2.2.2. Thiol-Michael additionA less

2.2.2. Thiol-Michael addition
A less common approach to the modification of polypeptides is the use of thiol-Michael addition reactions. This type of reaction is very common for small molecule or other types of polymer systems, but less typical for the main-chain functionalization of polypeptides [34]. In general, these types of reactions are much more common for bioconjugation (attaching synthetic molecules to biological ones), a recent example of which was shown by Jones et al. [35]. In a one-pot process, they first reduced the disulfide bridge of salmon calcitonin (a 32 amino acid calcitropic hormone) to yield the free thiol (cysteines in nature rarely occur in non-dimer configurations), and they were then were able to react the free thiols with an acrylate-endcapped PEG (7 equivalents, molar mass of ∼475 g mol−1) using tris(2-carboxyethyl)phosphine as the water soluble catalyst in 500 mM PBS buffer (pH of 6.5) at ambient temperatures for 2 h. The reaction was quantitative (confirmed by MALDI-ToF), and the PEGylated calcitonin retained its original activity (lowering plasma calcium when injected intravenously). This is a good example of a platform that can easily be extended to other biological molecules because of the ease of synthesis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.2. Michael thiol เพิ่มวิธีทั่วไปน้อยกว่าการปรับเปลี่ยนของเปปไทด์จะใช้ปฏิกิริยานี้ Michael thiol ปฏิกิริยาชนิดนี้เป็นกันมากสำหรับโมเลกุลเล็กหรือชนิดอื่น ๆ ของระบบพอลิเมอร์ แต่น้อยกว่าปกติสำหรับ functionalization โซ่หลักของเปปไทด์ [34] ทั่วไป ชนิดของปฏิกิริยาเหล่านี้เป็นเรื่องธรรมดามากสำหรับ bioconjugation (แนบสังเคราะห์โมเลกุลชีวภาพคน), ตัวอย่างล่าสุดที่ถูกแสดงโดย Jones et al. [35] ในกระบวนการหม้อหนึ่ง พวกเขาครั้งแรกลดลงสะพานไดซัลไฟด์ (เป็นกรดอะมิโน 32 calcitropic ฮอร์โมน) calcitonin แซลมอนให้ thiol ฟรี (cysteines ในธรรมชาติไม่ค่อยเกิดขึ้นในการกำหนดค่าไม่ใช่ผลิตของ dimer), และพวกแล้วสามารถตอบสนอง thiols ฟรีกับ endcapped acrylate การตรึง (เทียบเท่า 7 สบมวลของ ∼475 g mol−1) ใช้ tris(2-carboxyethyl) phosphine เป็นเศษน้ำละลายใน PBS 500 มม.บัฟเฟอร์ (pH 6.5) ที่อุณหภูมิแวดล้อมสำหรับ 2 h คือปฏิกิริยาเชิงปริมาณ (ยืนยัน โดย MALDI ToF), และ PEGylated calcitonin รักษากิจกรรมของเดิม (ลดแคลเซียมในพลาสมาเมื่อฉีด intravenously) นี้เป็นตัวอย่างที่ดีของแพลตฟอร์มที่สามารถได้ขยายให้โมเลกุลชีวภาพอื่น ๆ เนื่องจากความสะดวกในการสังเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.2 thiol ไมเคิลนอกจากนี้
วิธีที่พบน้อยกว่าในการปรับเปลี่ยนของ polypeptides คือการใช้ปฏิกิริยานอกจาก thiol ไมเคิล ประเภทของปฏิกิริยานี้เป็นเรื่องธรรมดามากสำหรับโมเลกุลขนาดเล็กหรือชนิดอื่น ๆ ของระบบลิเมอร์ แต่โดยทั่วไปน้อยลงสำหรับ functionalization หลักห่วงโซ่ของ polypeptides [34] โดยทั่วไปประเภทนี้ของปฏิกิริยาเป็นเรื่องธรรมดามากขึ้นสำหรับ bioconjugation (ติดสังเคราะห์โมเลกุลกับคนทางชีวภาพ) ตัวอย่างเช่นเมื่อเร็ว ๆ นี้ซึ่งแสดงให้เห็นโดยโจนส์และคณะ [35] ในกระบวนการหนึ่งหม้อพวกเขาครั้งแรกลดลงสะพานซัลไฟด์ของ calcitonin ปลาแซลมอน (กรดอะมิโน 32 ฮอร์โมน calcitropic) เพื่อให้ thiol ฟรี (cysteines ในธรรมชาติไม่ค่อยเกิดขึ้นในการกำหนดค่าที่ไม่ dimer) และพวกเขาได้แล้วก็สามารถที่จะตอบสนอง thiols ฟรีกับอะคริเลต-endcapped PEG (7 เทียบเท่ามวลโมเลกุลของ ~475 กรัม mol-1) โดย บริษัท ทริส (2-carboxyethyl) ฟอสฟีนเป็นน้ำตัวเร่งปฏิกิริยาละลายใน 500 มิลลิบัฟเฟอร์พีบีเอส (pH 6.5) ที่อุณหภูมิโดยรอบสำหรับ 2 ชั่วโมง ปฏิกิริยาที่เป็นเชิงปริมาณ (การยืนยันจาก MALDI-ToF) และ calcitonin PEGylated สะสมกิจกรรมเดิม (ลดแคลเซียมพลาสม่าเมื่อฉีดเข้าเส้นเลือดดำ) นี่คือตัวอย่างที่ดีของแพลตฟอร์มที่สามารถจะขยายไปยังโมเลกุลทางชีวภาพอื่น ๆ เพราะความสะดวกของการสังเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.2 . ขนาดไมเคิล นอกจากนี้
วิธีการทั่วไปน้อยกว่าการเปลี่ยนแปลงของโปรตีน คือ การใช้ขนาดไมเคิล นอกจากนี้ปฏิกิริยา ปฏิกิริยาประเภทนี้เป็นเรื่องธรรมดามากสำหรับโมเลกุลขนาดเล็กหรือประเภทอื่น ๆของระบบพอลิเมอร์ แต่น้อยกว่าปกติสำหรับหลัก functionalization โซ่เปปไทด์ [ 34 ] โดยทั่วไปเหล่านี้ประเภทของปฏิกิริยาจะมากทั่วไปสำหรับ bioconjugation ( แนบตัวโมเลกุลสังเคราะห์ทางชีวภาพ ) ตัวอย่างล่าสุดที่แสดงโดย Jones et al . [ 3 ] ในกระบวนการหนึ่งหม้อ พวกเขาลดเอราวัณของแซลมอนแคลซิโทนิน ( 32 calcitropic กรดอะมิโนฮอร์โมน ) ให้ผลผลิต ( cysteines ไทออลอิสระในธรรมชาติเกิดขึ้นน้อยมากในการตั้งค่าไม่เมอร์ )และพวกเขาก็สามารถที่จะตอบสนอง thiols ฟรีด้วยอะคริเลต endcapped PEG ( เทียบเท่า 7 , 475 กรัมโมลมวลของ∼ mol − 1 ) ใช้ต่อ ( 2-carboxyethyl ) ฟอสฟีนเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาที่ละลายน้ำได้ใน 500 มม. PBS buffer pH 6.5 ) ที่อุณหภูมิแวดล้อมเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ปฏิกิริยาเชิงปริมาณ ( ยืนยันโดย มา ดิ tof )และ pegylated แอ้มสะสมของกิจกรรมเดิม ( ลดพลาสมา แคลเซียม เมื่อฉีดทางเส้นเลือด ) นี้เป็นตัวอย่างที่ดีของแพลตฟอร์มที่สามารถจะขยายไปยังโมเลกุลทางชีวภาพอื่น ๆเพราะความสะดวกของการสังเคราะห์ .