2.3. Detection of antimicrobial act

2.3. Detection of antimicrobial activity

Cell-free culture supernatant (CFS) was obtained by centrifugation of an overnight culture – grown in MRS broth – of E. mundtii Tw56 at 8000 g for 10 min at 4 °C. Cell-free culture supernatant was adjusted to pH 6.50 using 0.4 M NaOH and heated at 100 °C for 5 min in order to inactivate endogenous proteases. Afterwards, CFS was filtered through 0.20 μm pore size (Sartorius, Stedim Biotech, Germany) and stored at −20 °C until use. The antimicrobial activity of CFS was determinated by the agar well diffusion assay (AWDA) as previously described by Rivas, Castro, Vallejo, Marguet, and Campos (2012). Culture media used – MRS or Tryptone Soy Agar (TSA), depending on the microorganism – are listed in Table 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. การตรวจจับกิจกรรมต้านจุลชีพเซลล์ฟรีวัฒนธรรม supernatant (CFS) ได้รับ โดยการหมุนเหวี่ยงของวัฒนธรรมคืน – ปลูกในน้ำซุปที่ MRS ของ E. mundtii Tw56 ที่ 8000 กรัมสำหรับ 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส เซลล์ฟรีวัฒนธรรม supernatant ปรับ pH โดยใช้ NaOH 0.4 เมตร 6.50 และความร้อนที่ 100 ° C เป็นเวลา 5 นาทีเพื่อปิดการทำงานของโปรตีเอสที่ภายนอก หลังจากนั้น CFS ถูกกรองผ่าน 0.20 ไมครอนขนาดของรูพรุน (บริษัทซาร์โทเรียส Stedim เทคโนโลยีชีวภาพ เยอรมนี) และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนกว่าจะใช้ กิจกรรมการต้านจุลชีพของ CFS ถูก determinated โดยทดสอบแพร่ดีวุ้น (AWDA) ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยโคธาวา คาสโตร Vallejo, Marguet และสไลด์ (2012) วัฒนธรรมสื่อที่ใช้ – MRS หรือ Tryptone ถั่วเหลืองวุ้น (TSA), ขึ้นอยู่กับจุลินทรีย์ – ระบุไว้ในตารางที่ 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การตรวจหาฤทธิ์ต้านจุลชีพ

มือถือฟรีใสวัฒนธรรม (CFS) ที่ได้รับจากการหมุนเหวี่ยงของวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน - ปลูกในน้ำซุป MRS - อี mundtii Tw56 ที่ 8000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ° C มือถือฟรีใสวัฒนธรรมมีการปรับค่าพีเอช 6.50 ใช้ 0.4 M NaOH และให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีเพื่อยับยั้งโปรตีเอสภายนอก หลังจากนั้น CFS ถูกกรองผ่าน 0.20 ไมครอนขนาดรูขุมขน (Sartorius, Stedim ไบโอเทค, เยอรมนี) และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน กิจกรรมต้านจุลชีพของ CFS ถูก determinated โดยวุ้นดีแพร่ทดสอบ (Awda) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยวาสคาสโตรกาวัล Marguet และโปส (2012) สื่อวัฒนธรรมมือสอง - MRS หรือ Tryptone ถั่วเหลืองวุ้น (TSA) ขึ้นอยู่กับจุลินทรีย์ - มีการระบุไว้ในตารางที่ 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การตรวจหาฤทธิ์ต้านจุลชีพฟรีเซลล์วัฒนธรรมน่าน ( CFS ) ได้โดยการหมุนเหวี่ยงของ–วัฒนธรรมค้างคืนที่ปลูกใน MRS broth ) ของ E . mundtii tw56 ที่ 8000 กรัม สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ° C ฟรีเซลล์วัฒนธรรมนำปรับ pH 6.50 ใช้ 0.4 M NaOH และอุณหภูมิ 100 องศา C เป็นเวลา 5 นาที เพื่อทำให้โครงสร้างทาง . หลังจากนั้น , CFS ถูกกรองผ่าน 0.20 μ M ขนาดรูพรุน ( stedim Sartorius , ไบโอเทค , เยอรมนี ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C −จนใช้ กิจกรรมการต้านจุลชีพของ CFS คือ determinated โดยวิธี agar คือการแพร่กระจาย ( awda ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า โดยคาสโตรวัลเลโฮ marguet Rivas , , , , และ แคมโปส ( 2012 ) สื่อวัฒนธรรมและคุณนาย หรือ ทริพโทนใช้ถั่วเหลือง ( TSA ) ขึ้นอยู่กับจุลชีพ–มีการระบุไว้ในตารางที่ 1