2.3. Study of pectinase activity of

2.3. Study of pectinase activity of isolated pathogens Pectinase enzyme producing ability of seven different pathogenic isolates including the selected strain VBAM1, were evaluated with the method of Patil et al. (2010). The fungal strains were inoculated at the center of a pectin agar plate and incubated at 28 C for 72 h. After visual growth of the fungal mycelia, the plates were stained with 1% cetyl trimethyl ammonium bromide (CTAB). A zone of clearance indicated pectolytic activity. For evaluation of quantitative production of pectinase, samples of stock culture were added to 100 ml modified Czapek’s dox broth in 250 ml Erlenmeyer’s flasks containing pectin as the sole carbon source. The broth were incubated at 28 C up to 7 days. Aliquots were taken at 24 h intervals and were centrifuged at 10,000 rpm for 20 min.
1 ml of supernatant from each aliquots was taken and the amount of reducing sugar was measured using 3,5-dinitrosalicylic acid (DNSA) and OD was taken at 540 nm (Miller, 1959 ). The amountsof reducing sugar were calculated us ing standard curve of dextrose. Beside sugar estimation, the protein amounts in the culture medium were also measured by method of Lowry et al. (1951) at every 24 h interval.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การศึกษากิจกรรม pectinase ของแยกต่างหากเอนไซม์ Pectinase โรคสามารถของเจ็ดต่าง ๆ pathogenic แยกรวมถึงสายพันธุ์ที่เลือก VBAM1 การผลิต มีประเมิน ด้วยวิธีการของภา et al. (2010) สายพันธุ์เชื้อราถูก inoculated ของจาน agar เพกทิน และ incubated ที่ 28 C สำหรับ 72 h หลังจากเติบโตภาพ mycelia เชื้อรา แผ่นมีสี ด้วย 1% cetyl trimethyl แอมโมเนียโบรไมด์ (CTAB) โซนของเคลียร์ระบุกิจกรรม pectolytic ประเมินผลผลิตเชิงปริมาณของ pectinase ตัวอย่างของหุ้นได้เพิ่ม modified 100 ml ของ Czapek dox ซุปใน Erlenmeyer 250 มล flasks ที่ประกอบด้วยเพกทินเป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียว ซุปได้ incubated ที่ 28 C ขึ้นไป 7 วัน Aliquots ที่ถ่ายในช่วงเวลา 24 ชม และถูก centrifuged ที่ 10000 rpm สำหรับ 20 นาที1 ml ของ supernatant จากแต่ละ aliquots ถูกนำ และจำนวนลดน้ำตาลถูกวัดโดยใช้กรด 3,5 dinitrosalicylic (DNSA) และ OD ถูกนำที่ 540 nm (มิลเลอร์ 1959) Amountsof น้ำตาลลดลงได้คำนวณเรากำลังโค้งมาตรฐานของขึ้น ข้างน้ำตาลประมาณ จำนวนโปรตีนในวัฒนธรรมการถูกวัด โดยวิธีของ Lowry et al. (1951) ในทุกช่วงเวลา 24 ชม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การศึกษาของกิจกรรมเพคติเนสของเชื้อโรคที่แยกเอนไซม์เพคติเนสผลิตสามารถของสายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรคเจ็ดที่แตกต่างกันรวมทั้งสายพันธุ์ที่เลือก VBAM1 ถูกประเมินด้วยวิธีการพาติลและอัล (2010) สายพันธุ์ของเชื้อราถูกเชื้อที่เป็นศูนย์กลางของจานเลี้ยงเชื้อเพคตินและบ่มที่ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง หลังจากที่การเจริญเติบโตของภาพของเส้นใยเชื้อราแผ่นที่ถูกย้อมด้วยสี 1% แอมโมเนียมโบรไมด์ cetyl trimethyl (CTAB) โซนของการกวาดล้างระบุกิจกรรม pectolytic สำหรับการประเมินผลของการผลิตเชิงปริมาณของเพคติเนตัวอย่างของวัฒนธรรมหุ้นถูกเพิ่มเข้าไปใน 100 มล. Modi สายเอ็ดน้ำซุป Dox Czapek ใน 250 มลชั้น Erlenmeyer ถามที่มีเพคตินเป็นแหล่งคาร์บอน แต่เพียงผู้เดียว น้ำซุปที่ถูกบ่มที่ 28 องศาเซลเซียสถึง 7 วัน aliquots ถูกถ่ายในช่วงเวลา 24 ชั่วโมงและได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที.
1 มิลลิลิตรใสจากแต่ละ aliquots ก็นำและปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์ที่ถูกวัดโดยใช้กรด 3,5-dinitrosalicylic (DNSA) และถูกนำตัว OD ที่ 540 นาโนเมตร (มิลเลอร์, 1959) amountsof ลดน้ำตาลจะถูกคำนวณเราไอเอ็นจีกราฟมาตรฐานของเดกซ์โทรส นอกจากการประมาณค่าน้ำตาลปริมาณโปรตีนในอาหารเลี้ยงเชื้อยังถูกวัดโดยวิธีการของ Lowry et al, (1951) ในทุกช่วงเวลา 24 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การศึกษากิจกรรมของเอนไซม์เอนไซม์เอนไซม์ที่แยกโรคความสามารถในการผลิตของโรคแตกต่างกัน 7 สายพันธุ์ รวมทั้งสายพันธุ์ vbam1 ถูกประเมินด้วยวิธีของปาติล et al . ( 2010 ) สายพันธุ์ของเชื้อราเป็นเชื้อที่ศูนย์ของเพคติน agar plate บ่มที่ 28  C สำหรับ 72 ชั่วโมง หลังการมองเห็นของเส้นใยเชื้อราจานถูกย้อมด้วย 1% ซิทิลไตรแอมโมเนียมโบรไมด์ ( ctab ) โซนของพิธีการ พบกิจกรรม pectolytic . เพื่อประเมินปริมาณการผลิตเอนไซม์เพคติเนส ตัวอย่างของวัฒนธรรมหุ้นถูกเพิ่มไปยัง 100 ml Modi จึงเอ็ดอาหาร Czapek Dox น้ำหมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตรของflถามที่มีเพคติน เป็นแหล่งคาร์บอน ซุปอุณหภูมิ 28  C ถึง 7 วันเฉยๆ ถ่ายในช่วงเวลา 24 ชั่วโมง และระดับที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที
1 มิลลิลิตร นำจากแต่ละเฉยๆ ถ่ายและปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์ การวัด 3,5-dinitrosalicylic acid ( dnsa ) และ OD ถูก 540 nm ( มิลเลอร์ , 1959 ) การ amountsof ลดน้ำตาลได้เราไอเอ็นจีกราฟมาตรฐานของการเชื่อมต่อ . ข้างประมาณน้ำตาลปริมาณโปรตีนในอาหารเพาะเชื้อถูกวัดโดยวิธีของโลว์รีย์ et al . ( 1951 ) ในทุกช่วงเวลา ( 24