2. Materials andmethods2.1. Larval

2. Materials andmethods
2.1. Larval supply and rearing protocol
Beluga specimens used in the present study were obtained by
the hormonally-induced (LHRHa2) spawning of 2 females that were
fertilized with the milt of 3 males at the Shahid Marjani Sturgeon
Center (Gorgan, Iran). Eggs were incubated in Yushchenko incubators
at 11–12 °C in a closed freshwater recirculation system. After
eight days of incubation, hatching took place (hatching rate: 68%)
and 1800 newly hatched larvae (body weight, BW: 15.6 ± 0.7 mg;
total length, TL: 11.2 ± 0.4 mm) were placed in three 500 l circular
fiberglass tanks connected to a flow-through freshwater system.
Malformation rate at hatching (11.2 mm TL) was 6.1%. During the
larval rearing period, water temperature, dissolved oxygen, pH
and flow rate were 16.5 ± 0.2 °C, 10.7 ± 0.3 mg/l, 7.8 ± 0.1 and
5.7 ± 0.4 l/min, respectively. Larvaewere reared under natural photoperiod
(37°4′30.62″ N, 54°40′10.45″ E). All tank surfaces were
scrubbed and the bottom of the tank siphoned to remove uneaten
feed and feces 3 times a day.
The feeding protocol used for H. huso larval rearing fromhatching to
the juvenile stage is summarized in Fig. 1. In brief, larvae were fed by a
mixture of Artemia nauplii (EG, INVE, Belgium) and Daphnia sp. from12
to 25 dph (199.2–432.5 degree days post hatch, ddph) (500–800
nauplii/larvae/day). A short co-feeding phase based on Cladocerans
and a compound diet (BioMar, Denmark; D1—particle size = 0.5 mm)
was conducted from 25 to 30 dph (432.5–534 ddph), whereas from
this age onward, fish were fed only with the inert feed (BioMar,
Denmark; D2—particle size = 0.8 mm) at a feeding rate of 30 and
20% of stocked fish biomass respectively. The compound diet was
given to larvae from 4-6 times per day and feed ration and particle
size were progressively adjusted for fish size from 25 to 50 dph
(432.5–906.5 ddph).
Proximate composition (dry matter) of live prey (Artemia nauplii
and Daphnia sp.) was determined in 3 samples per type of live prey.
Crude protein was determined by the Kjeldahl method (N × 6.25)
using an automatic Kjeldahl system (Behrotest WD 40, Germany) and
crude fat content was determined by Soxhlet method (Folch et al.,
1957). Total protein and lipid content in Artemia were 65.6 ± 1.4%
and 15.1 ± 0.2%, respectively, whereas Daphnia sp. contained 52.6 ±
1.9% of proteins and 11.1 ± 0.1% of lipids. The proximate composition
of compound diets (D1 and D2) was 63 and 58% of total protein, 11
and 15% of total lipids, and 11.6 and 11.5% total carbohydrate respectively
(data provided by feed manufacturer).
2.2. Fish growth measurements and sampling schedule
In order to determine larval growth in weight (BW) and total length
(TL), fish (n = 40)were daily sampled randomly prior to feeding in the
morning using a pipette with a large opening from hatching to 18 dph
(306 ddph), whereas samples were collected every 2 days from 18 to
50 dph (306–906.5 ddph). Sampled larvae were sacrificed with an
overdose of tricaine methanosulphonate (MS-222, Sigma-Aldrich,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 วัสดุ andmethods
2.1 อุปทานตัวอ่อนและการเลี้ยงโปรโตคอล
เบลูตัวอย่างที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับโดย
hormonally เกิด (lhrha2) วิ่งพล่านจาก 2 หญิงที่ได้รับการเพาะ
ด้วยน้ำเชื้อจาก 3 ผู้ชายที่ Shahid Marjani ปลาสเตอร์เจียน
ศูนย์ (gorgan, อิหร่าน) . ไข่ถูกบ่มในตู้อบปฏิบัติ
ที่ 11-12 องศาเซลเซียสในระบบหมุนเวียนน้ำจืดปิด หลังจาก
แปดวันของการบ่มฟักเกิดขึ้น (อัตราการฟัก: 68%)
และ 1,800 ตัวอ่อนที่เพิ่งฟักออก (น้ำหนักตัว BW: 15.6 ± 0.7 มิลลิกรัม
รวมความยาว TL: 11.2 ± 0.4 มม. ) ถูกวางไว้ในสามกลม 500 ลิตร
ถังไฟเบอร์กลาสที่เชื่อมต่อกับระบบน้ำจืดที่ไหลผ่าน.
อัตราจุกที่ฟัก (11.2 มม. TL) เป็น 6.1% ในช่วงระยะเวลาการเลี้ยง
ตัวอ่อนอุณหภูมิของน้ำ, ออกซิเจนละลายน้ำ ph
และอัตราการไหลอยู่ที่ 16.5 ± 0.2 ° C, 10.7 ± 0.3 mg / l 7.8 ± 0.1 และ 5.7 ±
0.4 ลิตร / นาทีตามลำดับ larvaewere เลี้ยงภายใต้แสงธรรมชาติ
(37 ° 4'30 .62 "N, 54 ° 40'10 .45" จ) พื้นผิวรถถังทั้งหมดถูก
ขัดและด้านล่างของถังดูดเอา uneaten
อาหารและอุจจาระ 3 ครั้งต่อวัน.
โปรโตคอลการให้อาหารที่ใช้สำหรับชั่วโมง huso การเลี้ยงตัวอ่อนที่จะ fromhatching
เวทีเด็กและเยาวชนที่มีการสรุปในมะเดื่อ 1 ในช่วงสั้นตัวอ่อนได้รับการเลี้ยงดูโดย
ส่วนผสมของอาร์ทีเมียนอเพลียส (เช่นอสังหาริม, เบลเยี่ยม) และไรน้ำเอสพี from12
25 DPH (โพสต์วันที่ 199.2-432.5 องศาฟัก ddph) (500-800
นอเพลียส / ตัวอ่อน / วัน) ขั้นตอนการร่วมให้อาหารในระยะสั้นตาม cladocerans
และสารอาหาร (Biomar, เดนมาร์ก; ขนาดอนุภาค d1 = 0.5 มม. )
ได้ดำเนิน 25-30 DPH (432.5-534 ddph)ในขณะที่อายุ
จากนี้เป็นต้นไปปลาได้รับการเลี้ยงดูด้วยอาหารเฉื่อย (Biomar
เดนมาร์ก; ขนาดอนุภาค d2 = 0.8 มม. ) ที่อัตราการให้นมจาก 30 และ
20% ของน้ำหนักปลาที่เลี้ยงตามลำดับ สารอาหารที่ได้รับการ
ให้กับตัวอ่อน 4-6 ครั้งต่อวันและการปันส่วนอาหารและอนุภาคขนาด
ปรับความก้าวหน้าสำหรับขนาดปลา 25-50 DPH
(432.5-906.5 ddph).
องค์ประกอบใกล้เคียง (ไม่แห้ง) เหยื่อสด (อาร์ทีเมียนอเพลียสและไรน้ำ
sp.) ถูกกำหนดใน 3 ตัวอย่างต่อชนิดของเหยื่อสด.
โปรตีนถูกกำหนดโดยวิธี Kjeldahl (n × 6.25)
ใช้ระบบ Kjeldahl อัตโนมัติ ( WD behrotest 40, เยอรมนี) และ
ปริมาณไขมันดิบถูกกำหนดโดยวิธี Soxhlet (Folch ตอัล.
1957) โปรตีนรวมและไขมันในอาร์ทีเมียเป็น 65.6 ± 1.4%
และ 15.1 ± 0.2% ตามลำดับในขณะที่ไรน้ำเอสพี มี 52.6 ± 1.9%
ของโปรตีนและ 11.1 ± 0.1% ของไขมัน องค์ประกอบใกล้เคียง
ของอาหารผสม (d1 และ d2) เป็น 63 และ 58% ของโปรตีนทั้งหมด 11
และ 15% ของไขมันรวมและ 11.6 และ 11.5% ตามลำดับรวมคาร์โบไฮเดรต
(ข้อมูลจาก บริษัท ผู้ผลิตอาหารสัตว์).
2.2 การวัดการเจริญเติบโตของปลาและตารางการสุ่มตัวอย่าง
เพื่อตรวจสอบการเจริญเติบโตของตัวอ่อนในน้ำหนัก (BW) และรวมระยะเวลาใน
(TL) ปลา (n = 40) มีตัวอย่างในชีวิตประจำวันแบบสุ่มก่อนที่จะเลี้ยงลูกด้วยนมในตอนเช้า
โดยใช้ปิเปตด้วยการเปิดขนาดใหญ่จากฟักถึง 18 DPH
( 306 ddph) ในขณะที่กลุ่มตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมทุก 2 วันนับจาก 18 ถึง 50
DPH (306-906.5 ddph) ตัวอ่อนตัวอย่างได้เสียสละด้วย
ยาเกินขนาดของ tricaine methanosulphonate (MS-222

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุ andmethods
2.1 Larval ซัพพลายและการเพาะเลี้ยงโพรโทคอล
เบลูไว้เป็นตัวอย่างใช้ในการศึกษาปัจจุบันได้รับมาโดย
วางเกิดจาก hormonally (LHRHa2) ไข่ของหญิง 2 ที่
ปฏิสนธิกับ milt ของชาย 3 ที่ปลาสเตอร์เจียน Marjani หิท
ศูนย์ (อาวาร์ อิหร่าน) ไข่ถูก incubated ในการผลิตและ Yushchenko
ที่ 11–12 ° C ในระบบปิด recirculation ปลา หลังจาก
วันที่แปดของคณะทันตแพทยศาสตร์ ฟักไข่เกิด (อัตราฟักไข่: 68%)
และ 1800 เพิ่งฟักตัวอ่อน (ร่างกายน้ำหนัก BW: ไม่เกิน 15.6 ± 0.7 มิลลิกรัม;
รวมความยาว TL: 11.2 ± 0.4 mm) ไว้ในวง 500 l 3
ถังไฟเบอร์เชื่อมต่อกับการไหลผ่านน้ำจืดระบบการ
อัตรา Malformation ที่ฟัก (11.2 มม. TL) เป็น 6.1% ในระหว่าง
larval แม่ระยะเวลา อุณหภูมิน้ำ ส่วนยุบออกซิเจน pH
และอัตราการไหล 16.5 ± 0.2 ° C, 10.7 ± 7.8 ± 0.1, 0.3 mg/l และ
5.7 ± 0.4 l/min ตามลำดับ Larvaewere ผลิตภัณฑ์ภายใต้ช่วงแสงธรรมชาติ
(37 ° 4′30 62″ N, 54 ° 40′10. 45″ E) พื้นผิวของถังทั้งหมด
scrubbed และด้านล่างของถัง siphoned เอา uneaten
อาหารและอุจจาระ 3 ครั้งเป็นวัน
H. huso larval rearing fromhatching การใช้โพรโทคออาหาร
เวทีเยาวชนสรุปใน Fig. 1 สังเขป ตัวอ่อนถูกเลี้ยงโดยการ
ผสม Artemia nauplii (EG, INVE เบลเยียม) และ Daphnia sp. from12
ไป 25 ดีพีเอช (199.2–432.5 ปริญญาวันไปรษณีย์แฮทช์ ddph) (500–800
nauplii ตัวอ่อน/วัน) เฟสร่วมอาหารสั้นตาม Cladocerans
และอาหารผสม (BioMar เดนมาร์ก ล่าสุดโดย — ขนาดอนุภาค = 0.5 mm)
ดำเนินจาก 25 ไป 30 ดีพีเอช (432.5–534 ddph), ในขณะที่จาก
ยุคนี้เป็นต้นไป ปลาถูกเลี้ยง ด้วยอาหาร inert (BioMar,
เดนมาร์ก D2 – ขนาดอนุภาค = 0.8 mm) ราคาอาหาร 30 และ
20% เก็บปลาชีวมวลตามลำดับ อาหารผสม
ให้ตัวอ่อนจาก 4 - 6 ครั้งต่อวัน และอาหารอาหารและอนุภาค
ขนาดมีความก้าวหน้าปรับขนาดปลา 25 ดีพีเอช 50
(432.5–906.5 ddph)
เคียงองค์ประกอบ (เรื่องแห้ง) ของเหยื่อสด (Artemia nauplii
Daphnia sp.และ) ถูกกำหนดในตัวอย่างที่ 3 สำหรับแต่ละชนิดของเหยื่อสด
กำหนดน้ำมันโปรตีน ด้วยวิธี Kjeldahl (N × 6.25)
ใช้ระบบ Kjeldahl การอัตโนมัติ (Behrotest WD 40 เยอรมนี) และ
น้ำมันไขมันถูกกำหนด โดยวิธี Soxhlet (Folch et al.,
1957) รวมเนื้อหาของโปรตีนและไขมันใน Artemia 65.6 ± 1.4%
15.1 ± 0.2% ตามลำดับ ในขณะที่ Daphnia sp.อยู่ 52.6 ±
1.9% ของโปรตีนและ 11.1 ± 0.1% ของโครงการ องค์ประกอบเคียง
ของอาหารผสม (ง 1 และ D2) ถูก 63 และ 58% ของโปรตีนทั้งหมด 11
และ 15% ของทั้งหมด โครงการ และ 11.6 และ 11.5% รวมคาร์โบไฮเดรตตามลำดับ
(data provided by feed manufacturer).
2.2 ปลาเจริญเติบโตของวัดและกำหนดการสุ่มตัวอย่าง
เพื่อกำหนดเติบโต larval น้ำหนัก (BW) และ length
(TL) รวม ปลา (n = 40) มีความทุกวันสุ่มก่อนการให้อาหารใน
เช้าใช้เปตต์แบบเปิดขนาดใหญ่จากฟักไข่ให้ 18 ดีพีเอช
(306 ddph) ในขณะที่ตัวอย่างถูกเก็บทุก 2 วันจาก 18 ไป
50 ดีพีเอช (306–906.5 ddph) ตัวอย่างตัวอ่อนได้เสียสละด้วยการ
ใช้ยาเกินขนาดของ tricaine methanosulphonate (MS-222 ซิกมา-Aldrich

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุ andmethods
2.1 . พาวเวอร์ซัพพลายเบทเทอร์จำกัดเกี่ยวกับตัวอ่อนและโปรโตคอล
Beluga School for Life เป็นตัวอย่างนำมาใช้ในที่อยู่ในปัจจุบันได้รับการศึกษามาเป็นโดย
ที่ hormonally - ก่อขึ้น( lhrha 2 )ปลาไข่ของหญิง 2 ที่อยู่
ปุ๋ยด้วย milt 3 ผู้ชายที่ shahid marjani ปลาซเทอ - จัน
Center ( gorgan ,อิหร่าน). ไข่ไก่เป็น incubated yushchenko
ซึ่งจะช่วยในตั้งอยู่ที่ C 11-12 11-12 11-12 °ในระบบในกรณีที่ปิดน้ำจืด หลังจาก
ตามมาตรฐานแปดวันของอบ,การแรเงาทับ:เอาไว้ได้(การแรเงาทับ:อัตรา: 68% )และ 1800
ฟักออกมาใหม่ลูกน้ำ(น้ำหนักตัว, BW : 15.6 ± 0.7 มก.;
รวมความยาว, TL : 11.2 ± 0.4 มม.)ถูกนำมาใส่ไว้ในสาม 500 L แบบกลมติดตั้งถังเก็บน้ำทำจากไฟเบอร์กลาส
ซึ่งจะช่วยเชื่อมต่อกับการไหลผ่านระบบน้ำจืด.
บาดแผลโดยอัตราดอกเบี้ยการแรเงาทับ:( 11.2 มม. TL )เป็น 6.1% . ในระหว่างช่วงเวลากระเพื่อมน้อยๆ
เกี่ยวกับตัวอ่อนที่ อุณหภูมิ น้ำละลาย pH ออกซิเจน
ตามมาตรฐานและมีอัตราการไหลของน้ำ 16.5 ± 0.2 ° C 10.7 ± 0.3 mg / L 7.8 ± 0.1 และ 5.7
± 0.4 L /นาทีตามลำดับ larvaewere ถอยหลังตาม photoperiod ธรรมชาติ
( 37 ° 4 " 30.62 " N 54 ° C 40 ' - 10.45 " E ) ห้องพักทั้งหมดในแท้งค์กักเก็บพื้นผิวได้
ถูและที่ด้านล่างของแท้งค์กักเก็บประการแรกในการลบยัง
ซึ่งจะช่วยให้อาหารและอุจจาระ 3 ครั้งต่อวัน.
ให้อาหารโปรโตคอลที่ใช้สำหรับ H huso เกี่ยวกับตัวอ่อนกระเพื่อมน้อยๆ fromhatching เพื่อตอบแทน
เวทีเยาวชนที่สามารถสรุปได้ในรูป 1 . ในบทสรุป,ลูกน้ำเป็นอาหารโดย
การผสมผสานของ artemia nauplii (เช่น inve ,เบลเยียม)และ daphnia sp .จาก 12
ถึง 25 dph ( 199.2 - 432.5 องศาวันที่ทำการไปรษณีย์แฮทช์, ddph )( 500 - 800
nauplii /ลูกน้ำ/วัน) ขั้นตอนในระยะทางสั้นๆเพื่อไปร่วมการป้อนนมที่ใช้ cladocerans
และอาหารผสม( biomar เดนมาร์กมม. D 1 - ขนาด อนุภาค = 0.5 )
เป็นผู้ดำเนินการตั้งแต่ 25 ถึง 30 dph ( 432.5 -534 ddph )ในขณะที่จาก
อายุนี้เป็นต้นไป,ปลาเป็นอาหารกินเท่านั้นพร้อมด้วยที่จะเคลื่อนไหวให้อาหาร( biomar ,
เดนมาร์ก; D 2 - ขนาด อนุภาค = 0.8 มม.)ในการป้อนนมอัตราของ 30 และ
20% จัดให้บริการอย่างครบครันของปลาจากชีวมวลตามลำดับ. การรับประทานอาหารที่ผสมเป็น
ซึ่งจะช่วยให้ลูกน้ำจาก 4-6 4-6 ครั้งต่อวันและซื้ออาหารและป้อนอาหารให้ฝุ่นละออง
ซึ่งจะช่วยปรับขนาดได้อย่างต่อเนื่องสำหรับขนาดปลาจาก 25 เป็น 50 dph
( 432.5 -906.5 ddph )..
การเขียนเรียงความใกล้ชิด(แห้งเรื่อง)ของ Live เหยื่อ( artemia nauplii
และ daphnia sp .)ได้กำหนดใน 3 ตัวอย่างต่อ ประเภท ของสดเป็นเหยื่อ.
น้ำมันดิบโปรตีนมีกำหนดโดย kjeldahl วิธีการ( N × 6.25 )
การใช้แบบอัตโนมัติ kjeldahl ระบบ( behrotest ด้วยรถขับเคลื่อนสี่ทิศทาง 40 ,เยอรมนี)และ
น้ำมันดิบไขมันก็ถูกกำหนดโดย soxhlet วิธีการ( folch et al .,
1957 ) เนื้อหา( lipid โปรตีนและทั้งหมดใน artemia ± 1.4 เป็น 65.6%
± 0.2 และ 15.1% ตามลำดับในขณะที่ daphnia sp .มีอยู่ 52.6 ±
1.9% ของโปรตีนและ 11.1 ± 0.1% ของไขมัน การเขียนเรียงความใกล้ชิดที่
ของอาหารผสม( D 1 และ D 2 )เป็น 63 และ 58% ของปริมาณโปรตีนสูง 11
และ 15% ของไขมันและคาร์โบไฮเดรตรวม 11.6 และ 11.5% ตามลำดับ
(ข้อมูลจากผู้ผลิตอาหารสัตว์)..
2.2 ปลาการขยายตัวการวัดและการลิ้มลอง
ตามมาตรฐานกำหนดตารางเวลาในการสั่งซื้อในการตรวจสอบเกี่ยวกับตัวอ่อนการขยายตัวของเศรษฐกิจในน้ำหนัก( BW )และความยาวโดยรวม
( TL ),ปลา( N = 40 )ได้ทุกวันแบบสุ่มตัวอย่างก่อนที่จะใส่ใน
ช่วงเช้าโดยใช้หลอดเล็กสำหรับดูดของเหลวพร้อมด้วยขนาดใหญ่เปิดจากการแรเงาทับ: 18 dph
( 306 ddph )ในขณะที่ตัวอย่างได้จากการเก็บข้อมูลทุก 2 วันตั้งแต่วันที่ 18 ถึง 50
dph ( 306 - 906.5 ddph ) ลูกน้ำตัวอย่างมีถวายด้วย
การกินยามากเกินขนาดของ tricaine methanosulphonate ( MS -222sigma-aldrich