้เกี่ยวข้องกับเหตุการณ์ โดยหลายนักเขียนมีเลศนัย
[ 32 ] , แม้ว่านี้ได้รับการใส่ลงไปในคำถาม [ 33 ] .
เป็นม็อดของมีเลศนัยโดยน้ำอสุจิอาจ
ที่เกี่ยวข้องกับผลการตรวจสอบ โดยกาโอ การ์ซีอา et al . [ 19 ] .
แต่เราไม่สามารถตรวจพบความเข้มข้นของแคลเซียมภายในเซลล์ขนาดใหญ่ในการรักษาใด ๆ ซึ่งจะเป็นตัวบ่งชี้ที่ชัดเจนของมีเลศนัย
[ 6 ] ที่น่าสนใจที่เรา
ไม่สามารถตรวจพบเด่น " เพิ่มการซึมผ่านเมมเบรน
" ประชากรของเรา วิเคราะห์ข้อมูล ประชากรนี้
เปื้อน yo-pro-1 , และได้รับการเกี่ยวข้องกับการไม่เจริญพันธุ์
ผลลัพธ์ในบางชนิด [ 34 ] ถึงแม้ความสัมพันธ์นี้
ล้างไม่น้ำเชื้อสุกร [ 35 ] เราพบว่า การเปลี่ยนแปลงในการทดลองรักษาด้วย

ของเราที่อาจเกิดขึ้นได้อย่างรวดเร็วมาก ดังนั้นเราสามารถตรวจสอบสัดส่วนต่ำมาก
เซลล์ในรัฐ " เฉพาะกาล " เพิ่มการซึมผ่านเมมเบรน
.
ยกเว้นกาโอ การ์ซีอา et al . [ 19 ] การศึกษาก่อนหน้านี้ในละลาย
หมูป่าอสุจิมีการทดสอบการเสริมด้วยพลาสมาอสุจิ
ถึง 20% ( ส่วนใหญ่ 10 % ) ตัวอย่าง vadnais
et al . [ 7 ] รายงานว่า 10% และ 20% ของน้ำอสุจิลดลง
สัดส่วนของ capacitated อสุจิ ( ใช้วิลท์เชอร์ assay ) เมื่อแช่แข็งละลายหมูป่า 5
ถูกบ่มในมีเลศนัยสนับสนุนกลาง .
แต่เมื่อ vadnais et al . [ 7 ] ใช้เมอโรไซยานีนที่
ประเมิน thefluidity ของเยื่อหุ้มเซลล์ [ 9 ] , theyobtained
ไม่มีความแตกต่างระหว่างมีกับไม่มีตัวอย่างแช่แข็ง 10%
น้ำอสุจิที่คล้าย ourresults กับการรักษาที่ .
inthesamestudy nodifferenceswerereportedamong
ตัวอย่างอสุจิ , ซีรั่มสำหรับของเซลล์ V หลังละลายหลังกลางหรือหลัง เพาะใน noncapacitating

เพาะกับ 10% น้ำอสุจิ ที่ช่วยให้

V ) ของเซลล์อสุจิ กับ " กลุ่มที่มีจำเช่น " คุณลักษณะและ
ดังนั้น ผลลัพธ์เหล่านี้ดูเหมือนจะเห็นด้วยกับเรา yo-pro-1
ผลเกี่ยวกับรัฐ " ในกลุ่มที่มี subpopulation
" .