The VL and/or the VH regions of the

The VL and/or the VH regions of the antibodies of the การประดิษฐ์ can be
engineered into other embodiments of ไบสเปซิฟิก full length antibodies, where each antibody arm binds a distinct antigen หรือ เอพิโทป. Such ไบสเปซิฟิก antibodies may be made for example by modulating the CH3 interactions between the two antibodies
heavy chains to form ไบสเปซิฟิก antibodies using technologies such as those
30 described in U.S. Pat. No. 7,695,936; Int. Pat. Publ. No. W02004/111233; U.S. Pat.
Publ. No. US2010/0015133; U.S. Pat. Publ. No. US2007/0287170; Int. Pat. Publ. No. W02008/119353; U.S. Pat. Publ. No. US2009/0182127; U.S. Pat. Publ. No. US2010/0286374; U.S. Pat. Publ. No. US2011/0123532; Int. Pat. Publ. No.
W02011/131746; Int. Pat. Publ. No. W02011/143545; หรือ U.S. Pat. Publ. No.
US2012/0149876. Additional ไบสเปซิฟิก structures into which the VL and/or the VI-1
regions of the antibodies of the การประดิษฐ์ can be incorporated are for example Dual
Variable Domain Immunoglobulins (Int. Pat. Publ. No. W02009/134776), หรือ
5 structures that รวมถึง various dimerization domains to connect the two antibody
arms with different specificity, such as leucine zipper หรือ collagen dimerization
domains (Int. Pat. Publ. No. W02012/022811, U.S. Pat. No. 5,932,448; U.S. Pat.
No. 6,833,441).
Non-antibody molecules can be isolated หรือ screened from compound libraries 10 by conventional means. An automated system for generating and screening a
compound library คือ described in U.S. Patents Nos. 5,901,069 and 5,463,564. A
more focused approach involves three-dimensional modelling of the binding site,
and then making a family of molecules which fit the model. These are then
screened for those with optimal binding characteristics.
15 Another approach คือ to generate รีคอมบิแนนต์ peptide libraries, and then
screen them for those which bind to the เอพิโทป of ฮิวเมน CD134 of interest. See, for example, U.S. Patent No. 5,723,322. This เอพิโทป คือ the same as that bound by the โมโนโคลนอล antibodies described in the examples below. Molecules can be
generated หรือ isolated with relative ease in accordance with techniques well known 20 in the art once the เอพิโทป คือ known.
A further embodiment provides derivatives of any of the แอนติ-CD134
antibodies as described above. In one particular aspect, the antibody derivative คือ
derived from การดัดแปลง of the amino acid sequences of clone 12H3 and/or clone
20E5. Amino acid sequences of any regions of the antibody chains may be modified, 25 such as framework regions, CDR regions, หรือ constant regions. The การดัดแปลง
can be introduced by standard techniques known in the art, such as site-directed
mutagenesis and random PCR- mediated mutagenesis, and may ประกอบรวมด้วย natural
as well as non-natural amino acids. Types of การดัดแปลง รวมถึง insertions,
deletions, substitutions, หรือ combinations ของมัน, of one หรือ more amino acids of an 30 แอนติ-CD134 antibody. ในบาง รูปลักษณะ, the antibody derivative ประกอบรวมด้วย 1,
2, 3, หรือ 4 amino acid substitutions in the heavy chain CDRs and/or one amino acid
substitution in the light chain CDRs. ในบาง รูปลักษณะ, a derivative of an แอนติ-
CD134 antibody ประกอบรวมด้วย one หรือ more amino acid substitutions relative to the







45
germ line amino acid sequence of the ฮิวเมน gene. In a particular embodiment, one
or more of those substitutions from germ line คือ in the CDR2 region of the heavy
chain. In another particular embodiment, the amino acid substitutions relative to
the germline are at one หรือ more of the same positions as the substitutions relative 5 to germ line in antibodies clone 12H3 and clone 20E5. ในอีกหนึ่ง รูปลักษณะ, the
amino acid substitution คือ to change one หรือ more ซิสเทอีนs in an antibody to
another residue, such as, without limitation, alanine หรือ serine. The ซิสเทอีน may be
a canonical หรือ non-canonical ซิสเทอีน. The substitution can be made in a CDR หรือ
framework region of a variable domain หรือ in the constant domain of an antibody. 10 Another type of amino acid substitution คือ to eliminate asparagine-glycine pairs,
which form potential deamidation sites, by altering one หรือ both of the residues. In still other embodiments, the amino acid substitution คือ a conservative amino acid substitution. ในหนึ่ง รูปลักษณะ, the antibody derivative has 1, 2, 3, หรือ 4
conservative amino acid substitutions in the heavy chain CDR regions relative to 15 the amino acid sequences of clone 12H3 and/or clone 20E5. Another type of
การดัดแปลง of an แอนติ-CD134 antibody คือ the alteration of the original
glycosylation pattern of the antibody. The term "alteration" refers to deletion of one
or more carbohydrate มอยอิตี้ found in the antibody, and/or adding one หรือ more
glycosylation sites that are not present in the antibody.
20 Glycosylation of antibodies คือ typically N-linked. N-linked refers to the
attachment of the carbohydrate moiety to the side chain of an asparagine residue. Examples of other การดัดแปลง รวมถึง acylation, amidation, acetylation, cross-
linking, cyclization, formylation, hydroxylation, iodination, methylation,
myristoylation, disulfide bond formation, demethylation, formation of covalent 25 cross-links, formation of ซิสเทอีน, oxidation, phosphorylation, prenylation,
pegylation, proteolytic processing and sulfation.
A further embodiment provides an antibody derivative that ประกอบรวมด้วย an
แอนติ-CD134 antibody, หรือ antigen-binding fragment ของมัน, as described herein,
linked to an additional molecular entity. Examples of additional molecular entities 30 รวมถึง pharmaceutical agents, peptides หรือ proteins, and detection agents หรือ labels.
Specific examples of pharmaceutical agents that may be linked to an แอนติ-CD134
antibody รวมถึง cytotoxic agents หรือ other cancer therapeutic agents, and
radioactive isotopes. Specific examples of peptides หรือ proteins that may be linked to an แอนติ-CD134 antibody รวมถึง antibodies, which may be the same แอนติ-CD134 antibody หรือ a different antibody. Specific examples of detection agents หรือ labels that may be linked to an แอนติ-CD134 antibody รวมถึง (1) fluorescent compounds,
such as fluorescein, fluorescein isothiocyanate, phycoerythrin, rhodamine, 5-
5 dimethylamine-l-naphthalene-■sulfonyl chloride and lanthanide phosphors; (2)
enzymes, such as horseradish peroxidase, alkaline phosphatase, luciferase, and
glucose oxidase; (3) biotin; (4) a predetermined โพลีเปปไทด์ เอพิโทป recognized by a
secondary reporter, such as leucine zipper pair sequences, metal binding domains,
เอพิโทป tags and binding sites for secondary antibodies. A further embodiment
10 provides an antibody derivative which คือ a multimeric form of an แอนติ-CD134
antibody, such as antibody dieters, trimers, หรือ higher-order multimers of
monomeric antibodies. Individual monomers within an antibody multimer may be
identical หรือ different, i.e., they may be heteromeric หรือ homomeric antibody
multimers. Multimerization of antibodies may be accomplished through natural 15 aggregation. For example, some percentage of purified antibody preparations (e.g.,
purified IgG1 molecules) spontaneously form protein aggregates containing
antibody homoไดเมอร์, and other higher-order antibody multimers. Alternatively,
antibody homoไดเมอร์ may be formed through chemical linkage techniques known
in the art. Suitable crosslinkers รวมถึง those that are heterobifunctional, such as 20 m-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide ester, N-succinimidyl S-acethylthio-
acetate and succinimidyl 4-(maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate) หรือ
homobifunctional (such as disuccinimidyl suberate). Such linkers are commercially
available. Antibodies can also be made to multimerize through รีคอมบิแนนต์ DNA
techniques known in the art.
A yet further embodiment provides an antibody derivative which คือ a
ไคเมริก antibody, ซึ่งประกอบรวมด้วย an amino acid sequence of a แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody described herein above. In another example, all of the CDRs of the
ไคเมริก antibody are derived from แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies. In another
example, the CDRs from more than one แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody are combined 30 in a ไคเมริก antibody. Further, a ไคเมริก antibody may ประกอบรวมด้วย the framework
regions derived from one แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody and one หรือ more CDRs from
one หรือ more different ฮิวเมน antibodies. ไคเมริก antibodies can be generated
using conventional methods known in the art. In some particular embodiments, the ไคเมริก antibody ประกอบรวมด้วย one, two, หรือ three CDRs from the บริเวณ แปรผัน สายหนัก หรือ from the บริเวณ แปรผัน สายเบา of an antibody selected from antibody clone 12H3 and/or clone 20E5.
Examples of other antibody derivatives provided by the การประดิษฐ์นี้ 5 รวมถึง single chain antibodies, diabodies, domain antibodies, nanobodies, and unibodies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

VL / VH แคว้นแอนตี้ของการประดิษฐ์สามารถวิศวกรรมเป็นอื่น ๆ embodiments ของแอนตี้แบบยาวไบสเปซิฟิก ซึ่งแต่ละแขนแอนติบอดี binds เอพิโทปหรือการตรวจหาหมด แอนตี้ไบสเปซิฟิกดังกล่าวอาจจะทำตัวอย่าง โดยเกี่ยว CH3 โต้ตอบระหว่างแอนตี้สองกลุ่มหนักจะแอนตี้ไบสเปซิฟิกแบบฟอร์มที่ใช้เทคโนโลยีเช่นในสหรัฐอเมริกา Pat 30 หมายเลข 7,695,936 ของดอกเบี้ย Pat หมายเลข publ. W02004/111233 สหรัฐอเมริกาพัฒน์หมายเลข publ. US2010/0015133 สหรัฐอเมริกาพัฒน์ หมายเลข publ. US2007/0287170 ของดอกเบี้ย Pat หมายเลข publ. W02008/119353 สหรัฐอเมริกาพัฒน์ หมายเลข publ. US2009/0182127 สหรัฐอเมริกาพัฒน์ หมายเลข publ. US2010/0286374 สหรัฐอเมริกาพัฒน์ หมายเลข publ. US2011/0123532 ของดอกเบี้ย Pat หมายเลข publ.W02011/131746 ของดอกเบี้ย Pat หมายเลข publ. W02011/143545 Pat หรือสหรัฐอเมริกา หมายเลข publ.US2012/0149876 โครงสร้างไบสเปซิฟิกเพิ่มเติมเข้าไป VL / วี-1 สามารถรวมแคว้นแอนตี้ของการประดิษฐ์มีตัวอย่างสอง โดเมนตัวแปร Immunoglobulins (Pat ของดอกเบี้ย หมายเลข publ. W02009/134776), หรือ 5 โครงสร้างรวมถึงที่โดเมน dimerization ต่าง ๆ เชื่อมต่อแอนติบอดีสอง แผ่นดิน มี specificity ที่แตกต่างกัน เช่น leucine ซิปหรือคอลลาเจน dimerization โดเมน (Pat ของดอกเบี้ย หมายเลข publ. W02012/022811, Pat สหรัฐอเมริกา หมายเลข 5,932,448 สหรัฐอเมริกาพัฒน์ หมายเลข 6,833,441)โมเลกุลแอนติบอดีไม่สามารถแยกออกเป็นฉายจากไลบรารีผสม 10 โดยปกติหมายถึง ระบบอัตโนมัติสำหรับการสร้าง และการตรวจคัดกรองการ ในสหรัฐอเมริกาสิทธิบัตรชุด 5,901,069 และ 5,463,564 คือไลบรารีที่ซับซ้อน A มุ่งเน้นเพิ่มเติมเกี่ยวข้องกับวิธีการสร้างแบบจำลองสามมิติของไซต์รวม และทำให้ครอบครัวของโมเลกุลที่เต็มรูปแบบแล้ว เหล่านี้อยู่แล้ว ฉายสำหรับผู้ที่มีลักษณะผูกเหมาะสมที่สุด15 อีกวิธีคือการสร้างไลบรารีเปปรีคอมบิแนนต์ แล้วจอพวกเขาผู้ซึ่งผูกกับเอพิโทปของฮิวเมน CD134 น่าสนใจ ดู เช่น สหรัฐอเมริกาสิทธิบัตรหมายเลข 5,723,322 นี้คือเอพิโทปเหมือนกับที่ผูกไว้ โดยแอนตี้โมโนโคลนอลอธิบายในตัวอย่างด้านล่าง โมเลกุลสามารถหรือสร้างแยกต่างหากอย่างง่ายดายญาติตามเทคนิค 20 รู้จักศิลปะครั้งคือเอพิโทปที่รู้จักกันลื่นไปให้อนุพันธ์ของแอนติ-CD134แอนตี้ที่อธิบายข้างต้น ในแง่มุมเฉพาะหนึ่ง คือการพัฒนาแอนติบอดี มาจากการดัดแปลงลำดับกรดอะมิโนของโคลน 12H 3 หรือโคลน 20E5 ลำดับกรดอะมิโนของภูมิภาคใด ๆ ของโซ่แอนติบอดีอาจสามารถปรับเปลี่ยน 25 กรอบภูมิภาค ภูมิภาค CDR ออกเป็นขอบเขตคง การดัดแปลง สามารถนำมาใช้ โดยเทคนิคมาตรฐานที่รู้จักกันในศิลปะ เช่นไซต์ตรง mutagenesis สุ่ม PCR - mediated mutagenesis และอาจประกอบรวมด้วยธรรมชาติ รวมทั้งกรดอะมิโนธรรมชาติไม่ ชนิดการดัดแปลงรวมถึงต ลบ ทดแทน หรือชุด ของมัน กรดอะมิโนหนึ่งหรือมากกว่าของแอนติบอดีที่ 30 แอนติ-CD134 ในบางรูปลักษณะ แอนติบอดีประกอบรวมด้วยพัฒนา 1 2, 3 หรือ 4 กรดอะมิโนแทนใน CDRs โซ่หนักและ/หรือกรดอะมิโนหนึ่ง การแทนสายไฟ CDRs. ในบางรูปลักษณะ อนุพันธ์ของแอนติการ- CD134 แอนติบอดีประกอบรวมด้วยหนึ่งหรือเติมกรดอะมิโนทดแทนกับการ 45จมูกเส้นกรดอะมิโนลำดับของยีนฮิวเมน ในลื่นเฉพาะ หนึ่ง หรือของผู้แทนจากจมูกเส้นคือในแคว้น CDR2 หนัก ลูกโซ่ ในอีกการลื่น การทดแทนกรดอะมิโนกับ germline หนึ่งหรือเพิ่มเติมตำแหน่งเดียวกันเป็นการทดแทน 5 สัมพันธ์กับจมูกบรรทัดในแอนตี้ 12H 3 โคลน และโคลน 20E5 ในอีกหนึ่งรูปลักษณะ กรดอะมิโนทดแทนคือการเปลี่ยนหรือหนึ่ง ซิสเทอีนs เพิ่มเติมในการแอนติบอดีเพื่อ สารตกค้างอื่น ๆ เช่น ไม่จำกัด อะลานีนหรือแถ ซิสเทอีนอาจ ซิสเทอีนไม่ใช่มาตรฐานหรือเป็นที่ยอมรับ สามารถทำการแทนใน CDR แคว้นหรือผันแปรโดเมนในโดเมนคงที่ของแอนติบอดีที่กรอบ 10 อีกชนิดกรดอะมิโนคือแทนที่จะกำจัดคู่ asparagine glycineซึ่งแบบฟอร์มเว็บไซต์ deamidation เป็นไปได้ โดยดัดแปลงหนึ่งหรือทั้งสองของตกค้าง ในยังอื่น ๆ embodiments คือทดแทนกรดอะมิโนเป็นกรดอะมิโนหัวเก่าทดแทน ในหนึ่งรูปลักษณะ อนุพันธ์แอนติบอดีมี 1, 2, 3 หรือ 4กรดอะมิโนหัวเก่าแทนในหนักลำดับกรดอะมิโนของภูมิภาค CDR สัมพันธ์ 15 โซ่ 12 H 3 โคลน หรือโคลน 20E5 อีกชนิดหนึ่ง การดัดแปลงคือแอนติบอดีแอนติ CD134 การเปลี่ยนของเดิม รูปแบบ glycosylation ของแอนติบอดีที่ คำว่า "แก้ไข" หมายถึงการลบหนึ่ง หรือเพิ่มเติมคาร์โบไฮเดรตมอยอิตี้พบแอนติบอดีที่ หรือหนึ่งหรือเพิ่มเติม เว็บไซต์ glycosylation ที่ไม่อยู่ในที่แอนติบอดีGlycosylation 20 ของแอนตี้คือโดยทั่วไป N ลิงค์ เชื่อมโยง N หมายถึงการเอกสารแนบ moiety คาร์โบไฮเดรตกับห่วงโซ่ข้างของตกค้างเป็น asparagine ตัวอย่างอื่น ๆ อย่างไร acylation รวมถึงการดัดแปลง amidation, acetylation ขน-เชื่อมโยง cyclization, formylation, hydroxylation, iodination ปรับmyristoylation ไดซัลไฟด์พันธบัตรก่อ demethylation ก่อ covalent 25 cross-links ผู้แต่งซิสเทอีน ออกซิเดชัน phosphorylation, prenylation pegylation ประมวลผล proteolytic และ sulfationลื่นไปให้อนุพันธ์มีแอนติบอดีประกอบรวมด้วยที่มีแอนติบอดีแอนติ CD134 หรือตรวจหาผูกส่วนของมัน ดังที่งานนี้เชื่อมโยงกับเอนทิตีโมเลกุลเพิ่มเติม ตัวอย่างของตัวแทนยารวมถึงตีโมเลกุลเพิ่มเติม 30 เปปไทด์โปรตีน และตรวจสอบตัวแทน ตัวอย่างเฉพาะของยาที่อาจเชื่อมโยงไปแอนติ-CD134 หรือแอนติบอดีรวมถึงตัวแทน cytotoxic แทนอื่นรักษาโรคมะเร็ง และ ไอโซโทปกัมมันตรังสี ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของเปปไทด์หรือโปรตีนที่อาจเชื่อมโยงไปที่แอนติ CD134 แอนติบอดีรวมถึงแอนตี้ ซึ่งอาจออกเป็นแอนติบอดีแอนติ CD134 เดียว แอนติบอดีแตกต่างกัน ตัวอย่างเฉพาะของป้ายชื่อหรือตัวแทนตรวจสอบที่อาจเชื่อมโยงไปแอนติ CD134 แอนติบอดีรวมถึง (1) เรืองแสงสารfluorescein, fluorescein isothiocyanate, phycoerythrin, rhodamine, 5-dimethylamine-l-แนฟทาลีน-■sulfonyl คลอไรด์และแลนทาไนด์ phosphors; 5 (2) เอนไซม์ horseradish peroxidase อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส luciferase และ น้ำตาลกลูโคส oxidase (3) ไบโอติน (4) เอพิโทปโพลีเปปไทด์กำหนดไว้การรับรู้โดยการ โปรแกรมรายงานรอง เช่น leucine ซิปคู่ลำดับ โดเมนรวมโลหะ เอพิโทปแท็กและแอนตี้รองไซต์ผูก ลื่นไป 10 แสดงการอนุพันธ์แอนติบอดีคือที่ตัว multimeric เป็นแอนติ-CD134แอนติบอดี dieters แอนติบอดี trimers หรือ multimers ขั้นสูงของแอนตี้ monomeric นั้น Monomers ละภายในมี multimer แอนติบอดีอาจ เหมือนหรือแตกต่างกัน เช่น พวกเขาอาจจะ heteromeric หรือ homomeric แอนติบอดี multimers Multimerization แอนตี้อาจลุล่วงตามธรรมชาติรวม 15 ตัวอย่าง เปอร์เซ็นต์ของบริสุทธิ์เตรียมแอนติบอดี (เช่น บริสุทธิ์ IgG1 โมเลกุล) ทหลายแบบเพิ่มโปรตีนที่ประกอบด้วย แอนติบอดี homoไดเมอร์ และ multimers แอนติบอดีขั้นสูงอื่น ๆ หรือ homoไดเมอร์ แอนติบอดีอาจเกิดขึ้น โดยเชื่อมโยงเคมีเทคนิคที่รู้จักกัน ในงานศิลปะ รวมถึง crosslinkers เหมาะที่จะ heterobifunctional เช่น 20 m-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide เอส S N-succinimidyl-acethylthio - acetate และ succinimidyl หรือ 4-(maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate) homobifunctional (เช่น disuccinimidyl suberate) มี linkers ดังกล่าวในเชิงพาณิชย์ พร้อมใช้งาน แอนตี้ทำให้ multimerize ผ่านดีเอ็นเอรีคอมบิแนนต์ เทคนิคที่รู้จักกันในศิลปะA ยังลื่นเพิ่มเติมให้เป็นอนุพันธ์แอนติบอดีคือการแอนติบอดีไคเมริก ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นกรดอะมิโนลำดับ CD134 แอนติ-ฮิวเมนแอนติบอดีที่อธิบายข้างต้นนี้ ในอย่างอื่น CDRs ของทั้งหมดไคเมริกแอนติบอดีที่ได้รับมาจากแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมน ในอีกตัวอย่าง CDRs จาก CD134 แอนติ-ฮิวเมนหนึ่งที่มีแอนติบอดีรวม 30 ในแอนติบอดีไคเมริก เพิ่มเติม แอนติบอดีไคเมริกอาจประกอบรวมด้วยกรอบ ภูมิภาคมาจากแอนติบอดี CD134 แอนติ-ฮิวเมนหนึ่งและ CDRs หนึ่งหรือเพิ่มเติมจาก หรือมากกว่าหนึ่งแอนตี้ฮิวเมนแตกต่างกัน สามารถสร้างแอนตี้ไคเมริก ใช้วิธีทั่วไปที่รู้จักกันในศิลปะ ในบาง embodiments เฉพาะ ประกอบรวมด้วยแอนติบอดีไคเมริกหนึ่ง สอง สามหรือ CDRs หรือสายหนักแปรผันบริเวณจากสายเบาแปรผันบริเวณของแอนติบอดีที่เลือกจากแอนติบอดีจาก 12H 3 โคลน หรือโคลน 20E5ตัวอย่างของตราสารอนุพันธ์แอนติบอดีอื่น ๆ แอนตี้โซ่เดียว 5 รวมถึงการประดิษฐ์นี้ diabodies โดเมนแอนตี้ nanobodies และ unibodies

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

VL และ / หรือภูมิภาค VH
ของแอนติบอดีของการประดิษฐ์ที่สามารถออกแบบเข้าembodiments อื่น ๆ ของไบสเปซิฟิกแอนติบอดียาวเต็มรูปแบบซึ่งแต่ละแขนผูกแอนติบอดีแอนติเจนที่แตกต่างกันหรือเอพิโทป เช่นไบสเปซิฟิกแอนติบอดีอาจจะทำเช่นโดยการปรับปฏิสัมพันธ์ CH3
ระหว่างแอนติบอดีสองโซ่หนักในรูปแบบไบสเปซิฟิกแอนติบอดีที่ใช้เทคโนโลยีเช่นที่
30 อธิบายในสหรัฐอเมริกาแพ็ต หมายเลข 7695936; Int ตบเบา ๆ Publ ฉบับที่ W02004 / 111233; สหรัฐแพ็ต.
Publ ฉบับที่ US2010 / 0015133; สหรัฐแพ็ต Publ ฉบับที่ US2007 / 0287170; Int ตบเบา ๆ Publ ฉบับที่ W02008 / 119353; สหรัฐแพ็ต Publ ฉบับที่ US2009 / 0182127; สหรัฐแพ็ต Publ ฉบับที่ US2010 / 0286374; สหรัฐแพ็ต Publ ฉบับที่ US2011 / 0123532; Int ตบเบา ๆ Publ ฉบับที่
W02011 / 131746; Int ตบเบา ๆ Publ ฉบับที่ W02011 / 143545; หรือแพ็ตสหรัฐ Publ ฉบับที่
US2012 / 0149876 เพิ่มเติมไบสเปซิฟิกลงในโครงสร้างที่ VL และ / หรือ VI-1
ภูมิภาคของแอนติบอดีของการประดิษฐ์สามารถรวมเป็นเช่นคู่ตัวแปรโดเมน Immunoglobulins (Int. แพ็ต. Publ. ฉบับที่ W02009 / 134776) หรือ 5 โครงสร้างที่รวมถึงโดเมน dimerization ต่างๆในการเชื่อมต่อทั้งสองแอนติบอดีแขนจำเพาะที่แตกต่างกันเช่น leucine ซิปคอลลาเจนหรือ dimerization โดเมน (Int Publ แพ็ตครั้งที่ W02012 / 022,811 สหรัฐแพ็ตครั้งที่ 5932448.... แพ็ตสหรัฐเลขที่ 6833441). โมเลกุลแอนติบอดีไม่สามารถแยกได้หรือคัดเลือกจากห้องสมุดสารประกอบ 10 ด้วยวิธีการแบบเดิม ระบบอัตโนมัติสำหรับการสร้างและคัดกรองห้องสมุดคือสารประกอบที่อธิบายไว้ในสิทธิบัตรสหรัฐฯเลขที่. 5901069 และ 5463564 วิธีการมุ่งเน้นมากขึ้นเกี่ยวกับการสร้างแบบจำลองสามมิติของเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันที่แล้วทำให้ครอบครัวของโมเลกุลซึ่งพอดีกับรูปแบบที่ เหล่านี้จะแล้วคัดเลือกสำหรับผู้ที่มีลักษณะที่มีผลผูกพันที่ดีที่สุด. 15 อีกวิธีหนึ่งคือการสร้างรีคอมบิแนนต์ห้องสมุดเปปไทด์และจากนั้นหน้าจอพวกเขาสำหรับผู้ที่ผูกกับเอพิโทปของฮิวเมนCD134 สนใจ ดูตัวอย่างเช่นสิทธิบัตรสหรัฐอเมริกาเลขที่ 5723322 นี้เอพิโทปคือเช่นเดียวกับที่ผูกพันตามแอนติบอดีโมโนโคลนอลที่อธิบายไว้ในตัวอย่างด้านล่าง โมเลกุลสามารถสร้างหรือแยกได้อย่างง่ายดายญาติให้สอดคล้องกับเทคนิคที่รู้จักกันดี 20 ในงานศิลปะเมื่อเอพิโทปคือที่รู้จักกัน. ศูนย์รวมต่อไปให้สัญญาซื้อขายล่วงหน้าใด ๆ ของแอนติ -CD134 แอนติบอดีที่อธิบายข้างต้น ในด้านหนึ่งโดยเฉพาะอย่างยิ่งคืออนุพันธ์แอนติบอดีที่ได้มาจากการดัดแปลงของลำดับกรดอะมิโนของโคลน 12H3 และ / หรือโคลน 20E5 ลำดับกรดอะมิโนในภูมิภาคใด ๆ ของโซ่แอนติบอดีอาจถูกปรับเปลี่ยน 25 เช่นพื้นที่กรอบภูมิภาค CDR, หรือภูมิภาคอย่างต่อเนื่อง การดัดแปลงสามารถนำมาตรฐานโดยใช้เทคนิคที่รู้จักกันในงานศิลปะเช่นเว็บไซต์กำกับฉับและPCR- สุ่มฉับไกล่เกลี่ยและอาจจะประกอบรวมด้วยธรรมชาติเช่นเดียวกับที่ไม่เป็นธรรมชาติกรดอะมิโน ประเภทของการดัดแปลงรวมถึงการแทรก, การลบ, แทน, หรือการรวมกันของมันของหนึ่งหรือกรดอะมิโนมากขึ้นจาก 30 แอนติ -CD134 แอนติบอดี ในบางรูปลักษณะแอนติบอดีอนุพันธ์ประกอบรวมด้วย 1, 2, 3, 4 หรือแทนกรดอะมิโนใน CDRs ห่วงโซ่หนักและ / หรือกรดอะมิโนหนึ่งทดแทนในห่วงโซ่แสงCDRs ในบางรูปลักษณะอนุพันธ์ของแอนติ - การCD134 แอนติบอดีประกอบรวมด้วยหนึ่งหรืออื่น ๆ แทนกรดอะมิโนเทียบกับ45 ลำดับกรดอะมิโนสายจมูกของฮิวเมนยีน ในศูนย์รวมโดยเฉพาะอย่างใดอย่างหนึ่งหรือมากกว่าของผู้แทนจากบรรทัดคือเชื้อโรคในภูมิภาค CDR2 ของหนักห่วงโซ่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในศูนย์อื่นแทนกรดอะมิโนที่สัมพันธ์กับgermline เป็นที่หนึ่งหรืออื่น ๆ ของตำแหน่งเช่นเดียวกับญาติแทน 5 กับสายเชื้อโรคในแอนติบอดีโคลนและโคลน 12H3 20E5 ในอีกหนึ่งรูปลักษณะที่ทดแทนกรดอะมิโนคือการเปลี่ยนแปลงอย่างใดอย่างหนึ่งหรืออื่น ๆ อีกมากมายซิสเทอีนในแอนติบอดีไปสารตกค้างอื่นเช่นโดยไม่มีข้อจำกัด หรือซีรีนอะลานีน ซิสเทอีนอาจจะยอมรับหรือซิที่ไม่ยอมรับสเทอีน การเปลี่ยนตัวผู้เล่นสามารถที่จะทำใน CDR หรือภูมิภาคกรอบของตัวแปรหรือโดเมนในโดเมนคงที่ของแอนติบอดี 10 อีกประเภทหนึ่งของการทดแทนคือกรดอะมิโนที่จะกำจัดคู่ asparagine-glycine, ซึ่งรูปแบบเว็บไซต์ deamidation ที่อาจเกิดขึ้นจากการเปลี่ยนแปลงอย่างใดอย่างหนึ่งหรือทั้งสองตกค้าง ใน embodiments อื่น ๆ ยังคงทดแทนกรดอะมิโนคือทดแทนกรดอะมิโนที่อนุรักษ์นิยม ในหนึ่งรูปลักษณะอนุพันธ์แอนติบอดีมี 1, 2, 3, 4 หรือแทนกรดอะมิโนในเชิงอนุรักษ์นิยมในห่วงโซ่หนักภูมิภาคCDR เทียบกับ 15 ลำดับกรดอะมิโนของโคลน 12H3 และ / หรือโคลน 20E5 อีกประเภทหนึ่งของการดัดแปลงของแอนติ -CD134 แอนติบอดีคือการเปลี่ยนแปลงของเดิมรูปแบบglycosylation ของแอนติบอดี คำว่า "การเปลี่ยนแปลง" หมายถึงการลบหนึ่งหรือมากกว่าคาร์โบไฮเดรตมอยอิตี้พบในแอนติบอดีและ/ หรือเพิ่มหนึ่งหรืออื่น ๆ อีกมากมายเว็บไซต์glycosylation ที่ไม่ได้อยู่ในแอนติบอดี. 20 Glycosylation ของแอนติบอดีคือมักจะไม่มีการเชื่อมโยง N-เชื่อมโยงหมายถึงสิ่งที่แนบมาของครึ่งคาร์โบไฮเดรตโซ่ด้านข้างของสารตกค้าง asparagine ตัวอย่างอื่น ๆ ของการดัดแปลงรวมถึง acylation, amidation, acetylation, ข้ามเชื่อมโยงcyclization, formylation, hydroxylation, iodination, methylation, myristoylation ก่อพันธบัตรซัลไฟด์, demethylation การก่อตัวของโควาเลนต์ 25 ข้ามการเชื่อมโยงการก่อตัวของซิสเทอีน , ออกซิเดชัน phosphorylation, prenylation, pegylation การประมวลผลและโปรตีน sulfation. ศูนย์รวมต่อไปให้อนุพันธ์แอนติบอดีที่ประกอบรวมด้วยแอนติ -CD134 แอนติบอดีหรือแอนติเจนที่มีผลผูกพันส่วนของมันตามที่อธิบายไว้ในที่นี้เชื่อมโยงกับโมเลกุลเพิ่มเติมนิติบุคคล ตัวอย่างของหน่วยงานในระดับโมเลกุลอีก 30 รวมถึงตัวแทนยา, เปปไทด์หรือโปรตีนและตัวแทนการตรวจสอบหรือฉลาก. เฉพาะตัวอย่างของตัวแทนยาที่อาจจะเชื่อมโยงกับแอนติ -CD134 แอนติบอดีรวมถึงตัวแทนพิษหรือตัวแทนในการรักษาโรคมะเร็งอื่น ๆ และสารกัมมันตรังสีไอโซโทป ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของเปปไทด์หรือโปรตีนที่อาจจะเชื่อมโยงไปยังแอนติ -CD134 แอนติบอดีรวมถึงแอนติบอดีซึ่งอาจจะเหมือนกันแอนติแอนติบอดี -CD134 หรือแอนติบอดีที่แตกต่างกัน ตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงของป้ายตัวแทนหรือการตรวจสอบที่อาจจะเชื่อมโยงกับแอนติ -CD134 แอนติบอดีรวมถึง (1) สารเรืองแสงเช่นfluorescein, fluorescein isothiocyanate, phycoerythrin, rhodamine, 5 5 dimethylamine-l-naphthalene- ■ sulfonyl คลอไรด์ และสารเรืองแสง lanthanide; (2) เอนไซม์ peroxidase เช่นมะรุมด่าง phosphatase, luciferase และoxidase กลูโคส; (3) ไบโอติน; (4) ที่กำหนดไว้โพลีเปปไทด์เอพิโทปได้รับการยอมรับโดยผู้สื่อข่าวรองเช่นleucine ซิปลำดับคู่โลหะโดเมนผูกพันเอพิโทปแท็กและเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันสำหรับแอนติบอดีรอง ศูนย์รวมอีก10 ให้อนุพันธ์แอนติบอดีซึ่งคือรูปแบบ multimeric ของแอนติ -CD134 แอนติบอดีเช่น dieters แอนติบอดี Trimers, หรือ multimers ขั้นสูงของแอนติบอดีmonomeric โมโนเมอร์ในแต่ละแอนติบอดี MulTimer อาจจะเป็นเหมือนกันหรือแตกต่างกันกล่าวคือพวกเขาอาจจะheteromeric หรือแอนติบอดี homomeric multimers multimerization ของแอนติบอดีอาจจะทำได้โดยธรรมชาติรวม 15 ตัวอย่างเช่นร้อยละของการเตรียมแอนติบอดีบริสุทธิ์บางส่วน (เช่นบริสุทธิ์โมเลกุลIgG1) ธรรมชาติในรูปแบบมวลรวมโปรตีนที่มีแอนติบอดีตุ๊ดไดเมอร์และอื่นๆ ที่ multimers แอนติบอดีขั้นสูง อีกทางเลือกหนึ่งแอนติบอดีตุ๊ดไดเมอร์อาจจะเกิดขึ้นโดยใช้เทคนิคการเชื่อมโยงทางเคมีที่รู้จักกันในงานศิลปะ ขวางเหมาะรวมถึงผู้ที่มีความ heterobifunctional เช่น 20 เมตร-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide เอสเตอร์ N-succinimidyl S-acethylthio- อะซิเตทและ succinimidyl 4 (maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate) หรือhomobifunctional (เช่น suberate disuccinimidyl) . linkers ดังกล่าวในเชิงพาณิชย์ที่มีอยู่ แอนติบอดียังสามารถทำ multimerize ผ่านรีคอมบิแนนต์ดีเอ็นเอเทคนิคที่รู้จักกันในงานศิลปะ. ศูนย์รวมต่อไปยังมีอนุพันธ์แอนติบอดีซึ่งคือไคเมริกแอนติบอดีซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโนของแอนติ- ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีบรรยายในที่นี้ดังกล่าวข้างต้น อีกตัวอย่างหนึ่งคือทั้งหมดของ CDRs ของแอนติบอดีไคเมริกจะได้มาจากแอนติ- ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 อีกตัวอย่างเช่น CDRs จากมากกว่าหนึ่งแอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 จะรวมกันในวันที่ 30 ไคเมริกแอนติบอดี ต่อไปเป็นไคเมริกแอนติบอดีอาจประกอบรวมด้วยกรอบภูมิภาคหนึ่งที่ได้มาจากแอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 และเป็นหนึ่งหรือ CDRs เพิ่มเติมจากหนึ่งหรืออื่นๆ อีกมากมายที่แตกต่างกันฮิวเมนแอนติบอดี ไคเมริกแอนติบอดี้ที่สามารถสร้างขึ้นโดยใช้วิธีการเดิมที่รู้จักกันในงานศิลปะ ในบาง embodiments โดยเฉพาะอย่างยิ่งไคเมริกแอนติบอดีประกอบรวมด้วยหนึ่งสองหรือสาม CDRs จากบริเวณแปรผันสายหนักหรือจากบริเวณแปรผันสายเบาของแอนติบอดีเลือกจากแอนติบอดีโคลน 12H3 และ / หรือโคลน 20E5. ตัวอย่างของอื่น ๆ สัญญาซื้อขายล่วงหน้าแอนติบอดีจัดไว้ให้โดยการประดิษฐ์นี้ 5 รวมถึงแอนติบอดีโซ่เดียว diabodies แอนติบอดีโดเมน nanobodies และ unibodies

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วน VL และ / หรือ VH ภูมิภาคของแอนติบอดีของการประดิษฐ์สามารถ
วิศวกรรมใน embodiments ของไบสเปซิฟิกเต็มความยาวแอนติบอดี แอนติบอดีที่แต่ละแขนผูกแตกต่างกันแอนติเจนค็อคเอพิโทป . ไบสเปซิฟิกแอนติบอดีดังกล่าวอาจจะทำตัวอย่างของการปฏิสัมพันธ์ระหว่างสองแอนติบอดี
CH3โซ่หนักแบบไบสเปซิฟิกแอนติบอดีโดยใช้เทคโนโลยีเช่น
30 อธิบายในสหรัฐอเมริกา แพท ไม่ 7695936 ; พื้นที่แพท PUBL . ไม่ w02004 / 111233 ; สหรัฐอเมริกา Pat .
PUBL . ไม่ us2010 / 0015133 U.S . แพท PUBL . ไม่ us2007 / 0287170 ; พื้นที่แพท PUBL . ไม่ w02008 / 119353 U.S . แพท PUBL . ไม่ us2009 / 0182127 U.S . แพท PUBL . ไม่ us2010 / 0286374 U.S . แพท PUBL . ไม่ us2011 / 0123532 ; พื้นที่แพท PUBL .
ไม่w02011 / 131746 ; พื้นที่แพท PUBL . ไม่ w02011 / 143545 ; ค็อคของแพท PUBL . . .
us2012 / 0149876 . เพิ่มเติมโครงสร้างเป็นไบสเปซิฟิกซึ่ง VL และ / หรือภูมิภาค vi-1
ของแอนติบอดีของการประดิษฐ์สามารถรวมเช่น dual
ตัวแปรโดเมนมมูโนโกลบูลิน ( Int . แพท PUBL . ไม่ w02009 / 134776 ค็อค
)5 โครงสร้างโดเมนที่รวมถึงสหชาตต่างๆเพื่อเชื่อมต่อสองแอนติบอดี
แขนแตกต่างกันเฉพาะเจาะจง เช่น ลูซีนซิปค็อคคอลลาเจนสหชาต
โดเมน ( พื้นที่ แพท PUBL . ไม่ w02012 / 022811 . แพท ไม่ 5932448 U.S . แพท
ไม่ 6833441 ) .
ไม่ใช่โมเลกุลแอนติบอดีสามารถแยกสารประกอบค็อคฉายจากห้องสมุด 10 โดยวิธีธรรมดาระบบอัตโนมัติสำหรับการสร้างและการคัดกรอง
ผสมห้องสมุดความอธิบายในสหรัฐอเมริกาสิทธิบัตรเลขที่ 5901069 และ 5463564 . เป็นวิธีการที่เกี่ยวข้องกับการสร้างแบบจำลองสามมิติ
มากขึ้นของเว็บไซต์ผูกพัน
แล้วทำให้ครอบครัวของโมเลกุลซึ่งพอดีกับรูปแบบ เหล่านี้จะถูกคัดกรองผู้ที่มีที่ดีที่สุดแล้ว

รวมคุณลักษณะ15 วิธีอื่นความเพื่อสร้างห้องสมุดเปปไทด์รีคอมบิแนนต์แล้ว
หน้าจอพวกเขาเหล่านั้นซึ่งผูกกับเอพิโทปของฮิวเมน cd134 ของดอกเบี้ย ดู ตัวอย่าง สหรัฐอเมริกาสิทธิบัตรเลขที่ 5723322 . เอพิโทปนี้ความเหมือนกัน ผูกพัน โดยโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่อธิบายในตัวอย่างด้านล่าง โมเลกุลสามารถ
สร้างค็อคแยกกับญาติความสะดวกตามเทคนิคที่รู้จักกันดี 20 ในศิลปะเมื่อเอพิโทปความรู้ การรวมเพิ่มเติมมีอนุพันธ์ของใด ๆของแอนติ - cd134
( ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ในด้านหนึ่งโดยเฉพาะ , แอนติบอดีอนุพันธ์ความ
มาจากการดัดแปลงของลำดับของกรดอะมิโน 12h3 โคลนและ / หรือโคลน
20e5 .ลำดับกรดอะมิโนของภูมิภาคของแอนติบอดีโซ่อาจจะถูกปรับ 25 เช่น กรอบภูมิภาค CDR ภูมิภาค ค็อคคงที่ภูมิภาค การการดัดแปลง
สามารถแนะนำเทคนิคมาตรฐานที่รู้จักกันในศิลปะ เช่น การสุ่มตรวจและเว็บไซต์กำกับ
- ผ่านการ และอาจประกอบรวมด้วยธรรมชาติ
รวมทั้งไม่ธรรมชาติ กรดอะมิโนประเภทของการดัดแปลงใหม่
รวมถึง , ลบแทนที่ ค็อคชุดของมันของหนึ่งค็อคกรดอะมิโนมากกว่ามี 30 แอนติ - cd134 แอนติบอดี ในบางรูปลักษณะ , แอนติบอดีอนุพันธ์ประกอบรวมด้วย 1
2 , 3 , 4 แทนในค็อคกรดอะมิโนโซ่หนัก CDRs และ / หรือกรดอะมิโน
ทดแทนใน CDRs โซ่แสง ในบางรูปลักษณะ , อนุพันธ์ของแอนติ -
cd134 แอนติบอดีประกอบรวมด้วยหนึ่งค็อคเพิ่มเติมกรดอะมิโนเปลี่ยนเทียบกับ 45








สายเชื้อฮิวเมนลำดับกรดอะมิโนของยีน ในศูนย์รวมเฉพาะหนึ่งหรือมากกว่าของการแทน
จากสายเชื้อความในภูมิภาค cdr2 ของห่วงโซ่หนัก

โดยเฉพาะในอีกรูปร่างกรดอะมิโนแทนญาติ
เยอร์มไลน์เป็นหนึ่งค็อคเพิ่มเติมของตำแหน่งเดียวกับแทนญาติ 5 สายเชื้อ ใน 12h3 แอนติบอดีโคลนและโคลน 20e5 . ในอีกหนึ่งรูปลักษณะ ,
ความการแทนที่กรดอะมิโนเปลี่ยนค็อคเพิ่มเติมซิสเทอีนในแอนติบอดี

กากอีก เช่นโดยไม่มีข้อ จำกัด ของเอนไซม์อะลานีนค็อค . การซิสเทอีนอาจ
เป็น Canonical ค็อคไม่ Canonical ซิสเทอีน . ทดแทนได้ใน CDR ค็อค
กรอบขอบเขตของตัวแปรในโดเมนโดเมนค็อคคงที่ของแอนติบอดี 10 ชนิดอื่นทดแทน เพื่อกำจัดกรดอะมิโนแอสพาราจีนที่มีความคู่
แบบฟอร์มที่เว็บไซต์ดีแอมมิ เดชันที่มีศักยภาพโดยการเปลี่ยนหนึ่งค็อค ทั้งของที่ตกค้าง ใน embodiments อื่น ๆ , การแทนที่กรดอะมิโนกรดอะมิโนทดแทนความอนุรักษ์นิยม ในหนึ่งรูปลักษณะ , แอนติบอดีอนุพันธ์มี 1 , 2 , 3 , 4
อนุลักษณ์กรดอะมิโนค็อคแทนในโซ่หนัก CDR ภูมิภาคสัมพันธ์กับลำดับของกรดอะมิโนที่ 15 12h3 โคลนและ / หรือโคลน 20e5 . ประเภทของ
อื่นการดัดแปลงของแอนติ - cd134 แอนติบอดีความการเปลี่ยนแปลงของเดิม
glycosylation รูปแบบของแอนติบอดี คำว่า " การเปลี่ยนแปลง " หมายถึงการลบหนึ่ง
หรือมากกว่าคาร์โบไฮเดรตมอยอิตี้พบแอนติบอดี และ / หรือเพิ่มหนึ่งค็อคมากขึ้น
glycosylation เว็บไซต์ที่ไม่ได้อยู่ในแอนติบอดี แอนติบอดี
20 glycosylation ความปกติ n-linked .