yield 1  106 spores ml1. In a pre

yield 1  106 spores ml1. In a preliminary study, 1  106 spores
ml1 of each test fungus was determined to be the optimal inoculum
in the XTT assay (Clausen and Yang, 2011).
For both ASTM and AWPA standardized tests, spores from
individual test fungi were collected in 10 ml of sterile deionized
water (DI) according to ASTM standard D4445-10 (AmericanWood
Protection Association Standards, 2010). Spores were counted and
equal numbers of spores for each test organism were transferred to
a spray bottle. The spore mixture was diluted with DI water to yield
approximately 3  107 spores ml1. The spray bottle was adjusted
to deliver 1 ml inoculum per spray and was shaken frequently
during inoculation to ensure a homogeneous inoculum.
2.3. Wood specimen preparation
Southern pine sapwood specimens either 7  20 mm cross
section  7 cm long or 75 100mm 12.5mmthick were cut from
kiln-dried lumber and conditioned at 27 C and 70% relative
humidity (RH). Typically, mould testing involves dip-treating
unseasoned wood, but to mimic methods for using isothiazolinone
in wood preservatives, vacuum treatment of kilndried
wood was used in this study. Ten random replicates of each
size specimen were vacuum-treated for 40 min at 172 kPa
submerged in each concentration of isothiazolinone test solution.
Treated specimens were air-dried for 1 week prior to conditioning
at 27 C and 70% RH for 21 days.
2.4. XTT assay
For each mould isolate, 1  106 spores were pre-incubated in
RPMI at 27 C for 24 h. In a sterile flat-bottom polystyrene microplate,
80 ml of RPMI and 80 ml of saline were added to each well.
Eighty ml of 2-fold dilutions of isothiazolinone ranging from (0e
800 ppm) were prepared in sterile RPMI and added to each well
(n ¼ 10) with appropriate positive and negative control wells. The
plate was sealed and incubated for 24 h at 37 C. Following exposure
to isothiazolinone, 80 ml XTT-menadione reagent was added to
all wells of the plate which was then wrapped in foil and incubated
for 3 h at 37 C. Absorbance was read with a PowerWave XS 2
microplate reader (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT) at
490 nm.
2.5. ASTM D4445-10
Treated wood specimens (7  20 mm  7 cm) (n ¼ 10) were
placed on top of a polyethylene mesh spacer in Petri dishes
(150  25 mm) (B-D Falcon, Los Angeles, CA) containing 4 layers of
blotting paper that was saturated with 30 ml DI water. Specimens
were sprayed with 1 ml of mixed mould spore inocula, sealed in
polyethylene bags to retain 100% RH, and incubated at 27 C and
70% RH. Individual specimens were visually evaluated for mould
growth after 4, 8, and 12 weeks of incubation on a scale of 0e5 with
0 indicating no mould growth and 5 indicating heavy mould
growth on all sides of the specimen.
2.6. AWPA E24
Environmental chambers fabricated according to standard
method AWPA E24 specifications were used to suspend treated
wood specimens (75  100 mm  12.5 mm) (n ¼ 10) over nonsterile
soil pre-inoculated with spores from the three test fungi.
The test chambers were placed in a conditioning room at 27 C.
Treated specimens were vertically suspended across the width of
the chamber over inoculated soil and sprayed with spores of the
test fungi. Individual specimens were rated for mould growth on

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลผลิต 1 106 เพาะเฟิร์น ml 1 ในการศึกษาเบื้องต้น เพาะเฟิร์น 1 106ml 1 ของเห็ดราแต่ละการทดสอบกำหนดให้ inoculum เหมาะสมที่สุดในทดสอบ XTT (Clausen และยาง 2011)เพาะเฟิร์นสำหรับ ASTM และ AWPA มาตรฐานทดสอบ จากเชื้อราทดสอบต่าง ๆ ถูกเก็บรวบรวมใน 10 ml ของกอซ deionizedน้ำ (DI) ตามมาตรฐาน ASTM มาตรฐาน D4445-10 (AmericanWoodป้องกันสมาคมมาตรฐาน 2010) นับได้เพาะเฟิร์น และจำนวนเพาะเฟิร์นสำหรับสิ่งมีชีวิตแต่ละทดสอบเท่าถูกโอนย้ายไปขวดสเปรย์ สปอร์ผสมได้ผสมกับน้ำ DI ให้ประมาณเพาะเฟิร์น 3 107 มล. 1 ขวดสเปรย์ถูกปรับปรุงส่ง inoculum 1 ml ต่อสเปรย์ และเขย่าบ่อย ๆระหว่าง inoculation ให้ inoculum เหมือน2.3. เตรียมตัวอย่างที่ไม้สนใต้ sapwood ไว้เป็นตัวอย่างทั้ง 7 ข้าม 20 มม.ส่วน 7 ซ.ม.ยาว หรือ 75 100 มม. 12.5mmthick ถูกตัดจากแห้งเตาเผาไม้ และเครื่องปรับอากาศที่ 27 C และสัมพันธ์ 70%ความชื้น (RH) โดยปกติ การทดสอบแม่พิมพ์เกี่ยวข้องกับการรักษาแช่ไม้ unseasoned แต่การเลียนแบบวิธีการใช้ isothiazolinoneในสารกันบูดไม้ ดูดรักษา kilndriedไม้ที่ใช้ในการศึกษานี้ สิบสุ่มเหมือนกับแต่ละขนาดตัวอย่างดูดรับใน 40 นาทีที่ 172 kPaน้ำท่วมในแต่ละความเข้มข้นของ isothiazolinone ทดสอบบำบัดไว้เป็นตัวอย่างที่ air-dried สำหรับ 1 สัปดาห์ก่อนปรับที่ 27 C และ 70% RH ใน 21 วัน2.4. XTT วิเคราะห์สำหรับแต่ละแม่พิมพ์แยก เพาะเฟิร์น 1 106 ได้ก่อน incubated ในRPMI ที่ 27 C สำหรับ 24 ชม ในการใส่แบนล่างโฟม microplateเพิ่ม 80 ml ของ RPMI และ 80 ml ของน้ำเกลือให้ดีละกัน80 ml ของ dilutions 2-fold ของ isothiazolinone ตั้งแต่ (0e800 ppm) ถูกเตรียมใน RPMI กอซ และเพิ่มให้ด้วยละ(n ¼ 10) กับบ่อควบคุมบวก และลบที่เหมาะสม ที่แผ่นปิดผนึก และ incubated ใน 24 ชมที่ค. 37 ถ่ายภาพต่อไปนี้การ isothiazolinone, 80 ml XTT menadione รีเอเจนต์ถูกเพิ่มเข้าไปบ่อทุกจานที่แล้วห่อฟอยล์ และ incubatedสำหรับ h 3 ที่ 37 C. Absorbance ที่อ่าน PowerWave XS 2microplate reader (เครื่องมือ BioTek, Inc., Winooski, VT) ที่490 nm2.5 การ ASTM D4445-10ถือไม้ไว้เป็นตัวอย่าง (7 มม. 20 ซม. 7) (n ¼ 10) ได้วางด้านบน spacer ในจาน Petri ตาข่ายพลาสติก(150 25 มม.) (B-D เหยี่ยว Los Angeles, CA) ประกอบด้วย 4 ชั้นกระดาษซับที่ไม่อิ่มตัว ด้วยน้ำ 30 ml DI ไว้เป็นตัวอย่างถูกพ่น ด้วย 1 ml ของแม่พิมพ์ผสมสปอร์ inocula ปิดผนึกในเอทิลีนถุงรักษา 100% RH และ incubated ที่ 27 C และ70% RH เห็นมีประเมินไว้เป็นตัวอย่างแต่ละสำหรับแม่พิมพ์หลังสัปดาห์ที่ 4, 8 และ 12 ของคณะทันตแพทยศาสตร์ในระดับของ 0e5 ด้วยแม่พิมพ์ 0 บ่งชี้ว่า ไม่เจริญเติบโตและแสดงแม่พิมพ์หนัก 5เติบโตทุกด้านของการ2.6. AWPA E24สิ่งแวดล้อมหอหลังสร้างตามมาตรฐานวิธี E24 AWPA คุณสมบัติใช้ในการระงับปฏิบัติไม้ไว้เป็นตัวอย่าง (75 มม. 100 มม. 12.5) (n ¼ 10) มากกว่า nonsterileดินก่อน inoculated กับเพาะเฟิร์นจากเชื้อราการทดสอบสามห้องทดสอบไว้ในห้องนี่ซี 27บำบัดไว้เป็นตัวอย่างได้ชั่วคราวตามความกว้างของแนวตั้งหอการค้า inoculated ดิน และฉีดพ่น ด้วยเพาะเฟิร์นของกว่าทดสอบเชื้อรา ไว้เป็นตัวอย่างแต่ละที่คะแนนสำหรับการเติบโตแบบการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลผลิตที่ 1  106 สปอร์มิลลิลิตร  1 ในการศึกษาเบื้องต้น 1  106 สปอร์
ml  1 ของแต่ละการทดสอบเชื้อรา มุ่งมั่นที่จะเป็น
3 ที่ดีที่สุดใน xtt assay ( เคลาเซิ่นหยาง , 2011 ) .
ทั้ง ASTM และมาตรฐานการทดสอบ awpa สปอร์จากเชื้อราทดสอบ
บุคคลเชิง 10 มล. เป็นหมันคล้ายเนื้อเยื่อประสาน
น้ำ ( ดิ ) ตามมาตรฐาน ASTM d4445-10 ( ป้องกัน americanwood
สมาคมมาตรฐาน , 2010 )สปอร์ถูกนับและ
เท่ากับตัวเลขของสปอร์แต่ละทดสอบชีวิตถูก

ขวดสเปรย์ การสร้างสปอร์ผสมเจือจางด้วยน้ำ DI เพื่อผลผลิต
ประมาณ 3  107 สปอร์มิลลิลิตร  1 ขวดสเปรย์ปรับ
ส่ง 1 มิลลิลิตรต่อเชื้อสเปรย์และเปลี่ยนแปลงบ่อย
ในระหว่างการตรวจสอบเชื้อเป็นเนื้อเดียวกัน
2.3 ตัวอย่างการเตรียม
ไม้ใต้ต้นสนกระพี้ตัวอย่างทั้ง 7  20 มม. ส่วน  ข้าม
7 ซม. หรือ 75  100mm  12.5mmthick ถูกตัดออกจากเตาเผาไม้แห้ง และปอ
ที่ 27  C และ 70 % ความชื้นสัมพัทธ์
( Rh ) โดยปกติการทดสอบเกี่ยวข้องกับการแม่พิมพ์จุ่ม
ไม้ไม่ได้ปรุงแต่ง แต่เลียนแบบวิธีการสำหรับใช้ใน isothiazolinone
สารกันบูดไม้ , การรักษาสิวของ kilndried
ไม้ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้แบบสุ่ม 10 ของแต่ละตัวอย่างเป็นสูญญากาศรักษา
ขนาด 40 นาทีที่  172 กิโลปาสคาล
มิดในแต่ละความเข้มข้นของสารละลายทดสอบ isothiazolinone .
ถือว่าชิ้นงานให้แห้งเป็นเวลา 1 สัปดาห์ก่อนจะปรับ 
ที่ 27 องศาเซลเซียส และความชื้นสัมพัทธ์ 70% เป็นเวลา 21 วัน
2.4 . xtt assay
แต่ละแม่พิมพ์แยก 1  106 สปอร์อยู่ก่อน )
 RPMI ที่ 27 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในงานด้านล่างแบนพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
80 ml โฟม , RPMI และ 80 ml ของเกลือเพิ่มกัน .
ml 80 ถึงวิธีการ isothiazolinone ตั้งแต่ ( เครื่อง
800 ppm ) เตรียมใน RPMI ที่เป็นหมันและเพิ่มกัน
( N ¼ 10 ) กับบ่อควบคุมบวกและลบที่เหมาะสม
จานปิดผนึกและบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง  ต่อไปนี้การ isothiazolinone
ให้ ,80 ml xtt menadione สารเคมีเพิ่ม

ทุกบ่อจานซึ่งเป็นห่อฟอยล์และบ่มที่อุณหภูมิ 37 
3 H . การดูดกลืนแสงได้อ่านด้วย powerwave XS 2
( อ่าน biotek เครื่องมือพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยสำหรับ Winooski , VT )
490 nm .
2.5 ASTM d4445-10
ถือว่าชิ้นงานไม้ ( 7  20 มิลลิเมตร  7 ซม. ) ( N ¼ 10 )
วางไว้บนด้านบนของตาข่ายพลาสติก spacer ในจานเพาะเลี้ยง
( 150  25 มม. ) ( b-d ฟอลคอน , Los Angeles , CA ) ที่มี 4 ชั้นของ
กระดาษซับที่อิ่มตัวด้วยน้ำ DI 30 ml . ตัวอย่าง
พ่น 1 มิลลิลิตร ผสม inocula สปอร์รา ปิดผนึกในถุง polyethylene
รักษา 100 เปอร์เซ็นต์ และบ่มที่อุณหภูมิ 27 องศาเซลเซียส และ 
70 เปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างของแต่ละบุคคลมีสายตาประเมินการเจริญเติบโตของรา
หลังจาก 4 , 8 และ 12 สัปดาห์ตามลำดับ ในระดับ 0e5 กับ
0 แสดงว่าไม่มีการระบุการแม่พิมพ์และแม่พิมพ์ 5
หนักทุกด้านของชิ้นงาน
2.6 awpa e24
สิ่งแวดล้อมห้องประดิษฐ์ตามมาตรฐาน
วิธี awpa e24 คุณสมบัติใช้เพื่อระงับการปฏิบัติ
ตัวอย่างไม้ ( 75  100 มม.  12.5 มม. ) ( N ¼ 10 ) เหนือดิน nonsterile
ก่อนใส่สปอร์จากเชื้อรา
ทดสอบ 3 .ห้องทดสอบ ถูกวางอยู่ในห้องปรับอากาศที่ 27  C .
ตัวอย่างถูกดิ่งแขวน ความกว้างของห้องมากกว่า
ดินและฉีดพ่นด้วยเชื้อสปอร์ของเชื้อราทดสอบ
. ตัวอย่างบุคคลที่อยู่ในการเจริญเติบโตบนแม่พิมพ์