Platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) was purchased from Biosynthesis Ltd. (Beijing, China). 4-(N-Maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt (Sulfo-SMCC), 6-mercaptohexanol, Tris(2-car- boxyethyl)phosphine hydrochloride (TCEP), invertase (β-fructosi- dase, from baker0s yeast) and Tween-20 were achieved from Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). NaH2PO4 and Na2HPO4 were bought from Shanghai Chemical Reagent Company (Shanghai, China). All other reagents were of analytical reagent grade or better and were used directly without further purification. Strep- tavidin magnespheres paramagnetic particles (SA-PMPs) were purchased from Promega Corporation (Madison, USA). A commer- cially available glucose meter (ACCU-CHEK Avia) and test strips were received from Roche Diagnostics India Pvt. Ltd. (Mannheim, Germany) and used at room temperature. The photographs were taken with a Panasonic DMC-FX35 digital camera (Panasonic, Japan). The sequence of PDGF-BB-binding primary aptamer and secondary aptamer (left to right: 50 to 30) used herein was synthesized and purified by Shanghai Sangon Biotech. Co. Ltd. (Shanghai, China). The sequence is shown below:
meterials and reagents
preparation of detection probe
procedures for pdgr-bb detection
การเจริญเติบโตของเกล็ดเลือดที่ได้มาจากปัจจัย BB (PDGF-BB) ซื้อมาจากการสังเคราะห์ จำกัด (กรุงปักกิ่งประเทศจีน) 4- (N-Maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylic กรด 3 Sulfo-N-Hydroxysuccinimide เกลือโซเดียมเอสเตอร์ (Sulfo-SMCC) 6 mercaptohexanol, Tris (boxyethyl 2 Car-) ไฮโดรคลอไรฟอสฟีน (TCEP), อินเวอร์ (β -fructosi- Dase จากยีสต์ baker0s) และ Tween-20 ก็ประสบความสำเร็จจาก Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) NaH2PO4 และ Na2HPO4 ถูกซื้อจากเซี่ยงไฮ้สารเคมี บริษัท (Shanghai, จีน) ทั้งหมดน้ำยาอื่น ๆ ของเกรดน้ำยาวิเคราะห์หรือดีกว่าและถูกนำมาใช้โดยตรงโดยไม่ต้องฟอกเพิ่มเติม Strep- tavidin magnespheres อนุภาค paramagnetic (SA-เครื่อง PMP) ที่ซื้อมาจาก Promega คอร์ปอเรชั่น (เมดิสันสหรัฐอเมริกา) โดยเฉพาะอย่าง Commer- ใช้ได้กลูโคสเมตร (ACCU-CHEK Avia) และชุดทดสอบที่ได้รับจาก Roche Diagnostics India Pvt จำกัด (Mannheim, เยอรมนี) และใช้ที่อุณหภูมิห้อง คนถ่ายภาพกับ Panasonic DMC-FX35 กล้องดิจิตอล (พานาโซนิค, ญี่ปุ่น) ลำดับของ PDGF-BB-ผูกพัน aptamer หลักและรอง aptamer (จากซ้ายไปขวา: 50-30) ที่ใช้ในที่นี้ถูกสังเคราะห์และบริสุทธิ์โดยเซี่ยงไฮ้ Sangon ไบโอเทค จำกัด (Shanghai, จีน) ลำดับที่แสดงด้านล่าง: วัสดุและสารเคมีการเตรียมความพร้อมของการสืบสวนการตรวจสอบขั้นตอนการตรวจหา pdgr-BB
การแปล กรุณารอสักครู่..