Direct and macroscopic examinations

Direct and macroscopic examinations of the
semen confirmed hematospermia. We extracted RNA using
the NucliSENS easyMAG system (bioMérieux, Marcy
l’Etoile, France) from 200 μL of blood and from 500 μL
of semen and urine; both were eluted by 50 μL of elution
buffer. We used 5 μL of RNA extracted for amplification.
We tested blood and semen RNA extracts using real-time
reverse transcription PCR (rRT-PCR) as described using
2 primers/probe amplification sets specific for ZIKV (3).
The rRT-PCR results were positive for ZIKV in semen
and negative in blood, and confirmed by sequencing of
the genomic position 858–1138 encompassing the prM/E
protein coding regions of ZIKV. The generated sequence
(GenBank accession no. KM014700) was identical to those
previously reported at the beginning of the ZIKV outbreak
(3). Three days later, we collected a urine sample, then a
second set of blood and semen samples. Semen and urine
from this second collection were not found to contain traces
of blood by both direct and macroscopic examinations.
rRT-PCR detected ZIKV RNA in the semen and urine, but
not in the blood sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สอบตรง และด้วยตาเปล่าของน้ำเชื้อยืนยัน hematospermia เราสกัด RNA โดยใช้ระบบ easyMAG NucliSENS (bioMérieux มาร์ซี่l'Etoile ฝรั่งเศส) จาก 200 μL เลือด และ 500 μLของน้ำเชื้อและปัสสาวะ ทั้งสองถูก eluted โดย μL 50 ของชะบัฟเฟอร์ เราใช้ μL 5 ของ RNA ที่สกัดสำหรับขยายเราทดสอบเลือด และน้ำอสุจิ RNA แยกใช้แบบเรียลไทม์กลับถอด PCR (rRT-PCR) ตามที่อธิบายไว้โดยใช้ขยายไพรเมอร์/สอบสวน 2 ชุดเฉพาะสำหรับ ZIKV (3)ผล rRT PCR ได้บวกสำหรับ ZIKV ในน้ำเชื้อและเชิงลบในเลือด และยืนยัน โดยลำดับของ858-1138 ออกตำแหน่งครอบคลุม prM/Eโปรตีนเข้ารหัสภูมิภาคของ ZIKV ลำดับที่สร้างขึ้น(GenBank ทะเบียนไม่ KM014700) ก็เหมือนกับรายงานที่เริ่มต้นของการระบาด ZIKV(3) สามวันต่อมา เรารวบรวมตัวอย่างปัสสาวะ แล้วมีชุดที่สองของตัวอย่างเลือดและน้ำอสุจิ น้ำเชื้อและปัสสาวะจากชุดที่สองนี้ไม่พบว่าประกอบด้วยร่องรอยของเลือดโดยการตรวจทั้งโดยตรง และด้วยตาเปล่าrRT PCR ตรวจพบ ZIKV RNA ในน้ำเชื้อและปัสสาวะ แต่ไม่ได้อยู่ในเลือด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสอบตรงและมหภาคของ
hematospermia น้ำอสุจิได้รับการยืนยัน เราสกัด RNA ใช้
ระบบ NucliSENS easyMAG (bioM? rieux ร์ซี่
l'Etoile, ฝรั่งเศส) 200 ไมโครลิตรของเลือดและจาก 500 ไมโครลิตร
ของน้ำอสุจิและปัสสาวะ; ทั้งสองถูกชะลง 50 ไมโครลิตรของชะ
บัฟเฟอร์ เราใช้ 5 ไมโครลิตรของ RNA สกัดสำหรับการขยาย
เราได้ทดสอบเลือดและน้ำอสุจิสารสกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้เวลาจริง
ถอดรหัสแบบย้อนกลับ PCR (RRT-PCR) ตามที่อธิบายโดยใช้
2 ไพรเมอร์ / สอบสวนขยายชุดที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ZIKV (3)
ผล RRT-PCR เป็นบวกสำหรับ ZIKV ในน้ำอสุจิ
และลบในเลือดและได้รับการยืนยันโดยลำดับของ
ตำแหน่งจีโนม 858-1138 ครอบคลุม PRM / E
โปรตีนเข้ารหัสภูมิภาคของ ZIKV ลำดับที่สร้าง
(GenBank ภาคยานุวัติไม่มี. KM014700) เป็นเหมือนกันกับที่
รายงานก่อนหน้านี้ที่จุดเริ่มต้นของการระบาด ZIKV ที่
(3) สามวันต่อมาเราเก็บตัวอย่างปัสสาวะแล้ว
ชุดที่สองของเลือดและน้ำอสุจิตัวอย่าง น้ำอสุจิและปัสสาวะ
จากคอลเลกชันที่สองนี้ไม่ได้ถูกพบว่ามีร่องรอย
ของเลือดจากทั้งสอบตรงและมหภาค
RRT-PCR ตรวจพบ ZIKV RNA ในน้ำอสุจิและปัสสาวะ แต่
ไม่ได้อยู่ในตัวอย่างเลือด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยตรง และมีการสอบของน้ำเชื้อยืนยัน hematospermia . เราได้สกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้การ nuclisens easymag ระบบ ( biom é rieux มาร์ซี่l'etoile , ฝรั่งเศส ) จาก 200 μลิตรของเลือดและจาก 500 μ lน้ำเชื้อและปัสสาวะ ทั้งยังμลิตร ( 50 ตัวอย่างโดยบัฟเฟอร์ เราใช้ 5 μ L ของอาร์เอ็นเอที่ขยาย .เราทดสอบเลือดและสารสกัด RNA โดยใช้น้ำเชื้อแบบเรียลไทม์ย้อนกลับถอดความ PCR ( RRT PCR ) ตามที่อธิบายไว้ใช้2 ไพรเมอร์ / สอบสวนขยายชุดเฉพาะสำหรับ zikv ( 3 )ผลตรวจเป็นบวก สำหรับ zikv RRT ในน้ำอสุจิและลบในเลือด และได้รับการยืนยันโดยการจัดลำดับของตำแหน่งที่พบ 858 –ให้ครอบคลุม PRM / อีรหัสภูมิภาคของโปรตีน zikv . สร้างลำดับ( ขนาดหนังสือไม่ km014700 ) คือเหมือนที่รายงานว่า ก่อนหน้านี้ที่จุดเริ่มต้นของ zikv ระบาด( 3 ) 3 วันต่อมา เราได้เก็บตัวอย่างปัสสาวะแล้วชุดที่สองของเลือดและตัวอย่างอสุจิ น้ำเชื้อ และปัสสาวะจากคอลเลกชันที่สองนี้ไม่พบว่ามีร่องรอยของเลือด ทั้งโดยทางตรงและมีการสอบRRT PCR ตรวจพบ RNA ในน้ำอสุจิและ zikv ปัสสาวะ แต่ในตัวอย่างเลือด