The cells from both flasks were harvested by centrifugation
(10,000 × g, 8 min) and resuspended in 0.1 M potassium
phosphate buffer (pH 7.0). The cell suspension was sonicated
(60–70 W, 10 min by Bendeline Electronic). The crude cell
extract was collected after removal of cell debris from the
disrupted cell suspension by centrifugation at 10,000 × g at
4 ◦C for 8 min. Azoreductase activity was determined based
on the procedure describe by Zimmermann et al. [23]. In
general 0.5 ml of cell free extract (typically at a concentration
of 120 mg protein/ml) was added to 0.1 M phosphate
buffer (pH 7.0) containing 15 mg/l mixed dye and 1 mg/l of
NADH, the total volume of reaction mixture was 6.5 ml.
Amine degradation by azoreductase was monitored by the
replacing the dye with aniline (20 mg/l).
2.3. Simulated waste water preparation
Synthetic wastewater was prepared using a mixture of
eight dyes as mentioned in Table 1 to produce a stock solution
of 5600 mg/l (700 mg/l of each dye). The stock solution
was supplemented with basal salt medium to obtain a
final concentration of 56 mg/l. The basal salt medium along
with dye mixture was inoculated with microbial consortia.
Aerobic bacterial cultures were obtained from a variety of
sources including sewage, paper mill and tannery wastewater
treating plants. The most efficient bacteria are mixed
together to form consortia [22].
2.4. Analytical methods
Culture broth was withdrawn at intervals, centrifuged and
the UV-Vis spectrum of the dyes analyzed using a Shimadzu
UV spectrophotometer (160 A) for decolorization.
The biodegradation of dyes was monitored by COD reduction
during experimentation by Standard Methods [24]. The
reduction in initial BOD, ammonia, nitrate and nitrite contents
were also monitored [24].
2.5. Laboratory reactors
A laboratory scale microaerophilic–aerobic system
consisted of two reactors R1 and R2. Reactor R1 (microaerophilic
reactor) is a down flow fixed bed reactor
which has open ports and a reactor R2 (aerobic reactor) is
a down flow fixed bed reactor with the aeration facilities
from the bottom. The dimensional details of the reactors
are given in Table 2. Microorganisms were immobilized on
เซลล์ที่ได้จากขวดทั้งสองถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง
(10,000 ×กรัม, 8 นาที) และ resuspended ใน 0.1 M
โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.0) เซลล์แขวนลอยที่ถูก sonicated
(60-70 W, 10 นาทีโดย Bendeline อิเล็กทรอนิกส์) เซลล์น้ำมันดิบสารสกัดที่ถูกเก็บรวบรวมหลังจากการกำจัดเศษเซลล์จากเซลล์แขวนลอยหยุดชะงักโดยการหมุนเหวี่ยงที่10,000 ×กรัมที่4 ◦Cเป็นเวลา 8 นาที กิจกรรม Azoreductase ถูกกำหนดขึ้นอยู่กับขั้นตอนอธิบายโดยซิมเมอet al, [23] ในทั่วไป 0.5 มล. ของสารสกัดจากโทรศัพท์มือถือฟรี (ปกติที่ความเข้มข้น 120 มิลลิกรัมโปรตีน / ml) ถูกบันทึกอยู่ใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ที่มี 15 mg / l สีย้อมผสมและ 1 มิลลิกรัม / ลิตรของ NADH, ปริมาณรวมของ ผสมปฏิกิริยา 6.5 มล. การย่อยสลายโดย Amine azoreductase ได้รับการตรวจสอบโดยการเปลี่ยนสีย้อมที่มีสวรรค์(20 mg / l). 2.3 การเตรียมการจำลองน้ำเสียสังเคราะห์น้ำเสียถูกจัดทำขึ้นโดยใช้ส่วนผสมของแปดสีตามที่ระบุไว้ในตารางที่1 การผลิตวิธีการแก้ปัญหาสต็อกของ5600 mg / l (700 mg / l ของแต่ละสีย้อม) วิธีการแก้ปัญหาหุ้นได้รับการเสริมด้วยสื่อเกลือฐานเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายของ56 มิลลิกรัม / ลิตร กลางเกลือฐานพร้อมด้วยส่วนผสมที่ถูกย้อมเชื้อด้วยจุลินทรีย์ไพรี. วัฒนธรรมแบคทีเรียแอโรบิกที่ได้รับจากความหลากหลายของแหล่งรวมทั้งน้ำเสียโรงงานกระดาษและน้ำเสียโรงฟอกหนังรักษาพืช แบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดจะมีการผสมกันในรูปแบบไพรี [22]. 2.4 วิธีการวิเคราะห์น้ำซุปวัฒนธรรมถูกถอนออกในช่วงเวลา, ปั่นและคลื่นUV-Vis ของสีย้อมวิเคราะห์โดยใช้ Shimadzu spectrophotometer UV (160 A) ลดสี. การย่อยสลายของสีย้อมได้รับการตรวจสอบโดยการลดซีโอดีในระหว่างการทดลองโดยวิธีมาตรฐาน [24] ลดลงในการประชุมคณะกรรมการ บริษัท ครั้งแรกแอมโมเนียไนเตรทไนไตรท์และเนื้อหาที่ได้รับการตรวจสอบยัง[24]. 2.5 เครื่องปฏิกรณ์ห้องปฏิบัติการเครื่องชั่งในห้องปฏิบัติการระบบmicroaerophilic-แอโรบิกประกอบด้วยสองเครื่องปฏิกรณ์R1 และ R2 เครื่องปฏิกรณ์ R1 (microaerophilic เครื่องปฏิกรณ์) เป็นไหลลงเครื่องปฏิกรณ์คงที่ซึ่งมีการเปิดพอร์ตและเครื่องปฏิกรณ์R2 (เครื่องปฏิกรณ์แอโรบิก) เป็นเครื่องปฏิกรณ์เตียงไหลลงคงมีสิ่งอำนวยความสะดวกให้อากาศจากด้านล่าง โดยมีรายละเอียดมิติของเครื่องปฏิกรณ์จะได้รับในตารางที่ 2 จุลินทรีย์ถูกตรึงบน
การแปล กรุณารอสักครู่..
