A concentrated 70% aqueous acetone

A concentrated 70% aqueous acetone homogenate of the
dried leaves of Q. coccifera was extracted successively with
Et2O, EtOAc, and n-BuOH to give respective extracts and
a water-soluble portion. The EtOAc extract was subjected
to a combination of column chromatography over Toyopearl
HW-40, MCI GEL CHP-20P, and/or YMC-gel ODS-AQ 120-
50S to afford a new ellagitannin dimer named cocciferin
D1 (1) and nine known tannins and related polyphenols,
(+)-catechin, ellagic acid, valoneic acid dilactone, pedunculagin,6
casuarictin,6 tellimagrandin II,7 kaempferol 3-O-
(6′′-O-galloyl)-â-D-glucopyranoside,8 and phillyraeoidins A
and E.9 The n-BuOH extract was similarly chromatographed
to give a new ellagitannin trimer, cocciferin T1 (4),
along with acutissimin B10,11 and phillyraeoidins B and C.9
A new dimeric ellagitannin, cocciferin D2 (2), and three
known C-glucosidic ellagitannins, acutissimin B, castalagin,12,13
and vescalagin,13,14 were isolated from the watersoluble
portion by a similar separation procedure.
The concentrated aqueous acetone homogenate from the
leaves of Q. suber was treated in a way similar to Q.
coccifera to yield two new tannins, cocciferins D3 (3) and
T2 (5), along with cocciferin D2 (2) and 13 known tannins
and related polyphenols. The known compounds were identified
as (+)-gallocatechin, quercetin, quercitrin, pedunculagin,
acutissimin B, castalagin, vascalagin, tellimagrandin
I,7 castavaloninic acid,15 isocastavaloninic acid,16 mongolicain
A,17 and desgalloylstachyurin.18
Cocciferin D1 (1) was found to be a dimeric hydrolyzable
tannin with the molecular formula C75H56O48, as indicated
by ESIMS [m/z 1742 (M + NH4)+] and NMR analyses. The 1H NMR spectrum of 1 was complicated owing to the
formation of a mixture of R- and â-anomers (4:1), and each
signal appeared essentially in duplicate. The presence of
six galloyl groups and one valoneoyl group was indicated
by paired aromatic signals due to six 2H singlets and three
1H singlets. These acyl components were chemically identified
by production of methyl tri-O-methylgallate (9) and
trimethyl octa-O-methylvaloneate (10) upon methylation
of 1 with dimethyl sulfate and potassium carbonate in
acetone and subsequent methanolysis. Assignment of the
sugar proton signals by 1H-1H COSY revealed the presence
of two sets of C1 glucopyranose cores (Table 1). The signals
of C-6 methylene protons on the fully acylated glucose core
(glucose I) showed a large difference (∆δ 1.52 ppm; δ 5.27
and 3.75) in their chemical shifts, indicating the presence
of a valoneoyl group bridged on O-4/O-6.7,19 It was thus
implied that the monomeric constituent units of cocciferin
D1 are 2,3,4,6-tetra-O-galloyl-D-glucose (12)20 and tellimagrandin
II (13). This was supported by close resemblance
of the sugar carbon resonances in the 13C NMR spectrum
of 1 (Table 1) to those of the proposed monomeric units.13
On the basis of these data, cocciferin D1 was deduced to be
an ellagitannin dimer, which might be produced biogenetically
by intermolecular C-O oxidative coupling between a
hexahydroxydiphenoyl (HHDP) group of 12 and a galloyl
group of 13 forming a valoneoyl group. The location of the
valoneoyl group in 1 was determined by the HMBC
spectrum as follows. The H-6 signal (δ 5.27, 3.75) on glucose
I was correlated through three-bond coupling with an ester
carbonyl carbon resonance (δ 167.8), which, in turn, showed
a correlation with the aromatic proton at δ 6.17. This
aromatic proton was assigned to H-3′ of the valoneoyl group
on the basis of its correlation through two-bond coupling
with the signal attributed to the ethereal carbon resonance
C-4′ (δ 146.7)19 of the valoneoyl group. The remaining
valoneoyl protons (H-3 and H-6′′) as well as the other acyl
protons were similarly correlated through respective carbonyl
carbons with glucose protons as illustrated in the
formula (Figure 1). This structural assignment was chemically
supported by partial hydrolysis yielding 2,3,6-tri-Ogalloyl-D-glucose
(14) and rugosin A (15).21 The atropisomerism
of the chiral valoneoyl group was determined to be
S-series by a large positive Cotton effect at 226 nm ([θ]
+1.2 × 105) in the circular dichroism (CD) spectrum22 andby the production of 15 as a partial hydrolysate of 1. On
the basis of these findings, the structure of cocciferin D1
was established as 1, which corresponds to a degalloyl
derivative of phillyraeoidin A (6).
Phillyraeoidins A (6), B (7), and C (8) were first isolated
from Quercus phillyraeoides.
9 However, the binding sites
of the valoneoyl group in the reported structures remained
unassigned. The HMBC experiments of these dimers gave
three-bond correlations of the valoneoyl protons-carbonyl
carbons-glucose protons similar to those in 1. The orientations
of the valoneoyl group in phillyraeoidins A, B, and C
were thus established as shown in the formulas 6, 7, and
8, respectively.
Cocciferins D2 (2) and D3 (3) were isolated as light brown
amorphous powders, and their molecular formulas (2,
C82H52O52; 3, C68H46O44) were deduced by ESIMS and NMR
analyses. The 1H NMR spectra of 2 and 3 exhibited the
sugar proton signals characteristic of an open-chain glucose
and a glucopyranose with the C1 conformation, respectively
(Table 1). Upon methylation with dimethyl sulfate and
potassium carbonate followed by methanolysis, 2 and 3
gave common products, trimethyl octa-O-methylvaloneate
(10) and dimethyl hexamethoxydiphenate (11). The 1H
NMR spectrum of 2 showed eight 1H singlets in the
aromatic region. The signals due to sugar moieties in the
1H and 13C NMR spectra (Table 1) of 2 suggested that 2 is
a dimer composed of monomeric units, casuarictin (16) and
castalagin (17). The location of the valoneoyl group in 2
was determined from the HMBC spectrum measured in
methanol-d4 at 45 °C, which showed three-bond correlations
δH 6.447 (valoneoyl HH-3)-δC 167.8 (carbonyl)-δH
5.09 (glucose H-4′); δH 7.28 (valoneoyl HA-6)-δC 165.7
(carbonyl)-δH 6.12 (glucose H-1); δH 6.60 (valoneoyl HJ-
3)-δC 170.9 (carbonyl)-δH 3.99 (glucose H-6′). The location
of the other acyl groups was also indicated by HMBC
correlations as shown in the formula 2 (Figure 1). Partial
hydrolysis of 2 in hot water gave pedunculagin (18) as a
hydrolysate.The 1H NMR spectrum of 3 was similar to that of 2,
except for the absence of signals due to a second HHDP
group. Among the signals of the C1 glucopyranose core of
3, the H-2 and H-3 resonances [δ 3.49 (dd, J ) 8, 9 Hz)
and δ 3.71 (br t, J ) 9 Hz)], assigned via 1H-1H COSY,
appeared in the high-field region, indicating the absence
of acylation at C-2 and C-3 (Table 1). This was substantiated
by partial hydrolysis of 3, which yielded 4, 6-(S)-
HHDP-D-glucose (26). Six aromatic signals (each 1H, s) in
the 1H NMR spectrum of 3 were consistent with the
presence of a valoneoyl, an HHDP, and a flavogallonyl unit
as the acyl groups in the molecule. In addition, the ESIMS
spectrum of 3 exhibited an ion peak at m/z 1584 (M +
NH4)+, which is 302 mass units, corresponding to an HHDP
group (C14H6O8) lower than that of 2 [m/z 1886 (M +
NH4)+]. The monomeric constituents of 3 were thus assumed
to be castalagin (17) and strictinin (19).6,13 This was
supported by close similarity of the sugar resonances of 3
to those of 17 and 19 in the 13C NMR spectra (Table 1).
The binding modes of the acyl groups in 3 were evidenced
from the HMBC correlations in a manner similar to 2
(Figure 1). The S-configuration of the valoneoyl and HHDP
groups in 2 and 3 was confirmed by a large positive Cotton
effect around at 235 nm in the CD spectra.22 On the basis
of these data, the structures of cocciferin D2 and D3 were
established as formulas 2 and 3.
The trimeric nature of cocciferins T1 (4) and T2 (5) was
shown by their ESIMS [4, m/z 2676 (M + NH4)+; 5, m/z
2670 (M + NH4)+] and retention times which were larger
than those of other dimeric hydrolyzable tannins on
normal-phase HPLC.23 Methylation of 4 and 5 and subsequent
methanolysis gave commonly 9, 10, and 11, indicating
the presence of galloyl, HHDP, and valoneoyl groups
in both tannins. In the 1H and 13C NMR spectra of 4, the
resonances in the aliphatic region were similar to those of
pedunculagin (18) and phillyraeoidin A (6), both of which
co-occur in Q. coccifera (Table 1). The 1H NMR spectrum
of 4 displayed six 2H singlets and eight 1H singlets in the
aromatic region, the latter of which appeared as duplicate
signals (see Experimental Section), suggesting the presence
of six galloyl groups, an HHDP group, and two valoneoyl
groups in the molecule. On the basis of these data,
cocciferin T1 was presumed to be a trimeric hydrolyzable
tannin composed of phillyraeoidin A (6) and pedunculagin
(18). The linkage mode of each acyl unit in 4 was established
by partial degradation of 4 in hot water, which
afforded phillyraeoidin B (7), praecoxins A (20) and D
(21),24 and 2,3-(S)-HHDP-D-glucose (22)25 as the partial
hydrolysates (Figure 2). The S-configuration at the chiral
HHDP and valoneoyl groups in 4 was evident from the
production of the above partial hydrolysates and also by
the strong positive Cotton effect at 225 and 239 nm in the
CD spectrum of 4. Consequently, the structure of cocciferin
T1 was elucidated as 3, which is the first trimeric hydrolyzable
tannin found in Quercus species.
On the basis of the assignments of the 1H NMR signals
using the 1H-1H COSY spectrum of 5, cocciferin T2 was
deduced to be a trimeric hydrolyzable tannin composed of an open-chain glucose and two C1 glucopyranose cores
(Table 1). The 1H NMR spectrum of 5 showed a duplication
of some sugar signals owing to an anomer mixture (R:â )
1:4), suggesting that one of two C1 glucopyranose cores has
a free hydroxyl group at the anomeric center. The spectrum
also displayed a 2H singlet ascribable to a galloyl group
and 11 1H singlets due to one flavogallonyl, two HHDP,
and two valoneoyl groups in the aromatic region. The
resonances due to the sugar moieties in the 1H and 13

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

A เข้มข้น 70% อะซิโตนอควี homogenate ของการใบไม้ของ coccifera ถามถูกสกัดติด ๆ กันด้วยEt2O, EtOAc และ n BuOH ให้ตามลำดับสารสกัด และส่วนที่ละลายในการ สารสกัด EtOAc ถูกต้องชุดของคอลัมน์ chromatography ผ่าน ToyopearlHW-40, MCI เจ CHP - 20P และ/หรือ เจล YMC ODS AQ 120 -50S จะสามารถผลิตของ dimer การ ellagitannin ใหม่ชื่อ cocciferinง 1 (1) และ 9 รู้จัก tannins และโพลีฟีนเกี่ยวข้อง(+) -สารสกัดจาก กรด ellagic, valoneic กรด dilactone, pedunculagin, 6casuarictin, 6 tellimagrandin II, 7 kaempferol 3-O -(6′′-O-galloyl)-â-D-glucopyranoside,8 และ phillyraeoidins Aและ E.9 สกัด n BuOH ถูก chromatographed ในทำนองเดียวกันให้การใหม่ ellagitannin trimer, cocciferin T1 (4),พร้อม acutissimin B10, 11 และ phillyraeoidins B และ C.9Ellagitannin ใหม่ dimeric, cocciferin D2 (2), และ 3เรียกว่า C glucosidic ellagitannins, acutissimin B, castalagin, 12, 13และ vescalagin, 13, 14 ถูกแยกต่างหากจาก watersolubleส่วน ด้วยกระบวนการแยกที่คล้ายกันHomogenate อะซีโตนสเอาท์ที่เข้มข้นจากการใบไม้ suber คำถามถูกรับในลักษณะคล้ายกับ Qcoccifera ให้ใหม่สอง tannins, cocciferins ดี 3 (3) และT2 (5), พร้อมกับ cocciferin D2 (2) และรู้จัก tannins 13และโพลีฟีนที่เกี่ยวข้อง ระบุสารชื่อดังเป็น (+) -gallocatechin, quercetin, quercitrin, pedunculaginacutissimin B, castalagin, vascalagin, tellimagrandinฉัน 7 castavaloninic กรด กรด isocastavaloninic 15, 16 mongolicainA, 17 และ desgalloylstachyurin.18ง 1 Cocciferin (1) พบมี การ dimeric hydrolyzableแทนนิน มีสูตรโมเลกุล C75H56O48 ตามที่ระบุโดย ESIMS [m/z 1742 (M + NH4) +] และ NMR วิเคราะห์ สเปกตรัม NMR 1H 1 ที่ซับซ้อนเนื่องจากการก่อตัวของส่วนผสมของ R - และâ-anomers (4:1), และแต่ละสัญญาณปรากฏเป็นสำเนา สถานะของกลุ่ม galloyl หกและ valoneoyl หนึ่งกลุ่มที่ระบุโดยจับคู่สัญญาณหอมเนื่องจาก singlets 2 H 6 และ 31H singlets สารเคมีระบุคอมโพเนนต์เหล่านี้ acylโดยผลิต methyl tri-O-methylgallate (9) และtrimethyl octa-O-methylvaloneate (10) เมื่อปรับ1 dimethyl ซัลเฟตและโพแทสเซียมคาร์บอเนตในอะซีโตนและ methanolysis ต่อมา กำหนดการเปิดเผยสัญญาณโปรตอนน้ำตาล โดยโคซี่ 1H - 1Hสองชุดของแกน glucopyranose C1 (ตาราง 1) สัญญาณของโปรตอนเมทิลีนได C 6 บนเต็ม acylated น้ำตาลในหลัก(กลูโคสฉัน) แสดงให้เห็นความแตกต่างขนาดใหญ่ (∆δ 1.52 ppm δ 5.27และ 3.75) ในกะนักเคมี แสดงสถานะกลุ่ม valoneoyl ระหว่างกาลบน O-4/O-6.7,19 ก็ดังโดยนัยที่หน่วยแฟ้ม ๆ monomeric cocciferinง 1 เป็น 2,3,4,6-tetra-O-galloyl-D-glucose (12) 20 และ tellimagrandinII (13) นี้ได้รับการสนับสนุน โดยรูปปิดของ resonances คาร์บอนของน้ำตาลในสเปกตรัม NMR 13C1 (ตาราง 1) กับ units.13 monomeric เสนอโดยข้อมูลเหล่านี้ cocciferin ง 1 มี deduced จะเป็น ellagitannin ผลิตของ dimer ซึ่งอาจผลิต biogeneticallyโดย intermolecular C-O oxidative coupling ระหว่างการกลุ่ม 12 และเป็น galloyl hexahydroxydiphenoyl (HHDP)กลุ่มเป็นกลุ่ม valoneoyl 13 สถานที่valoneoyl กลุ่ม 1 ถูกกำหนด โดย HMBCสเปกตรัมเป็นดังนี้ สัญญาณ H-6 (δ 5.27, 3.75) ในกลูโคสฉันถูก correlated ผ่านคลัปสามพันธะกับเอสcarbonyl คาร์บอนการสั่นพ้อง (δ 167.8), ซึ่ง จะ แสดงให้เห็นความสัมพันธ์กับโปรตอนหอมที่δ 6.17 นี้หอมโปรตอนถูกกำหนดให้กับ H-3′ กลุ่ม valoneoylโดยใช้ความสัมพันธ์ผ่านสองพันธะคลัปมีสัญญาณที่เกิดจากการสั่นพ้องคาร์บอนอากาศธาตุC-4′ (δ 146.7) 19 ของกลุ่ม valoneoyl เหลือvaloneoyl โปรตอน (H-3 และ H 6′′) ตลอดจน acyl อื่น ๆโปรตอนถูกทำนอง correlated ผ่าน carbonyl ตามลำดับcarbons กับโปรตอนกลูโคสดังที่แสดงในแบบสูตร (1 รูป) กำหนดโครงสร้างนี้ถูกสารเคมีโดยไฮโตรไลซ์บางส่วนผลผลิต 2,3,6-ตรี-Ogalloyl-D-กลูโคส(14) และ rugosin A (15) .21 atropisomerismของ valoneoyl สารเคมี chiral อนุ กลุ่มได้กำหนดให้S-ชุด โดยฝ้ายเป็นบวกขนาดใหญ่ผลกระทบที่ 226 nm ([θ]+1.2 × 105) ใน andby spectrum22 dichroism กลม (CD) เป็นการผลิต 15 เป็นด้วยบางส่วน 1 บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้ โครงสร้างของ cocciferin ง 1ก่อตั้งขึ้นเป็น 1 ซึ่งสอดคล้องกับ degalloylอนุพันธ์ของ phillyraeoidin A (6)A Phillyraeoidins (6), B (7), และ C (8) ได้ก่อนแยกจาก Quercus phillyraeoides9 อย่างไรก็ตาม เว็บไซต์รวมของ valoneoyl ที่ อยู่ในโครงสร้างรายงานไม่ ทดลอง HMBC ของ dimers เหล่านี้ให้พันธะสามสัมพันธ์ของ valoneoyl โปรตอน-carbonylคล้ายกับใน 1 โปรตอน carbons กลูโคส แนวที่ของกลุ่ม valoneoyl ใน phillyraeoidins A, B และ Cได้ก่อตั้งดังแสดงในสูตร 6, 7 และ8 ตามลำดับCocciferins D2 (2) และดี 3 (3) ถูกแยกเป็นสีน้ำตาลอ่อนผงไป และสูตรโมเลกุลของพวกเขา (2C82H52O52 3, C68H46O44) มี deduced ESIMS และ NMRวิเคราะห์ แรมสเป็คตรา NMR 1H 2 และ 3 จัดแสดงลักษณะของกลูโคสเป็นโซ่เปิดสัญญาณโปรตอนน้ำตาลglucopyranose มี C1 conformation และตามลำดับ(ตาราง 1) เมื่อปรับด้วย dimethyl ซัลเฟต และโพแทสเซียมคาร์บอเนตตาม methanolysis, 2 และ 3ให้ผลิตภัณฑ์ทั่วไป trimethyl octa-O-methylvaloneate(10) และ dimethyl hexamethoxydiphenate (11) 1H8 singlets 1H ในแสดงสเปกตรัม NMR 2ภูมิภาคที่หอม สัญญาณจาก moieties น้ำตาลในการแนะนำ 1H และ 13C NMR แรมสเป็คตรา (ตารางที่ 1) 2 2 ว่าการผลิตของ dimer ประกอบด้วยหน่วย monomeric, casuarictin (16) และcastalagin (17) ที่ตั้งของกลุ่ม valoneoyl ใน 2กำหนดจากสเปกตรัม HMBC วัดในเมทานอล-d4 ที่ 45 ° C ซึ่งแสดงให้เห็นความสัมพันธ์สามพันธะΔH 6.447 (valoneoyl ชช-3) δH - δC 167.8 (carbonyl) -5.09 (กลูโคส H 4′); ΔH 7.28 (valoneoyl ฮา-6) -δC 165.7(carbonyl) -6.12 (กลูโคส H-1); δH ΔH (valoneoyl HJ - 6.603.99 (กลูโคส H 6′) δH - δC 170.9 (carbonyl) - 3) ตำแหน่งที่ตั้งกลุ่ม acyl อื่น ๆ ยังเปิดเผย โดย HMBCความสัมพันธ์ดังแสดงในสูตร 2 (1 รูป) บางส่วนไฮโตรไลซ์ 2 ในน้ำร้อนให้ pedunculagin (18) เป็นการด้วยการ สเปกตรัม NMR 1H 3 ได้ 2ยกเว้นของสัญญาณเนื่องจาก HHDP ที่สองกลุ่ม ระหว่างสัญญาณของหลัก glucopyranose C1 ของ3, H 2 และ resonances H 3 [δ 3.49 (dd, J) 8, 9 Hz)และδ 3.71 (br t, J) 9 Hz)], กำหนดผ่านโคซี่ 1 H - 1 Hปรากฏในภูมิภาคสูงฟิลด์ ระบุการขาดงานของอย่างไร acylation C 2 และ C-3 (ตารางที่ 1) นี้ถูก substantiatedโดยไฮโตรไลซ์บางส่วนของ 3 ซึ่งผล 4, 6-(S)-HHDP-D-กลูโคส (26) 6 หอมสัญญาณ (แต่ละ 1H, s) ในสเปกตรัม NMR 1H 3 ได้สอดคล้องกับการของ valoneoyl การ การ HHDP และ flavogallonyl หน่วยเป็นกลุ่ม acyl ในโมเลกุล นอกจากนี้ ESIMSสูงสุดที่ m z 1584 ไอออนจัดแสดงสเปกตรัมของ 3 (M +NH4) +, ซึ่งเป็นหน่วยมวล 302 ที่สอดคล้องกับการ HHDPกลุ่ม (C14H6O8) ที่ต่ำกว่า 2 [m z 1886 (M +NH4) +] จึงได้สันนิษฐาน constituents monomeric 3castalagin (17) และ.6,13 strictinin (19) นี้ได้โดยเฉพาะปิด resonances น้ำตาล 3ที่ 17 และ 19 ใน 13C NMR แรมสเป็คตรา (ตาราง 1)วิธีรวมกลุ่ม acyl ใน 3 เป็นหลักฐานจากความสัมพันธ์ใน HMBC ในลักษณะคล้ายกับ 2(รูป 1) S-กำหนดค่าของ valoneoyl และ HHDPกลุ่มที่ 2 และ 3 ได้รับการยืนยัน โดยฝ้ายเป็นบวกขนาดใหญ่ผลกระทบรอบที่ 235 nm ใน spectra.22 ซีดีบนพื้นฐานข้อมูลเหล่านี้ โครงสร้าง cocciferin D2 และดี 3 มีก่อตั้งขึ้นเป็นสูตร 2 และ 3ธรรมชาติ trimeric ของ cocciferins T1 (4) และ T2 (5) มีแสดง โดย ESIMS ของพวกเขา [m 4, z 2676 (M + NH4) +; 5, m/z2670 (M + NH4) +] และเวลาเก็บข้อมูลที่มีขนาดใหญ่กว่าของ tannins hydrolyzable อื่น ๆ dimeric บนปรับ HPLC.23 ปกติระยะที่ 4 และ 5 และต่อมาmethanolysis ให้ทั่วไป 9, 10 และ 11 แสดงสถานะของกลุ่ม galloyl, HHDP และ valoneoylใน tannins ทั้งนั้น ใน 13C และ 1H NMR แรมสเป็คตรา 4 การresonances ในภูมิภาค aliphatic ได้ใกล้เคียงกับpedunculagin (18) และ phillyraeoidin A (6), ซึ่งทั้งสองร่วมเกิดขึ้นในคำถาม coccifera (ตารางที่ 1) สเปกตรัม NMR 1H4 แสดง singlets 2H 6 และ 8 singlets 1H ในการภูมิภาคหอม หลังที่ปรากฏซ้ำกันเป็นสัญญาณ (ดูส่วนที่ทดลอง), แนะนำการ6 กลุ่ม galloyl กลุ่มแบบ HHDP และ valoneoyl สองกลุ่มในโมเลกุล โดยข้อมูลเหล่านี้cocciferin T1 คือ presumed จะ เป็น trimeric hydrolyzableแทนนินประกอบด้วย phillyraeoidin (6) และ pedunculagin(18) ก่อตั้งโหมดความเชื่อมโยงของแต่ละหน่วย acyl ใน 4โดยการลดบางส่วนของ 4 ในเครื่องทำน้ำอุ่น ที่นี่ phillyraeoidin B (7), praecoxins (20) และ D(21), 24 และ 2,3- (S) - HHDP - D-กลูโคส (22) 25 เป็นบางส่วนhydrolysates (2 รูป) S-กำหนดค่าในการสารเคมี chiral อนุกลุ่ม 4 HHDP และ valoneoyl เห็นได้ชัดจากการผลิต hydrolysates บางส่วนข้างต้น และนอกจากนี้ด้วยผลฝ้ายบวกแรงที่ 239 และ 225 nm ในการคลื่นซีดี 4 ดังนั้น โครงสร้างของ cocciferinT1 คือ elucidated เป็น 3 ซึ่งเป็นครั้งแรก trimeric hydrolyzableแทนนินพบในชนิด Quercusโดยการกำหนดสัญญาณ 1 H NMRใช้สเปกตรัมกว้าง 1H - 1H 5, cocciferin T2 ได้deduced เป็น แทนนิน hydrolyzable trimeric ประกอบด้วยกลูโคสเป็นโซ่เปิดและสองแกน glucopyranose C1(ตาราง 1) สเปกตรัม NMR 1H 5 แสดงให้เห็นว่าซ้ำซ้อนสัญญาณบางน้ำตาลเพราะส่วนผสม anomer (R:â)1:4), แนะนำที่หนึ่งของแกน glucopyranose C1 สองได้กลุ่มไฮดรอกซิลฟรีที่ศูนย์ anomeric สเปกตรัมนอกจากนี้ยัง แสดงเสื้อกล้าม 2H ascribable กลุ่ม galloylและ singlets 11 1 H เนื่องจากหนึ่ง flavogallonyl, HHDP 2และ 2 กลุ่ม valoneoyl ในภูมิภาคหอม ที่resonances เนื่องจาก moieties น้ำตาลใน 1 H และ 13

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เข้มข้น homogenate อะซีโตน 70%
ของน้ำใบแห้งของcoccifera Q. ถูกสกัดอย่างต่อเนื่องกับ
Et2O, EtOAc และ n-BuOH
เพื่อให้สารสกัดที่เกี่ยวข้องและส่วนที่ละลายน้ำได้ สารสกัด EtOAc
ได้ภายใต้การรวมกันของคอลัมน์มากกว่าToyopearl
HW-40, MCI GEL CHP-20P และ / หรือ ODS-AQ YMC เจล 120
50S ที่จะจ่าย dimer ellagitannin ใหม่ชื่อ cocciferin
D1 (1) และเก้ารู้จัก แทนนินและโพลีฟีนที่เกี่ยวข้องกับ
(+) - catechin กรด ellagic, dilactone กรด valoneic, pedunculagin, 6
casuarictin, 6 tellimagrandin ครั้งที่สอง 7 เฟอรอล 3 O-
(6 '' - O-galloyl) -A-D-glucopyranoside, 8 และ phillyraeoidins
และ E.9 N-BuOH สารสกัด chromatographed
ในทำนองเดียวกันจะให้trimer ellagitannin ใหม่ cocciferin T1 (4)
พร้อมกับ B10,11 acutissimin และ phillyraeoidins บีและ C.9
ellagitannin dimeric ใหม่ cocciferin D2 (2 )
และสามที่รู้จักกันellagitannins C-glucosidic, B acutissimin, castalagin, 12,13
และ vescalagin, 13,14 ถูกแยกจาก watersoluble
ส่วนโดยขั้นตอนการแยกที่คล้ายกัน.
homogenate
อะซิโตนมีความเข้มข้นน้ำจากใบของคิวsuber ได้รับการรักษา ในทำนองเดียวกันกับคิว
coccifera ให้ผลผลิตสองแทนนินใหม่ cocciferins D3 (3) และ
T2 (5) พร้อมกับ cocciferin D2 (2) และ 13
แทนนินที่รู้จักกันและโพลีฟีนที่เกี่ยวข้อง สารประกอบที่รู้จักกันถูกระบุเป็น (+) - gallocatechin, quercetin, quercitrin, pedunculagin, B acutissimin, castalagin, vascalagin, tellimagrandin ผม 7 กรด castavaloninic 15 กรด isocastavaloninic 16 mongolicain A, 17 และ desgalloylstachyurin.18 Cocciferin D1 (1) ก็พบว่าเป็น hydrolyzable dimeric แทนนินที่มีสูตรโมเลกุล C75H56O48 ตามที่ระบุโดยESIMS [ม / z 1742 (M + NH4) +] และ NMR วิเคราะห์ สเปกตรัม 1H NMR 1 ซับซ้อนเนื่องจากการก่อตัวของส่วนผสมของR- และ A-anomers (4: 1) และแต่ละสัญญาณปรากฏในหลักที่ซ้ำกัน การปรากฏตัวของกลุ่มหก galloyl และกลุ่ม valoneoyl ใครได้ชี้ให้เห็นโดยการจับคู่สัญญาณหอมเนื่องจากถึงหกsinglets 2H สาม1H singlets ส่วนประกอบ acyl เหล่านี้ถูกระบุว่าสารเคมีโดยการผลิตเมธิลไตร-O-methylgallate (9) และtrimethyl octa-O-methylvaloneate (10) เมื่อ methylation 1 กับ dimethyl ซัลเฟตและโพแทสเซียมคาร์บอเนตในอะซีโตนและต่อมาmethanolysis การกำหนดของสัญญาณโปรตอนน้ำตาลโคซี่ 1H-1H เปิดเผยการปรากฏตัวของสองชุดของแกนC1 glucopyranose (ตารางที่ 1) สัญญาณC-6 โปรตอนเมทิลีนในแกนกลูโคส acylated อย่างเต็มที่(กลูโคส I) ที่แสดงให้เห็นความแตกต่างขนาดใหญ่ (1.52 ppm Δδ; δ 5.27 และ 3.75) ในการเปลี่ยนแปลงทางเคมีของพวกเขาแสดงให้เห็นการปรากฏตัวของกลุ่มvaloneoyl สะพานใน O-4 /O-6.7,19 ​​มันถูกจึงส่อให้เห็นว่าหน่วยงานที่เป็นส่วนประกอบของmonomeric cocciferin D1 มี 2,3,4,6-Tetra-O-galloyl-D-กลูโคส (12) 20 และ tellimagrandin ครั้งที่สอง (13) นี้ได้รับการสนับสนุนโดยคล้ายคลึงใกล้เคียงของ resonances คาร์บอนน้ำตาลในสเปกตรัม 13C NMR 1 (ตารางที่ 1) กับของ units.13 monomeric เสนอบนพื้นฐานของข้อมูลเหล่านี้cocciferin D1 ได้รับการอนุมานที่จะเป็นdimer ellagitannin ซึ่งอาจ มีการผลิต biogenetically โดยการมีเพศสัมพันธ์ระหว่างโมเลกุลออกซิเดชัน CO ระหว่างhexahydroxydiphenoyl (HHDP) กลุ่ม 12 และ galloyl กลุ่ม 13 จัดตั้งกลุ่ม valoneoyl สถานที่ตั้งของกลุ่ม valoneoyl 1 ถูกกำหนดโดย HMBC คลื่นความถี่ดังต่อไปนี้ H-6 สัญญาณ (δ 5.27, 3.75) บนกลูโคสฉันมีความสัมพันธ์ผ่านการมีเพศสัมพันธ์สามพันธบัตรกับเอสเตอร์คาร์บอนิลเสียงสะท้อนคาร์บอนไดออกไซด์(δ 167.8) ซึ่งในที่สุดก็พบว่ามีความสัมพันธ์กับโปรตอนหอมที่δ 6.17 นี้โปรตอนหอมได้รับมอบหมายให้ H-3 'ของกลุ่ม valoneoyl บนพื้นฐานของความสัมพันธ์ผ่านการมีเพศสัมพันธ์สองพันธบัตรกับสัญญาณมาประกอบกับเสียงสะท้อนตัวตนคาร์บอนC-4' (δ 146.7) 19 ของกลุ่ม valoneoyl ส่วนที่เหลืออีกโปรตอน valoneoyl (H-3 และ H-6 '') เช่นเดียวกับคนอื่น ๆ acyl โปรตอนมีความสัมพันธ์ในทำนองเดียวกันผ่านนิลนั้นก๊อบปี้กับโปรตอนกลูโคสที่แสดงในสูตร(รูปที่ 1) นี้การกำหนดโครงสร้างทางเคมีได้รับการสนับสนุนโดยการย่อยสลายบางส่วนยอม 2,3,6-ไตร Ogalloyl-D-กลูโคส (14) และ rugosin A (15) 0.21 atropisomerism ของกลุ่ม valoneoyl chiral มุ่งมั่นจะเป็นS-series ด้วย ผลบวกฝ้ายขนาดใหญ่ที่ 226 นาโนเมตร ([θ] 1.2 × 105) ใน dichroism วงกลม (CD) spectrum22 andby การผลิตของ 15 เป็นส่วนหนึ่งของไฮโดรไล 1. บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้โครงสร้างของcocciferin D1 ก่อตั้งขึ้น 1 ซึ่งสอดคล้องกับ degalloyl อนุพันธ์ของ phillyraeoidin A (6). Phillyraeoidins A (6), B (7) และ C (8) ที่แยกได้เป็นครั้งแรกจากวร์phillyraeoides. 9 แต่เว็บไซต์ที่มีผลผูกพันของกลุ่มvaloneoyl ใน โครงสร้างรายงานยังคงไม่ได้กำหนด การทดลองของ HMBC dimers เหล่านี้ทำให้ความสัมพันธ์สามพันธบัตรของvaloneoyl โปรตอน-นิลโปรตอนก๊อบปี้กลูโคสคล้ายกับผู้ที่อยู่ใน1. ทิศทางของกลุ่มvaloneoyl ใน phillyraeoidins A, B และ C เป็นที่ยอมรับจึงตามที่ปรากฏในสูตรที่ 6 , 7, และ8 ตามลำดับ. Cocciferins D2 (2) และ D3 (3) ถูกแยกเป็นสีน้ำตาลอ่อนผงป่นและสูตรโมเลกุล(2, C82H52O52 3, C68H46O44) ได้รับการแปลรหัสโดย ESIMS NMR และวิเคราะห์ สเปกตรัม 1H NMR 2 และ 3 จัดแสดงโปรตอนลักษณะสัญญาณน้ำตาลของน้ำตาลกลูโคสเปิดโซ่และglucopyranose กับโครงสร้าง C1 ตามลำดับ(ตารางที่ 1) เมื่อ methylation กับ dimethyl ซัลเฟตและโพแทสเซียมคาร์บอเนตตามด้วยmethanolysis, 2 และ 3 ให้ผลิตภัณฑ์ทั่วไป trimethyl octa-O-methylvaloneate (10) และ dimethyl hexamethoxydiphenate (11) 1H NMR สเปกตรัม 2 แสดงให้เห็นแปด 1H singlets ในภูมิภาคที่มีกลิ่นหอม สัญญาณเนื่องจากการ moieties น้ำตาลใน1H และ 13C NMR สเปกตรัม (ตารางที่ 1) 2 ชี้ให้เห็นว่า 2 เป็นdimer ประกอบด้วยหน่วย monomeric, casuarictin (16) และcastalagin (17) สถานที่ตั้งของกลุ่ม valoneoyl 2 ถูกกำหนดจากสเปกตรัม HMBC วัดในเมทานอล-d4 ที่ 45 องศาเซลเซียสซึ่งแสดงให้เห็นความสัมพันธ์สามพันธบัตรδH 6.447 (valoneoyl HH-3) -δC 167.8 (นิล) -δH 5.09 (กลูโคส H -4 '); δH 7.28 (valoneoyl HA-6) -δC 165.7 (นิล) -δH 6.12 (กลูโคส H-1); δH 6.60 (valoneoyl HJ- 3) -δC 170.9 (นิล) -δH 3.99 (กลูโคส H-6) สถานที่ตั้งของกลุ่ม acyl อื่น ๆ ได้รับการระบุโดย HMBC ความสัมพันธ์ดังแสดงในสูตร 2 (รูปที่ 1) บางส่วนจองจำ 2 ในน้ำร้อนให้ pedunculagin (18) เป็นคลื่นความถี่hydrolysate.The 1H NMR 3 เป็นแบบเดียวกับที่ 2 ยกเว้นกรณีที่ไม่มีสัญญาณเนื่องจาก HHDP สองกลุ่ม ท่ามกลางสัญญาณของแกน C1 glucopyranose ของ3, H-2 และ H-3 resonances [δ 3.49 (ววเจ) 8, 9 เฮิร์ตซ์) และδ 3.71 (br ทีเจ) 9 เฮิร์ตซ์)] ที่ได้รับมอบหมายผ่าน 1H -1H โคซี่, ปรากฏตัวขึ้นในภูมิภาคเขตสูงแสดงให้เห็นตัวตนของ acylation ที่ C-2 และ C-3 (ตารางที่ 1) นี้ได้รับการพิสูจน์โดยการย่อยสลายบางส่วนของ 3 ซึ่งให้ผล 4, 6 (S) - HHDP-D-กลูโคส (26) หกสัญญาณหอม (แต่ละ 1H, s) ในสเปกตรัม1H NMR 3 มีความสอดคล้องกับการปรากฏตัวของvaloneoyl ร์, สระ HHDP และหน่วย flavogallonyl เป็นกลุ่ม acyl ในโมเลกุล นอกจากนี้ ESIMS สเปกตรัมของ 3 แสดงจุดสูงสุดไอออนที่ม. / z 1584 (M + NH4) + ซึ่งเป็น 302 หน่วยมวลสอดคล้องกับ HHDP กลุ่ม (C14H6O8) ต่ำกว่า 2 [ม / z 1886 (M + NH4) +] องค์ประกอบ monomeric 3 ถูกสันนิษฐานจึงจะได้รับการcastalagin (17) และ strictinin (19) .6,13 นี้ได้รับการสนับสนุนโดยความคล้ายคลึงกันอย่างใกล้ชิดของresonances น้ำตาล 3 ให้กับผู้ที่ 17 และ 19 ในสเปกตรัม 13C NMR (ตารางที่ 1) . โหมดผูกพันของกลุ่ม acyl ใน 3 ได้รับหลักฐานจากความสัมพันธ์HMBC ในลักษณะที่คล้ายคลึงกับ 2 (รูปที่ 1) S-การกำหนดค่าของ valoneoyl HHDP และกลุ่มที่2 และ 3 ได้รับการยืนยันจากผ้าฝ้ายขนาดใหญ่บวกผลรอบที่235 นาโนเมตรใน spectra.22 ซีดีบนพื้นฐานของข้อมูลเหล่านี้โครงสร้างของcocciferin D2 และ D3 ถูกจัดตั้งเป็นสูตร2 และ 3 ลักษณะ trimeric ของ cocciferins T1 (4) และ T2 (5) ถูกแสดงโดยESIMS ของพวกเขา [4 เมตร / z 2676 (M + NH4) +; 5 เมตร / z 2670 (M + NH4) +] และเวลาการเก็บรักษาที่มีขนาดใหญ่กว่าของแทนนินhydrolyzable อื่น ๆ ใน dimeric ปกติเฟส HPLC.23 Methylation 4 และ 5 และต่อมาmethanolysis ให้กันทั่วไป 9, 10 และ 11 แสดงให้เห็นการปรากฏตัวของgalloyl, HHDP และกลุ่ม valoneoyl แทนนินทั้ง ใน 1H และ 13C NMR สเปกตรัมของ 4, resonances ในภูมิภาค aliphatic มีความคล้ายคลึงกับของpedunculagin (18) และ phillyraeoidin A (6) ซึ่งทั้งสองร่วมที่เกิดขึ้นในQ. coccifera (ตารางที่ 1) สเปกตรัม 1H NMR 4 แสดงหก 2H singlets แปด 1H singlets ในภูมิภาคหอมหลังจากที่ปรากฏเป็นซ้ำสัญญาณ(ดูมาตราการทดลอง) ชี้ให้เห็นการปรากฏตัวของกลุ่มหกgalloyl กลุ่ม HHDP และสอง valoneoyl กลุ่ม โมเลกุล บนพื้นฐานของข้อมูลเหล่านี้cocciferin T1 ได้รับการสันนิษฐานว่าเป็น hydrolyzable trimeric แทนนินประกอบด้วย phillyraeoidin A (6) และ pedunculagin (18) โหมดการเชื่อมโยงของแต่ละหน่วย acyl 4 ก่อตั้งขึ้นโดยการย่อยสลายบางส่วน4 ในน้ำร้อนซึ่งเจ้าตัวphillyraeoidin B (7), praecoxins A (20) และ D (21), 24 และ 2,3- (S) -HHDP -D กลูโคส (22) 25 เป็นบางส่วนไฮโดรไลเซ(รูปที่ 2) S-การกำหนดค่าที่ chiral กลุ่ม HHDP และ valoneoyl ใน 4 เห็นได้ชัดจากการผลิตของไฮโดรไลเซบางส่วนข้างต้นและยังมีผลกระทบในเชิงบวกฝ้ายแข็งแกร่งที่225 และ 239 นาโนเมตรในสเปกตรัมซีดี4. ดังนั้นโครงสร้างของ cocciferin T1 ได้รับการอธิบายเป็น 3 ซึ่งเป็นครั้งแรกที่ trimeric hydrolyzable แทนนินที่พบในวร์สายพันธุ์. บนพื้นฐานของการมอบหมายงานของสัญญาณ 1H NMR ใช้สเปกตรัม 1H-1H โคซี่ 5, T2 cocciferin ได้รับการอนุมานที่จะเป็นแทนนินhydrolyzable trimeric ประกอบด้วย กลูโคสเปิดโซ่และ C1 สองแกน glucopyranose (ตารางที่ 1) สเปกตรัม 1H NMR 5 แสดงให้เห็นว่าการทำสำเนาของสัญญาณน้ำตาลเนื่องจากส่วนผสมanomer (R: A) 1: 4) ชี้ให้เห็นว่าหนึ่งในสอง C1 แกน glucopyranose มีกลุ่มไฮดรอกซิฟรีที่ศูนย์anomeric สเปกตรัมยังแสดงเนื่องมาเสื้อกล้าม 2H ไปยังกลุ่ม galloyl 11 1H singlets เนื่องจากการหนึ่ง flavogallonyl สอง HHDP, และสองกลุ่ม valoneoyl ในภูมิภาคที่มีกลิ่นหอม resonances เนื่องจากการ moieties น้ำตาลใน 1H และ 13

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เข้มข้น 70 % สารละลายอะซิโตนอนของ
ใบแห้งของคิว coccifera สกัดอย่างต่อเนื่องด้วย
et2o etoac , และนอร์มัล - บิวทานอลเพื่อให้สารสกัดที่เกี่ยวข้องและ
ส่วนละลายน้ำ . สารสกัดจาก etoac ภายใต้
การรวมกันของคอลัมน์โครมาโตกราฟฟีไป toyopearl
hw-40 MCI chp-20p , เจล , เจลและ / หรือ ymc ods-aq 120 -
50 ซื้อใหม่ลาจิแทนนินเมอร์ cocciferin
ชื่อD1 ( 1 ) เก้ารู้จักแทนนินและโพลีฟีน ,
( ) - Catechin , ลาจิก กรด , กรด dilactone valoneic , casuarictin pedunculagin 6
6 tellimagrandin II , 7 แคมเฟอรอล 3-o -
( 6 ′′ - o-galloyl ) - â - D-glucopyranoside , 8 และ phillyraeoidins เป็น
e.9 การนอร์มัล - บิวทานอลและสกัดเป็น chromatographed ในทํานองเดียวกัน
ให้ใหม่ลาจิแทนนินไตรเมอร์ cocciferin T1 , ( 4 ) ,
พร้อมกับ acutissimin B10 ,11 phillyraeoidins B และ c.9
ใหม่ท้องเฟ้อลาจิแทนนิน cocciferin D2 ( , 2 ) , และ 3
รู้จัก c-glucosidic ellagitannins acutissimin castalagin , B , และ 12 , 13 ‘
vescalagin 13,14 , แยกจากส่วน watersoluble
โดยกระบวนการแยกสารละลายอะซีโทนคล้ายกัน

ปริมาณเข้มข้นจากใบ Q suber ถูกปฏิบัติ ในลักษณะที่คล้ายคลึงกับ Q .
coccifera ผลผลิต 2 แทนนินใหม่cocciferins D3
2 ( 3 ) และ ( 5 ) พร้อมกับ cocciferin D2 ( 2 ) และ 13 รู้จักแทนนิน
และโพลีฟีน . ที่รู้จักกันเป็นสารประกอบกลุ่ม
( ) - gallocatechin เคอร์เคอร์ชิทริน pedunculagin , , , ,
acutissimin B , castalagin vascalagin tellimagrandin
, , ชั้น 7 castavaloninic กรด , กรด isocastavaloninic 15 , 16 mongolicain
, 17 และ 18
desgalloylstachyurin .cocciferin D1 ( 1 ) พบว่ามีแทนนินเป็น hydrolyzable
ท้องเฟ้อด้วย c75h56o48 สูตรโมเลกุล , ตามที่ระบุโดย esims
[ M / Z 1075 ( NH4 ) ] และการวิเคราะห์ NMR ช่วง 1H NMR สเปกตรัมของ 1 ซับซ้อนเนื่องจาก
การก่อตัวของส่วนผสมของ R - â - anomers ( 4 : 1 ) และแต่ละ
สัญญาณปรากฏเป็นหลักในที่ซ้ำกัน การปรากฏตัวของ
6 galloyl และกลุ่ม valoneoyl กลุ่มพบ
โดยจับคู่หอมสัญญาณเนื่องจากหก 2H เสื้อกล้าม 3
1 h เสื้อกล้าม . องค์ประกอบทางเคมี , เหล่านี้ถูกระบุโดยการผลิตเมทิล tri-o-methylgallate

( 9 ) และ ( 10 ) เมื่อ octa-o-methylvaloneate ไตรเมทิลเลชัน
1 กับไดเมทิลซัลเฟตโพแทสเซียมคาร์บอเนตใน
อะซิโตนและต่อมาเมทาโนไลซิส . งานของตาล
โปรตอนสัญญาณโดย 1h-1h อบอุ่นเปิดเผยสถานะ