Loci Pse101
(AF284819), Pse343 (AF284820), PseG42 (AF284818) and
PseC48 (AF284821) were amplified from total genomic
DNA in 10 µL reactions that included 10 ng template
DNA, 0.3 µm forward and reverse primer, 0.2 mm each
dNTP, 2 mm MgCl2, 50 mm KCl, 10 mm Tris-HCl (pH 9.0),
0.1% Triton X-100, and 1 unit of Taq DNA polymerase
(Promega). The forward primer was labelled with one of
the fluorescent phosphoramidite dyes: 6-FAM (PseC48,
Pse101), HEX (PseG42, Pse343) or TET (Pse101). Primers
were purchased from Bio-Synthesis and Operon Technologies.
Data for fluorescent loci were scored using
genotyper software version 2.1 (Applied Biosystems).
Two different labels, 6-FAM and TET, were used with
Pse101, and DNA from 24 individuals was run with both
labels to ensure scoring consistency between the labels. In addition, PseC48 was run with two different molecular
weight markers [GeneScan 350 labelled with either ROX
or TAMRA (Applied Biosystems)], and again the analysis
for 24 individuals was repeated to ensure consistency
Loci Pse101(AF284819), Pse343 (AF284820), PseG42 (AF284818) และPseC48 (AF284821) ได้ขยายจาก genomic รวมดีเอ็นเอในปฏิกิริยา µL 10 ที่ 10 แม่ ngดีเอ็นเอ 0.3 µm ไปข้างหน้า และย้อนกลับพื้น 0.2 มม.dNTP, 2 มม. MgCl2, 50 mm KCl, 10 มม.ตรี-HCl (pH 9.0),0.1% ไตรตั้น X 100 และ Taq DNA พอลิเมอเรส 1 หน่วย(Promega) รองพื้นไปข้างหน้าไม่มัน ด้วยของสีเรืองแสง phosphoramidite: 6-FAM (PseC48Pse101), ฐานสิบหก (PseG42, Pse343) หรือ TET (Pse101) ไพรเมอร์ซื้อได้จากการสังเคราะห์ทางชีวภาพและเทคโนโลยี Operonข้อมูลสำหรับ loci ที่เรืองแสงได้คะแนนใช้genotyper ซอฟต์แวร์เวอร์ชัน 2.1 (Biosystems ใช้)สองป้ายต่าง ๆ 6 FAM และ TET ใช้กับรัน มีทั้ง Pse101 และดีเอ็นเอจาก 24 คนป้ายให้คะแนนความสอดคล้องระหว่างป้ายชื่อ รัน PseC48 กับสองแตกต่างกันโมเลกุลน้ำหนักเครื่องหมาย [350 GeneScan มัน มี ROX อย่างใดอย่างหนึ่งหรือ TAMRA (Biosystems ใช้)], และวิเคราะห์อีกครั้งสำหรับ 24 ถูกทำซ้ำเพื่อให้แน่ใจ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตำแหน่ง pse101
( af284819 ) pse343 ( af284820 ) pseg42 ( af284818 )
psec48 ( af284821 ) กำลังขยายจากดีเอ็นเอในจีโนมทั้งหมด 10 µ L
ปฏิกิริยารวม 10 นาโนดีเอ็นเอแม่แบบ
, M 0.3 µไปข้างหน้าและย้อนกลับ ไพรเมอร์ 0.2 มม. แต่ละ
dntp 2 มม. ชุด 50 mM KCl , กรดเกลือหรือ 10 มม. ( พีเอช 9.0 )
0.1% Triton X-100 และ 1 หน่วยของทัค DNA polymerase
( promega ) รองพื้นไปข้างหน้าคือ labelled กับหนึ่ง
สี phosphoramidite เรืองแสง : 6-fam ( psec48
, pse101 ) , Hex ( pseg42 pse343 เทต ( , ) หรือ pse101 ) ไพรเมอร์
ซื้อมาจากการสังเคราะห์ทางชีวภาพและโอเปอรอนเทคโนโลยี .
ข้อมูลคะแนนของเรืองแสงใช้
genotyper ซอฟต์แวร์รุ่น 2.1 ( Applied Biosystems )
2 ป้ายต่าง ๆและใช้กับเครื่อง 6-fam ,
pse101 และดีเอ็นเอจาก 24 บุคคลที่ใช้กับทั้ง
ป้ายให้คะแนน ความสอดคล้องระหว่างป้าย นอกจากนี้ psec48 ใช้กับสองแตกต่างกัน โมเลกุลเครื่องหมาย [ genescan
น้ำหนัก 350 labelled กับ Rox
หรือตำรา ( Applied Biosystems ) ] , และอีกครั้งที่การวิเคราะห์
24 บุคคลทำซ้ำเพื่อให้สอดคล้อง
การแปล กรุณารอสักครู่..
