The positive amastigotes of VL iden

The positive amastigotes of VL identified on bone marrow smears from the case patient were sent to the Department of Parasitology, Phramongkutklao College of Medicine for species identification. DNA was extracted from the stained smears of bone marrow using modified FTA filter paper (Whatman, Bioscience, USA). Specific PCR primers as described by Uliana et al. (1994) and le Fichoux et al. (1999) were used to amplify the ITS1 regions of ssrRNA and kDNA genes, respectively. To confirm species identification, PCR-RFLP of the ITS1 region was performed using HaeIII endonuclease whilst PCR-RFLP of the mini-exon gene was performed using EaeI endonuclease (Marfurt et al., 2003b and Schönian et al., 2003). DNA extracted from an L. donovani reference strain (Biomedical Research, The Netherlands) was used as the positive control in all experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Amastigotes บวกของ VL ที่ระบุบน smears ไขกระดูกจากผู้ป่วยกรณีถูกส่งไปแผนกปรสิตวิทยา เกล้าวิทยาลัยการแพทย์สำหรับการระบุชนิด ดีเอ็นเอที่สกัดจาก smears ทิ้งคราบของไขกระดูกที่ใช้ปรับเปลี่ยนเขตการค้าเสรีกระดาษกรอง (Whatman วิทยาศาสตร์ชีวภาพ สหรัฐอเมริกา) ไพรเมอร์เฉพาะ PCR ตามที่อธิบายไว้ โดย Uliana et al. (1994) และเลอ Fichoux et al. (1999) มีการขยายพื้นที่ ITS1 ของยีน ssrRNA และ kDNA ตามลำดับ ยืนยันรหัสพันธุ์ PCR-RFLP ของภูมิภาค ITS1 ถูกดำเนินโดยใช้ HaeIII endonuclease ขณะทำ PCR-RFLP ของยีน exon มินิใช้ endonuclease EaeI (Marfurt et al., 2003b และ Schönian และ al., 2003) มีใช้ดีเอ็นเอที่สกัดจากใบ L. donovani อ้างอิงต้องใช้ (การวิจัยทางชีวการแพทย์ ประเทศเนเธอร์แลนด์) เป็นตัวควบคุมค่าบวกในการทดลองทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

amastigotes บวกของ VL ระบุบนรอยเปื้อนไขกระดูกจากผู้ป่วยกรณีที่ถูกส่งไปยังภาควิชาปรสิตวิทยาวิทยาลัยแพทยศาสตร์พระมงกุฎเกล้าสำหรับการระบุสายพันธุ์ ดีเอ็นเอที่สกัดจากรอยเปื้อนของไขกระดูกใช้กระดาษแก้ไข FTA กรอง (Whatman, Bioscience, ประเทศสหรัฐอเมริกา) ไพร PCR โดยเฉพาะตามที่อธิบายไว้โดย Uliana และคณะ (1994) และ le Fichoux และคณะ (1999) ถูกนำมาใช้เพื่อขยายภูมิภาค ITS1 ของ ssrRNA และยีน KDNA ตามลำดับ เพื่อยืนยันการระบุชนิด PCR-RFLP ของภูมิภาค ITS1 ได้รับการดำเนินการโดยใช้ endonuclease HaeIII ขณะ PCR-RFLP ของยีนมินิเอกซ์ซอนได้รับการดำเนินการโดยใช้ EaeI endonuclease (Marfurt et al., 2003b และSchönian et al., 2003) ดีเอ็นเอที่สกัดจากสายพันธุ์อ้างอิง L. donovani (การวิจัยทางการแพทย์, เนเธอร์แลนด์) ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกในทุกการทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ amastigotes บวกของ VL ระบุในไขกระดูก รอยเปื้อนจากกรณีผู้ป่วยถูกส่งไปยังภาควิชาปรสิตวิทยา วิทยาลัยแพทยศาสตร์พระมงกุฎเกล้า เพื่อจำแนกชนิดได้ ดีเอ็นเอจากคราบเปื้อนของกระดูกที่ใช้ดัดแปลง FTA กรองกระดาษ ( whatman Bioscience , USA ) ไพรเมอร์โดยเฉพาะตามที่อธิบายไว้โดย uliana et al . ( 1994 ) และ เลอ fichoux et al .( 1999 ) ถูกใช้เพื่อขยายขอบเขตของ ssrrna kdna its1 และยีน ตามลำดับ เพื่อยืนยันการระบุชนิดของ its1 ว่าเขตการใช้ haeiii เอนโดนิวคลีเอสในขณะที่ว่าของมินิชนิดยีนโดยใช้ eaei เอนโดนิวคลีเอส ( marfurt et al . , และ 2003b Sch öเนียน et al . , 2003 ) ดีเอ็นเอที่สกัดได้จากสายพันธุ์ . donovani อ้างอิง ( การวิจัยชีวเวชเนเธอร์แลนด์ ) ที่ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกตลอดการทดลอง