During freeze drying the frozen wat

During freeze drying the frozen water is removed by sublimation,
thus reducing damage to biological structures. However the
level of cell viability after freeze drying varies according to
numerous factors including the strain of microorganisms and also
the efficacy of the protective agents used. Several investigators have
reported the effect of bacterial cell size on survival during freeze
drying (Fonseca, Beal, & Corrieu, 2000) and subsequent storage
(Carvalho et al., 2003). Differences in the surface areas of microorganisms
and variations in cell wall and membrane composition
affect the ability of the cells to survive the freeze drying process.
During the processing and storage of freeze dried food, oxygen
content, high temperature, low pH, water activity and elevated
solute concentration may all affect the viability of probiotic
organisms (Carvalho et al., 2004).
The cryoprotective effect of skim milk is largely because of the
lactose. Lactose/sugars in milk act as dehydrating agent reducing
the amount of intracellular water. The colloidal structure also
protects microorganisms. Milk also exerts its protective effect by
raising the glass transition temperature of the samples.
Calcium alginate provides a physical barrier to the immobilized
lactic acid bacteria and protects them from acidic conditions and
bile salts during their way to the gut. One important challenge for
cell encapsulation is the relatively large size of microbial cells
(typically 1e4 mm) or particles of freeze dried culture (>100 mm).
This characteristic limits cell loading for small capsules or when
larger size capsules are produced, can negatively affect the textural
and sensorial properties of food products in which they are added
(Anal & Singh, 2007). All of these challenges are effectively overcome
by bacterial cellulose.
Bacterial cellulose or nata with its fibrous structure could also
have proved to be a physical barrier and thus overcome the deleterious
effects of freezing and provided an attachment matrix for
the lactic acid bacteria. Bacterial cellulose in its wet form has been
shown to induce a rapid adhesion of living human cells (Klemm,
Schumann, Udhardt, & Marsch, 2001) and this property has been
seen as a potential during the wound healing process. As shown in
this study, bacterial cells also showed adhesion to this support
(Fig. 2B). An interesting phenomenon noticed is that the upper
layers of nata had higher cell density as viewed by ESEM compared
to the lower layers. This could be attributed to the sucking action of
vacuum during freeze drying.
PBC on the other hand was poor in water content when the cell
suspension was mixed and with the increase in surface area and
superficial presence of bacteria the deleterious effects of freezing
and drying could have been more pronounced.
In the case of water and saline, poor viabilities were seen after
freeze drying and also at the end of storage Fig. 3A and B respectively.
The bacterial counts reached detection limits in 30 and 45
day storage respectively. Similar results have been noted by Berner
and Viernstein (2006) who reported water and saline to be poor
cryoprotectants.
Although skim milk has been widely reported to be the vehicle
of choice to carry lactic acid bacteria during the freeze drying
process (Carvalho et al., 2003; Otero et al., 2007), microbial cellulose
has the added potential of acting as a probiotic cryoprotectant
matrix. However this role needs to be supported by experimental
data. Damage to cells caused by freezing might also be reduced by
immobilization (Champagne, Gardner, Brochu, & Beaulieu, 1992).
During storage of immobilized lactic acid bacteria the counts
decreased gradually with duration of storage and reached about 104
cells in 60 d storage (Tables 1 and 2). However in the case of PBC the
counts reached the limits of detection after 60 d storage both at 4
C
and 30
C. Higher storage temperature (30
C) meant lower
viabilities at the end of the 60 d of storage (Table 2).
3.3. Fermented milks using immobilized lactic acid bacteria
The immobilized freeze dried cells on calcium alginate, skim
milk and nata after the end of the storage period (60 d) were
reconstituted with 10% skim milk for 30 min and directly used to
prepare fermented milks. Fig. 4 shows the drop in pH and increase
in cell counts during the course of fermentation when reconstituted
skim milk was inoculated with different lactic acid bacteria
immobilized on nata. The lactic acid bacteria immobilized on all the
three supports showed a clean coagulation with a pleasant diacetyl
flavour and no gas production. Only in the case of L. acidophilus the
increase in bacterial counts was slow and this was because of the
relatively low number of survivors at the end of the 60 d storage
period.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ระหว่างแช่แข็ง แห้งน้ำแข็งถูกเอาออก โดยการระเหิด,
ลดความเสียหายกับโครงสร้างทางชีวภาพ อย่างไรก็ตามการ
ระดับของเซลล์ชีวิตหลังจากแช่แข็งแห้งแตกต่างกันไปตาม
หลายปัจจัยรวมถึงสายพันธุ์ของจุลินทรีย์และ
ประสิทธิภาพของตัวแทนป้องกันที่ใช้ มีหลายนัก
รายงานผลของขนาดเซลล์แบคทีเรียในอยู่รอดระหว่างหยุด
แห้ง (& Beal, Fonseca, Corrieu, 2000) และการจัดเก็บต่อ
(Carvalho et al., 2003) ความแตกต่างในพื้นที่ผิวของจุลินทรีย์
และในผนังเซลล์และองค์ประกอบของเมมเบรน
ส่งผลกระทบต่อความสามารถของเซลล์แช่แข็งแห้งกระบวนการการอยู่รอด
ระหว่างประมวลผลและเก็บแช่แข็งแห้งอาหาร ออกซิเจน
เนื้อหา อุณหภูมิสูง ค่า pH ที่ต่ำ น้ำกิจกรรม และยก
ความเข้มข้นของตัวถูกละลายอาจทั้งหมดมีผลต่อชีวิตของโปรไบโอติกส์
ชีวิต (Carvalho et al., 2004) .
ผล cryoprotective skim นมเป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการ
แล็กโทสได้ ย่อยแลคโตส/น้ำตาลในนมทำหน้าที่เป็นเอเจนต์ที่ขจัดน้ำออกไปลด
จำนวน intracellular น้ำ Colloidal ที่โครงสร้างยัง
ป้องกันจุลินทรีย์ นม exerts ยังมีผลป้องกันโดย
เพิ่มอุณหภูมิของตัวอย่างเปลี่ยนกระจก
แคลเซียมแอลจิเนตให้อุปสรรคทางกายภาพการที่เอนไซม์
แบคทีเรียกรดแลกติก และปกป้องพวกเขาจากสภาพเปรี้ยว และ
เกลือน้ำดีในลำไส้ของพวกเขาไป ความท้าทายสำคัญหนึ่งสำหรับ
encapsulation เซลล์มีขนาดค่อนข้างใหญ่ของเซลล์จุลินทรีย์
(typically 1e4 mm) หรืออนุภาคของแช่แข็งแห้งวัฒนธรรม (> 100 มม.)
ลักษณะนี้จำกัดการโหลดเซลล์ในแคปซูลขนาดเล็ก หรือเมื่อ
แคปซูลขนาดใหญ่ผลิต อาจมีผลที่ textural
และคุณสมบัติของผลิตภัณฑ์อาหารที่จะเพิ่ม sensorial
(&ทางทวารหนักสิงห์ 2007) ความท้าทายเหล่านี้ทั้งหมดมีประสิทธิภาพเอาชนะ
โดยแบคทีเรียเซลลูโลสได้
แบคทีเรียเซลลูโลสหรือ nata กับโครงสร้างของข้ออาจยัง
ได้พิสูจน์สิ่งกีดขวางทางกายภาพ และจึง เอาชนะสุด
ผลของจุดเยือกแข็งและเมทริกซ์การแนบสำหรับ
แบคทีเรียกรดแลกติก แบคทีเรียเซลลูโลสแบบเปียกได้
แสดงเพื่อก่อให้เกิดการยึดเกาะอย่างรวดเร็วของเซลล์มนุษย์ชีวิต (Klemm,
สคูมัน Udhardt & Marsch, 2001) และที่แห่งนี้ได้รับ
เห็นเป็นเป็นไปในระหว่างกระบวนการรักษาบาดแผล มาก
นี้ศึกษา เซลล์แบคทีเรียยังพบยึดเกาะนี้
(Fig. 2B) สนับสนุนการ ปรากฏการณ์น่าสนใจพบว่า บน
ชั้นของ nata มีความหนาแน่นเซลล์สูงกว่าเท่าที่ดูเปรียบเทียบ ESEM
ไปชั้นล่าง นี้อาจเกิดจากการดูดของ
สูญญากาศระหว่างการแช่แข็งแห้ง.
PBC คงถูกมากน้ำเนื้อหาเมื่อเซลล์
ระงับถูกผสม และเพิ่มพื้นที่ผิว และ
อยู่ผิวเผินของแบคทีเรียผลร้ายของการแช่แข็ง
และแห้งอาจมีได้ชัดเจนยิ่งขึ้น.
ในกรณีของน้ำและน้ำเกลือ viabilities พอได้เห็นหลังจาก
ตรึงแห้ง และท้ายเก็บ Fig. 3A และ B ตามลำดับ
นับแบคทีเรียถึงขีดจำกัดการตรวจสอบใน 30 และ 45
วันเก็บตามลำดับ ผลคล้ายได้รับการกล่าว โดย Berner
และ Viernstein (2006) ที่รายงานน้ำและน้ำเกลือจะดี
cryoprotectants.
แม้ว่า skim นมมีการรายงานอย่างกว้างขวางให้ รถ
มายสืบแบคทีเรียกรดแลกติกในระหว่างการแช่แข็งแห้ง
กระบวนการ (Carvalho et al., 2003 บิดโอเตโรร้อยเอ็ด al., 2007), จุลินทรีย์เซลลูโลส
มีศักยภาพเพิ่มเติมของ cryoprotectant โปรไบโอติกส์
เมตริกซ์ อย่างไรก็ตาม บทบาทนี้จำเป็นต้องได้รับการสนับสนุน โดยการทดลอง
ข้อมูล ยังอาจสามารถลดความเสียหายเกิดจากการแช่แข็งเซลล์โดย
ตรึงโป (แชมเปญ การ์ดเนอร์ Brochu &ไลส์ 1992) ได้
ระหว่างการเก็บรักษาของแบคทีเรียกรดแลกติกเอนไซม์นับ
ลดลงเรื่อย ๆ ด้วยระยะเวลาของการจัดเก็บ และเข้าถึงประมาณ 104
เซลล์เก็บ 60 d (ตารางที่ 1 และ 2) อย่างไรก็ตามในกรณีของ PBC
นับถึงขีดจำกัดของการตรวจสอบหลังจาก 60 d เก็บทั้งที่ 4 C
และ 30 C. สูงอุณหภูมิการจัดเก็บ (30 C) หมายถึงล่าง
viabilities ท้ายของ d 60 เก็บ (ตารางที่ 2) .
3.3 หมักโดยใช้แบคทีเรียกรดแลกติกเอนไซม์ milks
เซลล์แห้งตรึงเอนไซม์บนแคลเซียมแอลจิเนต อ่านอย่างคร่าว ๆ
นมและ nata หลังจากสิ้นสุดของรอบระยะเวลาเก็บ (60 d)
reconstituted ด้วย 10% skim นม 30 นาที และใช้โดยตรง
เตรียม milks ร้า Fig. 4 แสดงแบบหล่นในค่า pH และเพิ่ม
ในการตรวจนับเซลล์ในระหว่างการหมักเมื่อ reconstituted
skim นมถูก inoculated กับแบคทีเรียกรดแลคติแตกต่าง
หาบน nata แบคทีเรียกรดแลกติกที่ตรึงบนทั้งหมด
สนับสนุนสามพบโรงสะอาดกับ diacetyl ดี
กลิ่นและไม่มีการผลิตก๊าซ เฉพาะในกรณีของ L. acidophilus
เพิ่มจำนวนแบคทีเรียช้า และนี้ก็เนื่องจาก
เลขค่อนข้างต่ำของผู้จบเก็บ 60 d
รอบระยะเวลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในระหว่างแช่แข็งแช่แข็งน้ำแห้งจะถูกเอาออกโดยระเหิด ,
จึงช่วยลดความเสียหายให้กับโครงสร้างทางชีววิทยา อย่างไรก็ตาม
ระดับเซลล์ตามเสบย แตกต่างกันไปตามปัจจัย

มากมายรวมทั้งสายพันธุ์ของเชื้อจุลินทรีย์และยัง
ประสิทธิภาพของตัวแทนป้องกันใช้ . นักวิจัยหลายคนได้
รายงานผลของขนาดเซลล์แบคทีเรียในการอยู่รอดในช่วงตรึง
การอบแห้ง ( ฟอนเซคาบีล & corrieu , 2000 ) และต่อมากระเป๋า
( คาร์วัลโญ่ et al . , 2003 ) ความแตกต่างในพื้นที่พื้นผิวและรูปแบบในเซลล์ของจุลินทรีย์

องค์ประกอบและผนังเยื่อมีผลต่อความสามารถของเซลล์เพื่อความอยู่รอดหยุดกระบวนการอบแห้ง
ในระหว่างการประมวลผลและการเก็บรักษาอาหารแช่แข็งอบแห้ง , ออกซิเจน
เนื้อหาสูงอุณหภูมิต่ำ pH ของน้ำและยกระดับ
กิจกรรมสารละลายความเข้มข้นอาจมีผลต่อชีวิตของโปรไบโอติก
ที่มาจากสิ่งมีชีวิต คาร์วัลโญ่ et al . , 2004 ) .
cryoprotective ผลของหางนมเป็นส่วนใหญ่เพราะของ
แล็คโตส น้ำตาลแลคโตสในนม เช่น พรบ. / dehydrating ตัวแทนลด
ปริมาณเซลล์ของน้ำ โครงสร้างการศึกษายัง
ป้องกันจุลินทรีย์ นมยังสร้างผลการป้องกันของมันโดย
การเพิ่มอุณหภูมิคล้ายแก้วของตัวอย่าง
แคลเซียมอัลจิเนตมีสิ่งกีดขวางทางกายภาพเพื่อตรึง
แบคทีเรียกรดแลคติกและปกป้องพวกเขาจากเงื่อนไขที่เป็นกรดและเกลือน้ำดีใน
ไปลำไส้ หนึ่งในความท้าทายที่สำคัญสำหรับ
เซลล์ encapsulation เป็นขนาดที่ค่อนข้างใหญ่ของจุลินทรีย์เซลล์
( โดยปกติ 1e4 มม. ) หรืออนุภาคของแข็งแห้งวัฒนธรรม ( >
100 มม. )ซึ่งลักษณะขอบเขตเซลล์โหลดสำหรับแคปซูลขนาดเล็กหรือขนาดใหญ่เมื่อ
แคปซูลที่ผลิตในเชิงลบจะมีผลต่อเนื้อ
และคุณสมบัติต่อผลิตภัณฑ์อาหารที่พวกเขาถูกเพิ่ม
( ทวารหนัก&ซิงห์ , 2007 ) ทั้งหมดของความท้าทายเหล่านี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพเอาชนะ

โดยเซลลูโลสจากแบคทีเรีย แบคทีเรียเซลลูโลสหรือ Nata ที่มีเส้นใยโครงสร้างอาจ
ได้พิสูจน์แล้วว่าเป็นสิ่งกีดขวางทางกายภาพจึงเอาชนะคงผลของการแช่แข็งและมีความผูกพัน

เมทริกซ์สำหรับแบคทีเรียกรดแลคติก เซลลูโลสจากแบคทีเรียในรูปแบบเปียกได้
แสดงทำให้ยึดติดอย่างรวดเร็วของชีวิตเซลล์ของมนุษย์ ( เคลมม์
ชูมันน์ , udhardt , & , มาร์ช , 2001 ) และคุณสมบัตินี้ได้รับ
เห็นเป็นศักยภาพในการสมานแผล กระบวนการ ตามที่แสดงใน
การศึกษานี้ยังพบว่ามีการยึดเกาะเซลล์แบคทีเรียนี้สนับสนุน
( รูปที่ 2B ) เป็นปรากฏการณ์ที่น่าสนใจ สังเกตที่เลเยอร์ด้านบน
Nata มีความหนาแน่นเซลล์สูงกว่าทัศนะของ ESEM เปรียบเทียบ
ถึงชั้นล่าง นี้อาจจะเกิดจากการดูดของสูญญากาศในระหว่างการทำให้แห้ง
.
PBC ในมืออื่น ๆที่ไม่ดี ปริมาณน้ำในเซลล์
เมื่อการผสมและมีการเพิ่มพื้นที่ผิวและการปรากฏตัวของเชื้อแบคทีเรียที่เป็นอันตรายตื้น

ผลของการแช่แข็งและแห้งอาจจะเด่นชัดมากขึ้น
ในกรณีของน้ำและเกลือ จน viabilities เห็นหลังจาก
แช่แข็งแห้งและในตอนท้ายของกระเป๋ารูปที่ 3A และ B ตามลำดับ
นับเชื้อแบคทีเรีย ถึงขีด จำกัด การตรวจสอบใน 30 และ 45 วัน
กระเป๋าตามลำดับผลที่คล้ายกันได้รับการตั้งข้อสังเกตโดยเบอร์เนอร์
viernstein ( 2006 ) และมีน้ำและเกลือเป็นสารป้องกันโปรตีนเสียสภาพเนื่องจากยากจน
.
แต่หางนมได้รับอย่างกว้างขวางว่าเป็นยานพาหนะ
เลือกอุ้มแบคทีเรียกรดแลคติกในระหว่างกระบวนการอบแห้ง ( Freeze
คาร์วัลโญ่ et al . , 2003 ; โอเตโร et al . , 2007 )
เซลลูโลสเพิ่มศักยภาพของจุลินทรีย์ได้เป็นโปรไบโอติกน้ำยา
เมทริกซ์อย่างไรก็ตาม บทบาทนี้จะต้องได้รับการสนับสนุนโดยการทดลอง

ความเสียหายที่เกิดจากการแช่แข็งเซลล์อาจจะลดลง โดย
การตรึง ( แชมเปญ , การ์ดเนอร์ , brochu & Beaulieu , 1992 ) .
ในระหว่างการเก็บรักษาของแบคทีเรียกรดแลคติกที่ใช้นับ
ลดลงด้วยระยะเวลาของการจัดเก็บและถึงประมาณ 104
เซลล์ 60 D กระเป๋า ( ตารางที่ 1 และ 2 ) อย่างไรก็ตามในกรณีของ PBC
นับถึงขีดจำกัดของการตรวจหาหลังจาก 60 D กระเป๋าทั้ง 4
C
อุณหภูมิ 30 C และ
ที่สูง ( 30
c ) หมายถึง viabilities ลด
ที่ส่วนท้ายของ 60 D ของกระเป๋า ( ตารางที่ 2 )
3 . หมักนมโดยใช้แบคทีเรียกรดแลคติกที่ตรึง
ตรึงตรึงแห้งเซลล์ในแคลเซียมอัลจิเนตเรียด
นมและนาตาหลังจากสิ้นสุดระยะเวลาการจัดเก็บ ( 60 D )
สร้างด้วยหางนมผงร้อยละ 10 และเมื่อ 30 นาทีและใช้โดยตรง

เตรียมนมหมัก รูปที่ 4 แสดงการลดลงของ pH ในเซลล์และเพิ่ม
นับในระหว่างการหมักเมื่อสร้าง
skim milk เป็นเชื้อด้วยแบคทีเรียกรดแล็กติกที่แตกต่างกัน
ตรึงบน Nata . แบคทีเรียกรดแลคติกที่ตรึงบนทั้งหมด
3 สนับสนุนแสดงการทำความสะอาดด้วย
Name ที่ถูกใจกลิ่นและก๊าซที่ผลิต แต่ในกรณีของ L . acidophilus
เพิ่มจุลินทรีย์ได้ช้า และนี้เป็นเพราะ
ค่อนข้างต่ำจำนวนผู้รอดชีวิตที่ส่วนท้ายของ 60 D กระเป๋า
ระยะเวลา