2.4. Biochemical analysesAt the end

2.4. Biochemical analyses
At the end of the experiment (21 days), fish and live
feeds were sacrificed and subjected to various biochemical
analyses such as total protein (Lowry, Rosebrough, Farr,
& Randall, 1951), total free sugar (Roe, 1955), protein
bound sugar (Carroll, Longley, & Roe, 1956), total lipid
(Barnes & Blackstock, 1973; Folch, Less, & Stanley,
1957) and water content determination (Passoneau & Williams,
1953).
2.5. Fatty acid analyses
Total lipids were extracted from the samples by homogenizing
in 5 volumes of chloroform/methanol (2:1, v/v) and
measured gravimetrically according to the method of Folch
et al. (1957). According to Morrison and Smith (1964), the
lipids were converted into fatty acid methyl esters (FAMEs)
by saponification and methylation and then identified by
gas chromatography. The fatty acid methyl esters were analyzed
using a Hewlett–Packard 5890A gas–liquid chromatograph
(Palo Alto, CA, USA) equipped with diethylene
glycol succinate (DEGS) column (25 m length · 0.32 mm
width · 0.5 lM diameter) (Agilent Technologies, Palo Alto,
CA, USA) and flame ionization detector. Nitrogen was
used as the carrier gas and temperature programmings for
the oven was from 160 C for 10 min and then to 180 C
at 1.5 C/min which was then maintained for 5 min. Temperatures
for the injector and detector were 200 and
300 C, respectively. Individual FAMEs were identified by
comparison with known standards (GLC-68A, Nu-CheckPrep,
Elysian, MN, USA) and the results were expressed
in mg/g and the total percentages were calculated.
2.6. Amino acid analyses
For amino acid determination, the samples were prepared
using 6 N hydrochloric acid as described previously
(Velu & Munuswamy, 2003). The peptides with N-terminal
primary amines were derivatized using O-phthaldialdehyde
(OPA) reagent (Hewlett–Packard, Palo Alto, CA, USA)
(Lee & Drescher, 1978) and the resulting diastereomers
14

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. วิเคราะห์ชีวเคมีเมื่อสิ้นสุดการทดลอง (21 วัน), ปลา และมีชีวิตอยู่เนื้อหาสรุปได้เสียสละ และการชีวเคมีต่าง ๆวิเคราะห์เช่นโปรตีนรวม (Lowry, Rosebrough, Farrและ Randall, 1951), รวมฟรีน้ำตาล (โร 1955), โปรตีนผูกน้ำตาล (คาร์ Longley, & โร 1956) รวมไขมัน(Barnes & Blackstock, 1973 Folch น้อย & Stanley1957) และน้ำ (Passoneau และวิลเลียมส์ เนื้อหาเรื่อง1953)2.5 การวิเคราะห์กรดไขมันรวมโครงการที่สกัดจากตัวอย่าง โดย homogenizingในปริมาณ 5 ของคลอโรฟอร์ม/เมทานอล (2:1, v/v) และวัดตามวิธีของ Folch gravimetricallyal. ร้อยเอ็ด (1957) ตามมอร์ริสันและสมิธ (1964), การโครงการได้ถูกแปลงเป็นไขมันกรด methyl esters (FAMEs)สะพอนิฟิและปรับ และจากนั้น ระบุchromatography ก๊าซ มีวิเคราะห์กรดไขมัน methyl estersใช้ Hewlett – Packard 5890A ก๊าซของเหลว chromatograph(ดัลลัส CA, USA) พร้อม diethyleneglycol succinate (DEGS) คอลัมน์ (ฟิลด์ความยาว 25 เมตร 0.32 มม.·ความกว้าง เส้น lM 0.5) (Agilent เทคโนโลยี ดัลลัสCA, USA) และเครื่องตรวจจับการ ionization เปลวไฟ ไนโตรเจนได้ใช้เป็นผู้ขนส่งก๊าซและอุณหภูมิ programmings สำหรับเตาอบ 160 C สำหรับ 10 นาที แล้ว ถึง 180 C จากที่ 1.5 C/นาที ซึ่งถูกแล้วรักษาสำหรับ 5 นาทีอุณหภูมิสำหรับหัวฉีดและเครื่องตรวจจับ 200 และ300 C ตามลำดับ แต่ละ FAMEs ได้ระบุเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่ทราบ (GLC 68A, Nu-CheckPrepค้าได้ MN สหรัฐอเมริกา) และมีแสดงผลmg/g และเปอร์เซ็นต์รวมที่คำนวณ2.6 วิเคราะห์กรดอะมิโนได้เตรียมตัวอย่างสำหรับการกำหนดกรดอะมิโนใช้ 6 N กรดไฮโดรคลอริกตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(เวฬุ & Munuswamy, 2003) เปปไทด์กับเทอร์มินัล Namines หลักได้ derivatized ใช้ O-phthaldialdehydeรีเอเจนต์ (OPA) (Hewlett – Packard ดัลลัส CA, USA)(Lee และ Drescher, 1978) และ diastereomers ได้14

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ชีวเคมีวิเคราะห์ในตอนท้ายของการทดลอง (21 วัน) และปลาสดฟีดได้เสียสละและเป็นไปทางชีวเคมีต่างๆวิเคราะห์เช่นโปรตีนรวม(โลว์รีย์ Rosebrough, ฟาร์และแรนดัล, 1951), น้ำตาลรวม (ไข่, 1955) โปรตีนผูกพันน้ำตาล(แครอล Longley และไข่, 1956), ไขมันทั้งหมด(Barnes & Blackstock 1973; Folch น้อยและสแตนลี่ย์, 1957) และการกำหนดปริมาณน้ำ (Passoneau และวิลเลียมส์, 1953). 2.5 วิเคราะห์กรดไขมันไขมันทั้งหมดถูกสกัดจากตัวอย่างโดยการผสมยางใน5 เล่มของคลอโรฟอร์ม / เมทานอล (2: 1, v / v) และวัดgravimetrically ตามวิธีการของ Folch et al, (1957) ตามที่มอร์ริสันและสมิ ธ (1964) ซึ่งเป็นไขมันที่ถูกแปลงเป็นเอสเทอกรดไขมันโอเมธิล(FAMEs) โดยสะพอและ methylation และระบุแล้วโดยแก๊สchromatography กรดไขมันเมทิลเอสเตอร์ที่ได้มาวิเคราะห์โดยใช้ Hewlett-Packard 5890A chromatograph ก๊าซธรรมชาติเหลว (Palo Alto, CA, USA) พร้อมกับ diethylene succinate ไกลคอล (degs) คอลัมน์ (25 เมตรความยาว· 0.32 มิลลิเมตรความกว้าง· 0.5 เส้นผ่าศูนย์กลาง LM) (Agilent Technologies พาโลอัลโต, CA, USA) และเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์เปลวไฟ ไนโตรเจนที่ถูกนำมาใช้เป็นก๊าซและ programmings อุณหภูมิเตาอบที่มาจาก160 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีแล้วถึง 180 C ที่ 1.5 C / นาทีซึ่งถูกเก็บรักษาไว้แล้วเป็นเวลา 5 นาที อุณหภูมิสำหรับฉีดและตรวจจับได้ 200 และ 300 C ตามลำดับ FAMEs ส่วนบุคคลที่ถูกระบุโดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่รู้จักกัน(GLC-68A, Nu-CheckPrep, เซี่ยน, MN, USA) และผลที่ได้รับการแสดงในมก. / g และร้อยละรวมคำนวณ. 2.6 วิเคราะห์กรดอะมิโนสำหรับความมุ่งมั่นของกรดอะมิโนตัวอย่างที่ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้6 N กรดไฮโดรคลอตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(เวลูและ Munuswamy, 2003) เปปไทด์ที่มี N-ขั้วเอมีนหลักถูกderivatized ใช้ O-phthaldialdehyde (OPA) สาร (Hewlett-Packard, พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) (Lee & Drescher 1978) และผล diastereomers 14

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . ชีวเคมีวิเคราะห์
เมื่อสิ้นสุดการทดลอง ( 21 วัน ) ปลาและให้อาหารสด


ถูกฆ่าและถูกนำไปวิเคราะห์ทางชีวเคมีต่าง ๆเช่น โปรตีนรวม ( เบส rosebrough ฟาร์ , , ,
& Randall , 1951 ) , รวมฟรีน้ำตาล ( ไข่ปลา , 1955 ) , โปรตีน ( น้ำตาล ) ลองลี่
ผูก , &ไข่ปลา , 1956 ) ,
ไขมันรวม ( บาร์น& blackstock 1973 ; ฟอล์ช น้อย& Stanley ,
,1957 ) และการหาปริมาณน้ำ ( passoneau & Williams
1953 ) .
2.5 การวิเคราะห์กรดไขมัน
ไขมันทั้งหมดสกัดจากตัวอย่างที่ได้จากการเติม
5 เล่ม / เมทานอลคลอโรฟอร์ม ( 2 : 1 v / v )
วัด gravimetrically ตามวิธีการของฟอล์ช
et al . ( 1957 ) ตาม มอร์ริสันและ Smith ( 1964 ) ,
ไขมันถูกเปลี่ยนเป็นกรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( FAMEs )
และจากนั้นโดยการออกซิเดชันทางเคมีจากระบุ
แก๊สโครมาโทกราฟี กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ 5890a Hewlett - Packard
-
( ของเหลวก๊าซโครมาโตกราฟที่พาโล อัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) พร้อมกับีนไกลคอลซิ (
degs ) คอลัมน์ ( 25 M ความยาวด้วย 0.32 มม. ความกว้างเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.5
ด้วย LM ) ( Agilent Technologies , Palo Alto ,
CA , USA ) และ เครื่องตรวจจับไอออนไนซ์เปลวไฟ
ไนโตรเจนคือใช้เป็นอุณหภูมิก๊าซและผู้ให้บริการ programmings สำหรับ
เตาอบจาก 160 C 10 นาทีจากนั้น 180 C
1.5 องศาเซลเซียส / นาทีซึ่งก็ยังคงเป็นเวลา 5 นาที อุณหภูมิที่หัวฉีดและเครื่องตรวจจับได้

C 200 และ 300 ตามลำดับ สารแต่ละตัวระบุ โดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่รู้จักกัน (

checkprep glc-68a nu , รอบๆ , MN , USA ) และผลลัพธ์ที่ได้แสดง
ในมก. / ก. และเปอร์เซ็นต์ทั้งหมดถูกคำนวณ
2.6 การวิเคราะห์กรดอะมิโนกรดอะมิโน
สำหรับการคำนวณจำนวนเตรียม
6 N ใช้กรดเกลือตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( velu & munuswamy , 2003 ) และ เปปไทด์ กรดอะมิโนกับเอมีนปฐมภูมิ คือการ o-phthaldialdehyde derivatized

( OPA ) Reagent ( Hewlett - Packard , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา )
( & Drescher ลี ,2521 ) และผล diastereomers

14