AbstractExcessive levels of reactiv

Abstract
Excessive levels of reactive oxygen species (ROS) and increased expression of NADPH oxidases (Nox) have been proposed to contribute to pulmonary artery hypertension (PAH) and other cardiovascular diseases (CVD). Nox enzymes are major sources of ROS but the mechanisms regulating changes in Nox expression in disease states remain poorly understood. Epigenetics encompasses a number of mechanisms that cells employ to regulate the ability to read and transcribe DNA. Histone acetylation is a prominent example of an epigenetic mechanism regulating the expression of numerous genes by altering chromatin accessibility. The goal of this study was to determine whether inhibition of histone deacetylases (HDAC) affects the expression of Nox isoforms and reduces pulmonary hypertension. In immune cells, we found that multiple HDAC inhibitors robustly decreased Nox2 mRNA and protein expression in a dose-dependent manner concomitant with reduced superoxide production. This effect was not restricted to Nox2 as expression of Nox1, Nox4 and Nox5 was also reduced by HDAC inhibition. Surprisingly, Nox promoter-luciferase activity was unchanged in the presence of HDAC inhibitors. In macrophages and lung fibroblasts, ChIP experiments revealed that HDAC inhibitors block the binding of RNA polymerase II and the histone acetyltransferase p300 to the Nox2, Nox4 and Nox5 promoter regions and decrease histones activation marks (H3K4me3 and H3K9ac) at these promoter sites. We further show that the ability of CRISPR-ON to drive transcription of Nox1, Nox2, Nox4 and Nox5 genes is blocked by HDAC inhibitors. In a monocrotaline (MCT) rat model of PAH, multiple HDAC isoforms are upregulated in isolated pulmonary arteries, and HDAC inhibitors attenuate Nox expression in isolated pulmonary arteries and reduce indices of PAH. In conclusion, HDAC inhibitors potently suppress Nox gene expression both in vitro and in vivo via epigenetically regulating chromatin accessibility.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อระดับสายพันธุ์ปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) มากเกินไปและรูป NADPH oxidases (Nox) เพิ่มขึ้นได้รับการเสนอเพื่อทำให้ความดันโลหิตสูงหลอดเลือดแดงปอด (ผา) และอื่น ๆ โรคหัวใจและหลอดเลือด (CVD) เอนไซม์ Nox เป็นแหล่งสำคัญของ ROS แต่กลไกการควบคุมการเปลี่ยนแปลงในนิพจน์ Nox ในอเมริกาโรคยังคงเข้าใจได้ไม่ดี Epigenetics ครอบคลุมจำนวนของกลไกที่เซลล์ใช้ในการควบคุมความสามารถในการอ่าน และจำลองดีเอ็นเอ Acetylation สโตนเป็นตัวอย่างที่โดดเด่นของกลไก epigenetic การควบคุมการแสดงออกของยีนมากมาย ด้วยการเปลี่ยนการเข้าถึงโครมาติน เป้าหมายของการศึกษานี้คือการ ตรวจสอบว่า การยับยั้งของสโตน deacetylases (HDAC) มีผลต่อการแสดงออกของ Nox isoforms และลดความดันโลหิตสูงปอด ในเซลล์ภูมิคุ้มกัน เราพบว่า สารยับยั้ง HDAC หลายอย่างทนทานลดลง Nox2 mRNA และโปรตีนนิพจน์ในลักษณะขึ้นอยู่กับปริมาณมั่นใจกับการผลิตซูเปอร์ออกไซด์ลดลง ผลกระทบนี้ไม่จำกัด Nox2 เป็นของ Nox1, Nox4 และ Nox5 ยังลดลง โดยการยับยั้ง HDAC น่าแปลกที่ Nox โปรโมเตอร์ luciferase กิจกรรมถูกเปลี่ยนแปลงในสารยับยั้ง HDAC ในแมโครฟาจและ fibroblasts ปอด การทดลองชิเปิดเผยว่า สารยับยั้ง HDAC บล็อกรวมของอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรส II และ p300 acetyltransferase สโตน Nox2, Nox4 และ Nox5 โปรโมเตอร์ภูมิภาคและลด histones เปิดใช้เครื่องหมาย (H3K4me3 และ H3K9ac) ในเว็บไซต์เหล่านี้โปรโมเตอร์ เพิ่มเติมแสดงว่า ความสามารถของ CRISPR บนไดรฟ์ transcription ของยีน Nox1, Nox2, Nox4 และ Nox5 ถูกบล็อค โดยยับยั้ง HDAC ใน monocrotaline (MCT) รูปแบบของผา isoforms HDAC หลาย upregulated ในหลอดแยก และ HDAC ยับยั้งลดทอนนิพจน์ Nox ในหลอดแยก และลดดัชนีของหน้าผา ในบทสรุป HDAC ยับยั้งระงับ Nox ยีนทั้งในหลอดทดลอง และในร่างกายผ่านการควบคุมการเข้าถึงโครมาติน epigenetically potently

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
ระดับที่มากเกินไปของสายพันธุ์ปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) และการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ oxidases NADPH (Nox) ได้รับการเสนอเพื่อนำไปสู่ความดันโลหิตสูงหลอดเลือดปอด (PAH) และโรคหลอดเลือดหัวใจอื่น ๆ (CVD) เอนไซม์ NOx เป็นแหล่งสำคัญของ ROS แต่กลไกการควบคุมการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกในรัฐ Nox โรคยังคงเข้าใจได้ไม่ดี epigenetics ครอบคลุมจำนวนของกลไกที่เซลล์จ้างในการควบคุมความสามารถในการอ่านและคัดลอกดีเอ็นเอ สโตน acetylation เป็นตัวอย่างที่โดดเด่นของกลไก epigenetic ควบคุมการแสดงออกของยีนจำนวนมากโดยการเปลี่ยนการเข้าถึงโครมาติ เป้าหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อตรวจสอบว่าการยับยั้งการ deacetylases สโตน (HDAC) มีผลต่อการแสดงออกของไอโซฟอร์ม Nox ​​และลดความดันโลหิตสูงในปอด ในเซลล์ภูมิคุ้มกันเราพบว่าสารยับยั้งการ HDAC หลายเข้มลดลง Nox2 mRNA และการแสดงออกของโปรตีนในปริมาณขึ้นอยู่กับลักษณะที่เกิดขึ้นพร้อมกันกับการผลิต superoxide ลดลง ผลกระทบนี้ไม่ได้ถูก จำกัด ให้เป็น Nox2 การแสดงออกของ Nox1, Nox4 และ Nox5 ยังลดลงโดยการยับยั้งการ HDAC น่าแปลกที่ Nox กิจกรรมโปรโมเตอร์ luciferase ไม่เปลี่ยนแปลงในการปรากฏตัวของสารยับยั้งการ HDAC ในขนาดใหญ่และเซลล์ปอดทดลองชิปเปิดเผยว่าสารยับยั้งการ HDAC ป้องกันผูกพันของโพลิเมอร์ rna ครั้งที่สองและ P300 สโตน acetyltransferase ไป Nox2, Nox4 และภูมิภาคก่อการ Nox5 และลด histones เครื่องหมายยืนยันการใช้งาน (H3K4me3 และ H3K9ac) ที่เว็บไซต์ก่อการเหล่านี้ เรายังแสดงให้เห็นว่าความสามารถของ CRISPR-ON ที่จะขับรถถอดความจาก Nox1, Nox2, Nox4 และ Nox5 ยีนถูกบล็อกโดยการยับยั้งการ HDAC ในรูปแบบ monocrotaline (MCT) หนูของ PAH, ไอโซฟอร์ม HDAC หลาย upregulated ในหลอดเลือดแดงปอดโดดเดี่ยวและสารยับยั้งการ HDAC ผอมแสดงออก Nox ในหลอดเลือดแดงปอดโดดเดี่ยวและลดดัชนี PAH สรุปได้ว่าสารยับยั้งการ HDAC potently ปราบปรามการแสดงออกของยีน Nox ทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายผ่านทาง epigenetically การควบคุมการเข้าถึงโครมาติ