Isolation and estimation of 6-ketoP

Isolation and estimation of 6-ketoPGF1a by HPLC
Lipids were extracted from the serum with chloroform:methanol
(1:1). It was then filtered through a Whatman No 1
filter paper. The residue collected was evaporated to
dryness under N2, after protein estimation. Residue was redissolved
in 5 ml of ethanol and 15 ml of water was added,
acidified to pH 3 with formic acid and kept for 24 h at 4 C
with constant shaking at 2 h interval. Sample was applied to
a C18 Seppak catridge, and washed with 5 ml of water
followed by 5 ml of 15% ethanol and 5 ml of hexane. The
eicosanoids were eluted with 2.5 ml ethyl acetate.25 6-
ketoPGF1a was detected using a C18 column (isocratically
with acetonitrile:water:H3P04, 30:70:0.01, v/v, pH 2.95,
flow rate 0.5 ml/min detection at 192 nm) in a Shimadzu S
PDA 10 chromatograph.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกและประเมิน 6-ketoPGF1a โดย HPLCโครงการถูกสกัดจากเซรั่มด้วยคลอโรฟอร์ม: เมทานอล(1:1) ถูกจากนั้นกรองผ่าน Whatman No 1กระดาษกรอง สารตกค้างที่รวบรวมได้หายไปไปความแห้งกร้านภายใต้ N2 หลังจากโปรตีนประมาณ สารตกค้างถูก redissolvedในเอทานอล และ 15 ml น้ำ 5 ml เพิ่มacidified pH 3 กับ formic กรด และเก็บไว้ใน 24 ชมที่ 4 Cด้วยคงสั่นที่ช่วง 2 h ตัวอย่างที่ถูกประยุกต์ใช้มี catridge C18 Seppak และล้าง ด้วย 5 ml ของน้ำตาม ด้วย 5 ml ของเอทานอล 15% และ 5 ml ของเฮกเซน ที่eicosanoids ได้ eluted กับ acetate.25 2.5 ml เอทิล 6-ใช้คอลัมน์ C18 (isocratically ketoPGF1a พบacetonitrile:water:H3P04, 30:70:0.01, v/v, pH 2.95ขั้นตอนการตรวจ 0.5 ml/min อัตราที่ 192 nm) ใน Shimadzu SChromatograph PDA 10

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแยกและการประมาณ 6 ketoPGF1a โดย HPLC
ไขมันสกัดจากซีรั่มที่มีคลอโรฟอร์ม: เมทานอล
(1: 1) มันถูกแล้วกรองผ่านเบอร์ 1
กระดาษกรอง ที่เหลือถูกเก็บรวบรวมเพื่อระเหยแห้งภายใต้ N2 หลังจากการประมาณค่าโปรตีน
ที่เหลือถูก redissolved
5 มล. เอทานอลและ 15 ml
ของน้ำที่เพิ่มขึ้นกรดค่าพีเอช3 มีกรดและเก็บไว้เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4
องศาเซลเซียสที่มีอย่างต่อเนื่องในช่วงเวลาที่สั่นชั่วโมง2 ตัวอย่างถูกนำไปใช้
C18 Seppak catridge และล้างด้วย 5 ml
ของน้ำตามด้วย5 มล. เอทานอล 15% และ 5 มิลลิลิตรเฮกเซน
eicosanoids ถูกชะ 2.5 มล. เอทิล acetate.25 6
ketoPGF1a ถูกตรวจพบโดยใช้คอลัมน์ C18 (isocratically
กับ acetonitrile: น้ำ H3P04, 30: 70: 0.01, v / V ค่า pH 2.95,
อัตราการไหล 0.5 มล. / นาทีการตรวจสอบที่ 192 นาโนเมตร) ใน Shimadzu S
PDA 10 chromatograph

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกและการประมาณค่าโดยวิธี HPLC 6-ketopgf1a
ไขมันสกัดจากเซรั่มด้วยคลอโรฟอร์ม : เมทานอล
( 1 : 1 ) จากนั้นกรองผ่าน whatman 1
กรองกระดาษ ที่เหลือเก็บเป็นระเหยแห้งกร้านใต้ N2

หลังจากการประมาณค่าโปรตีน การตกค้าง redissolved
5 ml และเอทานอล 15 ml ของน้ำที่ปรับ pH เป็น
3 กับกรดและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง
สั่นที่คงที่ 2 ชั่วโมง ช่วง ตัวอย่างการใช้ : c18 seppak catridge และล้างด้วยน้ำ 5 มิลลิลิตร
ตามด้วย 5 มิลลิลิตรเอทานอลร้อยละ 15 และ 5 มิลลิลิตรของน้ำ .
ตัวอย่าง 2.5 ml สารไอโคซานอยด์เป็น acetate.25 6 -
ketopgf1a ถูกตรวจพบโดยใช้คอลัมน์ C18 isocratically
กับไน : น้ำ : h3p04 30:70: , 0.01 , V / V , M
2.95 , อัตราการไหล 0.5 มิลลิลิตรต่อนาทีการตรวจจับที่ 192 nm ) ใน Shimadzu S
โครมาโตกราฟ
PDA 10 .