Fruit tissue (4 g fresh weight) was

Fruit tissue (4 g fresh weight) was homogenized in 4 ml of 0.1 M
TriseHCl buffer (pH 7.8) containing 2mMEDTA-Na, and 2mMDTT.
The homogenate was centrifuged at 20,000  g for 30 min at 4
C,
and the supernatant was used for the GSH-POD and GR assays. The
activity of GSH-POD enzyme was measured using the method of
Tappel (1978). The reaction mixture contained 0.1 M TriseHCl
buffer (pH 7.9), 0.4 mM EDTA, 1.0 mM NaN3, 1.0 mM H2O2, 1.0 mM
glutathione (GSH), 0.15 mM NADPH, 1 unit of glutathione reductase,
and 100 ml enzyme extract. The total reaction volume was
1.0 ml. The reaction was started by adding H2O2. GSH-POD enzyme
activity was measured by the rate of NADPH oxidation at 340 nm via a spectrophotometer. GR enzyme activity was assayed according
to Smith, Vierheller, and Thorne (1988) at 340 nm. The reaction
was started by adding GSSG (oxidized glutathione) and the rate of
oxidation was calculated using the extinction coefficient of NADPH
(6.22 mM1 cm1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เนื้อเยื่อผลไม้ (4 กรัมน้ำหนักสด) ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 4 มิลลิลิตร 0.1 เมตรTriseHCl บัฟเฟอร์ (pH 7.8) มี 2mMEDTA-นา และ 2mMDTTHomogenate ถูก centrifuged ที่ g 20000 ใน 30 นาทีที่ 4 Cและ supernatant ที่ใช้สำหรับ assays GSH-POD และ GR ที่กิจกรรมของเอนไซม์ GSH POD ถูกวัดโดยใช้วิธีการTappel (1978) ส่วนผสมของปฏิกิริยาอยู่ 0.1 M TriseHClบัฟเฟอร์ (pH 7.9), 0.4 mM EDTA, 1.0 มม. NaN3, H2O2, 1.0 มม. 1.0 มม.กลูตาไธโอน (GSH), NADPH 0.15 มม. reductase กลูตาไธโอน 1 หน่วยและสารสกัดจากเอนไซม์ 100 มล ปริมาตรรวมของปฏิกิริยาได้1.0 ml ปฏิกิริยาเริ่มต้น โดยการเพิ่ม H2O2 เอนไซม์ GSH-PODกิจกรรมที่วัด โดยอัตราการเกิดออกซิเดชัน NADPH ที่ 340 nm ผ่านเป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง GR เอนไซม์ถูก assayed ตามสมิธ Vierheller และ Thorne (1988) ที่ 340 nm ปฏิกิริยาเริ่มต้น โดยการเพิ่ม GSSG (กลูตาไธโอนตกแต่ง) และอัตราออกซิเดชันที่คำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ NADPH(6.22 มม. 1 ซ.ม. 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เนื้อเยื่อผลไม้ (4 กรัมน้ำหนักสด) ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันใน 4 มิลลิลิตร 0.1 M
บัฟเฟอร์ TriseHCl (pH 7.8) ที่มี 2mMEDTA นาและ 2mMDTT.
homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 20,000? กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส
และสารละลายที่ใช้สำหรับ GSH-POD และ GR การตรวจ
กิจกรรมของเอนไซม์ GSH-POD วัดโดยใช้วิธีการของ
Tappel (1978) ผสมปฏิกิริยาที่มี 0.1 M TriseHCl
บัฟเฟอร์ (pH 7.9), EDTA 0.4 มิลลิ, 1.0 มิลลิ NaN3, 1.0 มิลลิ H2O2, 1.0 มิลลิ
กลูตาไธโอน (GSH) 0.15 มิลลิ NADPH, 1 หน่วย reductase กลูตาไธโอน
และ 100 มลสารสกัดเอนไซม์ ปริมาณการเกิดปฏิกิริยารวม
1.0 มล ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเพิ่ม H2O2 เอนไซม์ GSH-POD
กิจกรรมโดยวัดจากอัตราการเกิดออกซิเดชัน NADPH ที่ 340 นาโนเมตรผ่านสเปก กิจกรรมของเอนไซม์ GR ได้รับการวิเคราะห์ตาม
สมิ ธ , Vierheller และ Thorne (1988) ที่ 340 นาโนเมตร ปฏิกิริยา
เริ่มต้นโดยการเพิ่ม GSSG (ออกซิไดซ์กลูตาไธโอน) และอัตราการ
เกิดออกซิเดชันที่คำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ NADPH
(6.22 มิลลิ 1 ซม.? 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนื้อเยื่อผล ( 4 กรัมน้ำหนักสด ) คือบด 4 ml 0.1 M
trisehcl บัฟเฟอร์ pH 7.8 ) ที่มี 2mmedta นา และ 2mmdtt .
แยกเป็นระดับที่ 20 , 000  G สำหรับ 30 นาทีที่ 4
C
และนำใช้สำหรับ gsh-pod GR ) และ .
กิจกรรมของเอนไซม์ gsh-pod ถูกวัดโดยใช้วิธี
tappel ( 1978 ) ปฏิกิริยาผสมมีความเข้มข้น 0.1 M trisehcl
บัฟเฟอร์ pH 7.9 ) 04 mM EDTA , nan3 1.0 มม. 1.0 มม. 1.0 มม. H2O2 กลูตาไธโอน ( GSH )
nadph 0.15 มิลลิเมตร และ 1 หน่วยของกลูต้าไธโอน , และเอนไซม์สกัด
100 ml . ปริมาตรปฏิกิริยารวม
1.0 มล. ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเพิ่มแบตเตอรี่ . กิจกรรมของเอนไซม์
gsh-pod วัดจากอัตราของปฏิกิริยาออกซิเดชันที่ nadph 340 nm ผ่านวัสดุ กรัมซีรั่มเอนไซม์ตามสมิธ vierheller
, ,ธอร์น ( 1988 ) และที่ 340 นาโนเมตร ปฏิกิริยา
เริ่มต้นโดยการเพิ่ม gssg ( oxidized glutathione ) และอัตรา
เกิดคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ nadph
( 6.22 มม.  1 ซม.  1 )