Rhodamine 123 and Hoechst 33258 pro

Rhodamine 123 and Hoechst 33258 probes were used to study the effects of EOs on mitochondrial membrane potential and chromatin condensation, respectively. HCT 116 cells (10 × 104 per well) were treated with 25, 50, and 90 μg/mL (IC25, IC50, and IC90) of EOs and 5 μg/mL of 5-FU for 24 h. Afterwards, cells were washed with phosphate buffered saline (PBS), fixed in 4% paraformaldehyde for 20 min, and stained with Rhodamine 123 (1 μg/mL) and Hoechst 33258 (10 μg/mL) for 20 min in the dark. After washing twice with PBS, cells were examined under an inverted fluorescent microscope (EVOS fl, Digital microscopy group, USA) using red and blue filters for Rhodamine 123 and Hoechst 33258 stains, respectively. The number of cells with apoptotic morphology was counted in five randomly selected fields per well. The apoptotic index was calculated as percentage of apoptotic cells compared to the total number of cells. The results were presented as mean ± SD (n = 3) (Aisha et al., 2012).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Rhodamine 123 และคลิปปากตะเข้อย่างไร Hoechst 33258 ถูกใช้ในการศึกษาผลของ EOs mitochondrial เยื่อที่มีศักยภาพและมีหยดน้ำเกาะโครมาติน ตามลำดับ HCT 116 เซลล์ (10 × 104 ต่อดี) ได้รับการรักษา กับ 25, 50, 90 μg/mL (IC25, IC50 และ IC90) ของ EOs และ μg 5 มล.ของ 5-FU สำหรับ 24 h. หลัง เซลล์ถูกล้าง ด้วยน้ำเกลือฟอสเฟต buffered (PBS), ถาวรใน paraformaldehyde 4% ใน 20 นาที และสีกับ Rhodamine 123 (1 μg/mL) และอย่างไร Hoechst 33258 (10 μg/mL) ใน 20 นาทีในมืด หลังจากล้างด้วย PBS สอง เซลล์ที่ถูกตรวจสอบภายใต้การกลับหัวเรืองแสงกล้องจุลทรรศน์ (EVOS fl กลุ่มดิจิตอล microscopy สหรัฐอเมริกา) โดยใช้สีแดง และน้ำเงินกรอง Rhodamine 123 และอย่างไร Hoechst 33258 คราบ ตามลำดับ จำนวนเซลล์ที่มีสัณฐานวิทยา apoptotic ถูกนับรวมในเขตข้อมูลที่เลือกแบบสุ่มห้าต่อดี มีคำนวณดัชนี apoptotic เป็นเปอร์เซ็นต์เมื่อเทียบกับจำนวนเซลล์ทั้งหมดเซลล์ apoptotic ผลลัพธ์ได้แสดงเป็นหมายถึง ± SD (n = 3) (อาอิชะหฺและ al., 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

rhodamine 123 และ Hoechst 33258 ฟิวส์ถูกนำมาใช้ในการศึกษาผลกระทบของ EOS ศักยภาพเยื่อยลและควบแน่นโครมาตามลำดับ HCT 116 เซลล์ (10 × 104 ต่อกัน) ได้รับการรักษาที่มี 25, 50, และ 90 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร (IC25, IC50 และ IC90) ของ EOS และ 5 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร 5-FU เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากนั้นเซลล์ถูกล้างด้วยน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส) การแก้ไขใน paraformaldehyde 4% เป็นเวลา 20 นาทีและย้อมด้วยสีโรดามีน 123 (1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) และ Hoechst 33258 (10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) เป็นเวลา 20 นาทีในที่มืด หลังจากล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสเซลล์ได้รับการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงกลับ (ชั้น EVOS กลุ่มกล้องจุลทรรศน์ดิจิตอลสหรัฐอเมริกา) ใช้ตัวกรองสีแดงและสีฟ้าสำหรับโรดามีน 123 และ Hoechst 33,258 คราบตามลำดับ จำนวนของเซลล์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยา apoptotic นับในห้าสาขาที่สุ่มเลือกต่อกัน ดัชนี apoptotic ที่คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ apoptotic เมื่อเทียบกับจำนวนของเซลล์ ผลที่ได้ถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย± SD (n = 3) (Aisha et al., 2012)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จาก 123 และ Hoechst 33258 จึงถูกใช้เพื่อศึกษาผลของการใช้เมมเบรนในศักยภาพและการควบแน่น ตามลำดับ โรเซลล์ ( 116 10 × 104 ต่อ ) ได้รับการรักษาด้วย 25 , 50 และ 90 μ g / ml ( ic25 ic50 , และ ic90 ) ของกล้อง และ 5 μ 5-fu g / ml เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากนั้นเซลล์ก็ล้างด้วยเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) คงที่ 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์ 20 มินand stained with Rhodamine 123 (1 μg/mL) and Hoechst 33258 (10 μg/mL) for 20 min in the dark. หลังจากล้างสองครั้งกับ PBS , เซลล์ศึกษาภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบฟลูออเรสเซนต์ ( ด้วยกล้องจุลทรรศน์ดิจิตอลโวส , กลุ่ม , USA ) โดยใช้ตัวกรองสีแดงและสีฟ้าสำหรับจากและ Hoechst 33258 คราบ ตามลำดับจำนวนเซลล์ในกลุ่มที่มีลักษณะถูกนับในห้าสุ่มฟิลด์ ต่อ ดี ดัชนีคำนวณเป็นร้อยละของกลุ่มที่มีเนื้อเยื่อเทียบกับจำนวนเซลล์ the results สำหรับ presented as รายการ± sd ( n = 3 ) ( ฆ่าคน et al . , อย่างเดียว ) .