The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,

The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (Sigma Chemical Co., USA) was dissolved in saline to make a 5 mg/mL stock solution. Cancer cells (3 × 103 cells) suspended in 100 μg/wells of MEM

medium containing 10% fetal calf serum (FCS, Gibco BRL, Life Technologies, NY, USA)

were seeded onto a 96-well culture plate (Costar, Corning Incorporated, NY 14831, USA).

After 24 h pre-incubation at 37 °C in a humidified atmosphere of 5% CO2/95% air to allow

cellular attachment, various concentrations of test solution (10 μL/well) were added and

these were then incubated for 48 h under the above conditions. At the end of the incubation,

10 μL of tetrazolium reagent was added into each well followed by further incubation at

37 °C for 4 h. The supernatant was decanted, and DMSO (100 μL/well) was added to allow

Formosan solubilization. The optical density (OD) of each well was detected using a

microplate reader at 550 nm and for correction at 595 nm. Each determination represented

the average mean of six replicates. The 50% inhibition concentration (IC50 value) was

determined by curve fitting.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โบรไมด์ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium (ซิกเคมี Co. สหรัฐอเมริกา) ที่ละลายในน้ำเกลือจะทำให้โซลูชันหุ้น 5 mg/mL เซลล์มะเร็ง (3 × 103 เซลล์) ชั่วคราวใน μg 100 บ่อของหน่วยความจำ สื่อที่ประกอบด้วย 10% ลูกครรภ์เซรั่ม (FCS, Gibco BRL เทคโนโลยีชีวิต NY, USA) มี seeded วัฒนธรรมดี 96 ใส่จาน (Costar คอร์นทำ Incorporated, NY 14831 สหรัฐอเมริกา) หลังจาก 24 ชมก่อนบ่มที่ 37 ° C ในบรรยากาศ humidified อากาศ CO2/95% 5% ให้ โทรศัพท์มือถือแนบ ความเข้มข้นต่าง ๆ ของการทดสอบ (10 μL/ดี) ถูกเพิ่มเข้ามา และ นอกจากนี้เหล่านี้แล้วก็ incubated สำหรับ h 48 ภายใต้เงื่อนไขข้างต้น ที่สุดของคณะทันตแพทยศาสตร์ ΜL 10 ของรีเอเจนต์ tetrazolium ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีตาม ด้วยการบ่มที่ 37 ° C สำหรับ 4 h Supernatant ถูก decanted และ DMSO (100 μL/ดี) ถูกเพิ่มเข้ามาให้ Solubilization ฟอร์ม่อซาน ความหนาแน่นออปติคอล (OD) ของแต่ละดีพบใช้เป็น microplate reader ที่ 550 nm และ สำหรับการแก้ไขที่ 595 nm แต่ละเรื่องที่แสดง หมายถึงค่าเฉลี่ยของ 6 เหมือนกับ มีความเข้มข้นยับยั้งการ 50% (IC50 ค่า) กำหนด โดยเส้นโค้งกระชับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5-diphenyl-tetrazolium โบรไมด์ (ซิกม่า Chemical Co. , สหรัฐอเมริกา) ถูกละลายในน้ำเกลือที่จะทำให้ 5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรวิธีการแก้ปัญหาสต็อก เซลล์มะเร็ง (3 × 103 เซลล์) ที่ลอยอยู่ใน 100 ไมโครกรัม / หลุมของ MEM ขนาดกลางที่มี 10% ซีรั่มน่องทารกในครรภ์ (FCS, Gibco BRL เทคโนโลยีชีวิต, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) เมล็ดลงบนแผ่นวัฒนธรรม 96 หลุม (ดารา, Corning Incorporated , NY 14831, USA). หลังจาก 24 ชั่วโมงก่อนการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศที่ความชื้นของ CO2 5% / 95% อากาศเพื่อช่วยให้สิ่งที่แนบโทรศัพท์มือถือความเข้มข้นต่างๆของการแก้ปัญหาการทดสอบ(10 ไมโครลิตร / ดี) ได้รับการเพิ่มและเหล่านี้บ่มแล้วเป็นเวลา 48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขดังกล่าวข้างต้น ในตอนท้ายของการบ่มที่10 ไมโครลิตรของสาร tetrazolium ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตามอย่างดีจากการบ่มเพิ่มเติมได้ที่37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง สารละลายถูก decanted และ DMSO (100 ไมโครลิตร / ดี) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้การละลายFormosan ความหนาแน่นของแสง (OD) ของดีแต่ละคนถูกตรวจพบโดยใช้ผู้อ่านmicroplate ที่ 550 นาโนเมตรและสำหรับการแก้ไขที่ 595 นาโนเมตร ความมุ่งมั่นของแต่ละคนเป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยหกซ้ำ ความเข้มข้นของการยับยั้ง 50% (ค่า IC50) ถูกกำหนดโดยการปรับเส้นโค้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2,5-diphenyl-tetrazolium โบรไมด์ ( Sigma Chemical Co . , USA ) ละลายในน้ำเกลือให้ 5 รึเปล่ามก. / มล. และหุ้นโซลูชั่น เซลล์มะเร็ง ( 3  ×  103 เซลล์แขวนลอยใน 100  μกรัม / หลุม ของแหม่ม

อาหารที่มีซีรัมลูกโค ( fetal 10% FCS gibco BRL , เทคโนโลยี , ชีวิต , NY , USA )

มีเมล็ดลงบนจาน 96 ดีวัฒนธรรม ( COSTAR , Corning Incorporated , นิวยอร์ก 14831 , USA )

หลังจาก 24 ไหม H ก่อนบ่มที่ 37 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศ ° humidified 5% CO2 / 95 % เครื่องให้

มือถือแนบมาทดสอบสารละลายความเข้มข้นต่างๆ ( 10  μลิตร ) เพิ่ม

เหล่านี้แล้วบ่ม 48 ไหม H ภายใต้เงื่อนไขข้างต้น ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา μ

10 ลิตร tetrazolium รีเอเจนต์ถูกเพิ่มลงในแต่ละหลุม ตามด้วยเพิ่มเติมบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4

 °รึเปล่า .และน่าน คือ ริน และ DMSO ( 100  μลิตร ) เพิ่มให้

formosan ขณะ ความหนาแน่นของแสง ( OD ) ของแต่ละคนก็ถูกตรวจพบใช้

อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยที่ 550 ไหม nm และแก้ไขที่ 595 รึเปล่า nm . แต่ละการกำหนดแสดง

ค่าเฉลี่ยของ 6 ได้แก่ สารความเข้มข้น 50% ( ic50 มั้ยค่า

) ถูกกำหนดโดยการปรับเส้นโค้ง