Several chemical methods have been

Several chemical methods have been established that induce
bacterial cell transformation. In a classic experiment, Mandel
and Higa (1) demonstrated that treatment of Escherichia coli
with CaCl2 made the cells susceptible to uptake of bacteriophage
DNA. Subsequently, it was shown that this technique
could be used to transform E. coli with bacterial chromosomal
and plasmid DNAs (2, 3). Since these initial studies, a
number of factors have been elucidated that produced an
increase in transformation efficiency. Such factors include
prolonged incubation of bacteria with CaCl2 (4), addition of
multiple cations into the transformation mixture (5) and
treatment of bacteria with dimethyl sulfoxide (DMSO),
hexaminecobalt, and dithiothreitol in the presence of both
monovalent and divalent cations (6). The latter modification
produced yields of >108 transformants per ,ug of DNA.
Polyethylene glycol (PEG) has also been shown to mediate
plasmid DNA uptake by protoplasts of a number of bacterial
strains, but PEG-mediated transformation of E. coli by
pBR322 DNA averaged 106 transformants per ,ug of DNA
(7), a value 2 orders of magnitude lower than that obtainable
by other methods (6).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลายวิธีเคมีก่อที่ก่อให้เกิดการแปลงของเซลล์แบคทีเรีย ในการทดสอบแบบคลาสสิก Mandelและฮิกะ (1) แสดงให้เห็นการรักษาของ Escherichia coliด้วย CaCl2 ทำให้เซลล์ไวต่อการดูดซึมของแบคทีดีเอ็นเอ ต่อมา มันถูกแสดงให้เห็นว่าเทคนิคนี้สามารถใช้ในการแปลง E. coli ด้วยแบคทีเรียของโครโมโซมและ plasmid ดีเอ็นเอ (2, 3) ตั้งแต่การศึกษาเหล่านี้เริ่มต้น การปัจจัยต่าง ๆ มีการอธิบายที่ผลิตมีเพิ่มประสิทธิภาพการแปลง ปัจจัยดังกล่าวได้แก่ระยะเวลาบ่มเชื้อแบคทีเรียกับ CaCl2 (4), เพิ่มหลายตัวในการเปลี่ยนแปลงส่วนผสม (5) และรักษาโรคเชื้อแบคทีเรียกับ dimethyl sulfoxide (DMSO),hexaminecobalt และ dithiothreitol ในทั้งสองmonovalent และ divalent ตัว (6) การปรับเปลี่ยนที่หลังผลิตผลผลิต > 108 transformants ต่อ ยูจีของดีเอ็นเอเอทิลีนไกลคอล (PEG) ได้รับการแสดงเพื่อเป็นสื่อกลางplasmid DNA ดูดซึม โดยพลาสต์จำนวนของแบคทีเรียสายพันธุ์ แต่การแปลงสื่อ PEG ของ E. coli โดยดีเอ็นเอ pBR322 เฉลี่ย 106 transformants ต่อ ยูจีของดีเอ็นเอ(7), มีค่า 2 อันดับของขนาดต่ำกว่าที่หาได้โดยวิธีการอื่น ๆ (6)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการทางเคมีหลายคนได้รับการจัดตั้งขึ้นที่ทำให้เกิด
การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ของแบคทีเรีย ในการทดลองคลาสสิก Mandel
และ Higa (1) แสดงให้เห็นว่าการรักษาเชื้อ Escherichia coli
กับ CaCl2 ทำให้เซลล์ไวต่อการดูดซึมของ bacteriophage
ดีเอ็นเอ ต่อจากนั้นมันก็แสดงให้เห็นว่าเทคนิคนี้
สามารถนำมาใช้ในการแปลง E. coli กับแบคทีเรียโครโมโซม
และพลาสมิดดีเอ็นเอ (2, 3) เนื่องจากการศึกษาเริ่มต้นเหล่านี้มี
จำนวนของปัจจัยที่ได้รับการอธิบายว่าการผลิต
เพิ่มประสิทธิภาพในการเปลี่ยนแปลง ปัจจัยดังกล่าวรวมถึง
การบ่มของเชื้อแบคทีเรียที่มี CaCl2 (4) นอกเหนือจากเวลานาน
ไพเพอร์หลาย ๆ ลงในส่วนผสมการเปลี่ยนแปลง (5) และ
การรักษาของแบคทีเรียกับ dimethyl sulfoxide (DMSO)
hexaminecobalt และ dithiothreitol ในการปรากฏตัวของทั้งสอง
monovalent และ divalent ไพเพอร์ (6 ) การปรับเปลี่ยนหลัง
อัตราผลตอบแทนการผลิตของ> 108 transformants ละ UG ดีเอ็นเอ
polyethylene glycol (PEG) นอกจากนี้ยังได้รับการแสดงที่จะไกล่เกลี่ย
พลาสมิดดีเอ็นเอดูดซึมโดยโปรโตพลาของจำนวนของแบคทีเรีย
สายพันธุ์ แต่การเปลี่ยนแปลงของเชื้อ E. coli PEG-ไกล่เกลี่ยโดย
pBR322 ดีเอ็นเอเฉลี่ย 106 transformants ละ UG ดีเอ็นเอ
(7) ค่า 2 คำสั่งของขนาดต่ำกว่าที่หาได้
โดยวิธีการอื่น ๆ (6)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีทางเคมีหลายได้รับการจัดตั้งขึ้นที่จูงการเปลี่ยนแปลงของเซลล์แบคทีเรีย ในการทดลองแบบคลาสสิก แมนเดลแล้ว น กา ( 1 ) แสดงให้เห็นว่าการรักษาของ Escherichia coliด้วย CaCl2 ทำให้เซลล์ไวต่อการดูดซึมของแบคเทอริโอเฟจดีเอ็นเอ ต่อมาพบว่าเทคนิคนี้สามารถใช้เพื่อแปลงที่มีโครโมโซมแบคทีเรีย E . coliพลาสมิดและจำเพาะ ( 2 , 3 ) ตั้งแต่เริ่มต้นศึกษาเหล่านี้จำนวนปัจจัยที่ได้รับการอธิบายที่ผลิตเป็นการเพิ่มประสิทธิภาพในการแปลง ปัจจัยดังกล่าว ได้แก่บ่มนานของแบคทีเรียด้วย CaCl2 ( 4 ) , เพิ่มที่มีหลายแปลงผสม ( 5 ) และการรักษาเชื้อแบคทีเรียกับเต๊ะ ( DMSO )hexaminecobalt และบัตรแข็งในการแสดงตนของทั้งและกัดกันเชอ ( 6 ) หลังการแก้ไขผลิตผลผลิต > 108 transformants ต่อไมโครกรัมของดีเอ็นเอเอทิลีนไกลคอล ( PEG ) ยังถูกแสดงเพื่อไกล่เกลี่ยการใช้พลาสมิดดีเอ็นเอโดยเอนไซม์ของแบคทีเรียสายพันธุ์ แต่เมื่อการเปลี่ยนแปลงของ E . coli โดยคนกลางpbr322 พลาสมิดดีเอ็นเอเฉลี่ย 106 ต่อไมโครกรัมของดีเอ็นเอ( 7 ) ค่า 2 คำสั่งของขนาดต่ำกว่าที่ได้มาโดยวิธีการอื่น ๆ ( 6 )