AbstractDNA methylation is a key ep

Abstract
DNA methylation is a key epigenetic mechanism
Procedure Overview
MS-HRM analysis offers a simple method for quickly analyzing the methylation status of specific genetic loci. Reaction products that merit further analysis can then be sequenced directly to identify precise methylation patterns. Genomic DNA is treated with bisulfite to convert unmethylated cytosines to uracil,
then PCR primers are designed to amplify the region of interest, and the melting profiles of PCR products from the sample DNA are compared to those from fully methylated and unmethylated reference samples. PCR primers and amplicons are designed to provide the level of sensitivity required for the biological question of interest. Samples that are found to warrant further study are sequenced to identify precise methylation patterns. Applied Biosystems provides an integrated set of tools for locus-specific DNA methylation analysis using this optimized, streamlined procedure. The procedure is described in a general way in this application note. For detailed instructions, see the High Resolution Melting Getting Started Guide (P/N 4393102) and the BigDye® Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit Protocol (P/N 4337036).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อโรคเป็นกลไก epigenetic คีย์ภาพรวมกระบวนงานMS-HRM วิเคราะห์ด้วยวิธีการง่าย ๆ สำหรับการวิเคราะห์สถานะอัณฑะของตำแหน่งอ่อนแอทางพันธุกรรมที่เฉพาะเจาะจงได้อย่างรวดเร็ว ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาที่บุญเพิ่มเติมวิเคราะห์แล้วสามารถจะเรียงลำดับโดยตรงเพื่อระบุรูปแบบโรคแม่นยำ ออกดีเอ็นเอคือรักษา ด้วยไบซัลไฟต์การแปลง unmethylated cytosines ไป uracilแล้ว PCR ไพรเมอร์ออกแบบมาขยายพื้นที่ของดอกเบี้ย และโพรไฟล์การละลายผลิตภัณฑ์ PCR จากดีเอ็นเอตัวอย่างจะเปรียบเทียบจากตัวอย่างอ้างอิง methylated เต็ม และ unmethylated ไพรเมอร์ PCR และ amplicons ถูกออกแบบมาเพื่อให้ระดับความไวที่จำเป็นสำหรับคำถามทางชีวภาพที่น่าสนใจ ตัวอย่างที่พบจะรับประกันการศึกษาเพิ่มเติมมีการเรียงลำดับเพื่อระบุรูปแบบแม่นยำอัณฑะ ศาสตร์เชิงชีวภาพประยุกต์ให้เป็นชุดรวมเครื่องมือสำหรับวิเคราะห์อัณฑะทีเฉพาะดีเอ็นเอโดยใช้ขั้นตอนนี้ดีที่สุด มีประสิทธิภาพ ขั้นตอนอธิบายไว้ในวิธีทั่วไปในเอกสารนี้ สำหรับรายละเอียด ดูสูงความละเอียดละลายคู่มือเริ่มต้น (P/N 4393102) และ v1.1 เทอร์มิเนเตอร์® BigDye Kit วงจรจัดลำดับโพรโทคอล (P/N 4337036)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
methylation ดีเอ็นเอเป็นกลไก epigenetic ที่สำคัญ
ขั้นตอนรายละเอียด
การวิเคราะห์ MS-HRM มีวิธีการที่ง่ายได้อย่างรวดเร็วสำหรับการวิเคราะห์สถานะ methylation ของตำแหน่งทางพันธุกรรมที่เฉพาะเจาะจง ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาที่ควรได้รับการวิเคราะห์ต่อไปนั้นจะสามารถติดใจโดยตรงกับการระบุรูปแบบ methylation แม่นยำ ดีเอ็นเอรับการรักษาด้วยการแปลง bisulfite cytosines unmethylated เพื่อ uracil,
แล้วไพรเมอร์ PCR ถูกออกแบบมาเพื่อขยายพื้นที่ที่สนใจและโปรไฟล์การละลายของผลิตภัณฑ์ PCR จากตัวอย่างดีเอ็นเอจะถูกเมื่อเทียบกับผู้ที่มาจากกลุ่มตัวอย่างอ้างอิงอย่างเต็มที่แอลกอฮอล์และ unmethylated ไพรเมอร์และ PCR amplicons ได้รับการออกแบบเพื่อให้ระดับของความไวที่จำเป็นสำหรับคำถามทางชีวภาพที่น่าสนใจ ตัวอย่างที่พบจะรับประกันการศึกษาต่อไปจะติดใจในการระบุรูปแบบ methylation แม่นยำ Applied Biosystems ให้ชุดบูรณาการของเครื่องมือสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ methylation สถานทีที่เฉพาะเจาะจงใช้นี้การเพิ่มประสิทธิภาพขั้นตอนที่มีความคล่องตัว ขั้นตอนที่อธิบายไว้ในลักษณะทั่วไปในหมายเหตุโปรแกรมนี้ สำหรับรายละเอียดโปรดดูที่ความละเอียดสูงจุดหลอมเหลวคู่มือการเริ่มต้น (P / N 4393102) และBigDye® Terminator v1.1 วงจรลำดับ Kit Protocol (P / N 4337036)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทคัดย่อดีเอ็นเอเมทิลเลชั่น เป็นกลไกสำคัญ Epigeneticภาพรวมของกระบวนการการวิเคราะห์ ms-hrm เสนอวิธีการที่ง่ายสำหรับได้อย่างรวดเร็ววิเคราะห์จากสภาพทางพันธุกรรมที่เฉพาะเจาะจง . ปฏิกิริยาของผลิตภัณฑ์ที่สามารถทำการวิเคราะห์ต่อไป บุญกุศลนั้นโดยตรง เพื่อระบุรูปแบบจากที่ชัดเจน ดีเอ็นเอคือการรักษาด้วยการแปลง unmethylated cytosines กับยูราซิลไบ ,แล้ววิธี PCR ไพรเมอร์ถูกออกแบบมาเพื่อขยายขอบเขตของความสนใจและละลายโปรไฟล์ของผลิตภัณฑ์ PCR จากตัวอย่างดีเอ็นเอเทียบกับจากเต็ม methylated และตัวอย่างอ้างอิง unmethylated . โดยวิธี PCR และ amplicons ออกแบบเพื่อให้ระดับของความไว เป็นคำถามทางชีวภาพที่น่าสนใจ ตัวอย่างที่พบ ที่จะให้มีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อระบุรูปแบบจากลำดับชัดเจน APPLIED BIOSYSTEMS มีชุดรวมของเครื่องมือสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ methylation โดยใช้เฉพาะด้านเพิ่มประสิทธิภาพขั้นตอนนี้มีประสิทธิภาพ ขั้นตอนที่อธิบายไว้ในวิธีการทั่วไปในโปรแกรมนี้ หมายเหตุ สำหรับคำแนะนำรายละเอียดดูความละเอียดสูงละลายคู่มือเริ่มต้น ( P / N 4393102 ) และ bigdye v1.1 ® Terminator รอบลำดับโปรโตคอลชุด ( P / N 4337036 )