The method used (Liquid Chromatogra

The method used (Liquid Chromatography/Mass Spectrometry/
Mass Spectrometry) for acrylamide detection in this study is based
on the protocol developed by Dr. Steven Musser and colleagues
from the U.S. Food and Drug Administration with slight modification
(FDA 2002). The samples were homogenized, and 9.96 mL of
H2O and 40 L of the internal standard (5 ng/mL 13C3 acrylamide in
0.1% formic acid) was added to 1 g of the homogenized sample.
The samples were mixed for 20 min with a rotating shaker. Samples
were then centrifuged at 9000 rpm for 30 min in 50-mL centrifuge
tubes, and 5 mL of the supernatant was further centrifuged (at
5000 rpm for 30 min) in a Maxi-Spin filter tube (Maxi-spin filter
tube, 0.45-m PVDF-Alltech, Alltech Assoc., Deerfield, Ill., U.S.A.).
A solid-phase extraction (SPE) cartridge (OASIS HLB 6 cc solidphase
extraction, Waters Corp., Milford, Mass., U.S.A.), activated
with methanol (3.5 mL) and washed with water (3.5 mL), was used
to trap nonpolar interferences by adsorption in the recombined supernatant
(1.5 mL). The acrylamide-containing fraction from SPE
cartridge was eluted with 0.5 mL of water. Then, it was further eluted
with 1.5 mL of water, and this eluted fraction was collected. A mark
was placed on outside of Varian SPE cartridge (Bond Elut - Accucat,
mixed mode, C8, SAX and SCX; 3-mL solid-phase extraction cartridge,
Varian Inc., Harbor City, Calif., U.S.A.) at a height of 1 mL
above the sorbent bed. The Varian SPE cartridge was conditioned
with 2.5 mL methanol, followed by 2.5 mL of water. The fraction
collected from the SPE cartridge (1.5 mL) was loaded in the Varian
SPE and eluted to the 1-mL mark before collecting the remainder of
the eluted portion. The sample was filtrated with a 0.22-m filter
(Fisherbrand, Fisher Scientific Intl., Pittsburg, Penn., U.S.A.) and
analyzed by LC/MS/MS at room temperature using a Waters C-48
column.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการใช้ (Spectrometry Chromatography/มวล ของเหลว /Mass Spectrometry) สำหรับอะคริลาไมด์ ขึ้นตรวจสอบในการศึกษานี้บนโพรโทคอที่พัฒนา โดยดร.สตีเฟน Musser และเพื่อนร่วมงานจากสหรัฐอเมริกาอาหารและยากับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย(2002 องค์การอาหารและยา) ตัวอย่างถูก mL homogenized และ 9.96H2O และ 40 ลิตร (5 ng/mL 13C 3 อะคริลาไมด์ในมาตรฐานภายใน1 กรัมของตัวอย่าง homogenized ถูก 0.1% กรดฟอร์มิก)ตัวอย่างถูกผสม 20 นาทีกับการปั่นหมุน ตัวอย่างได้แล้วจากที่ 9000 rpm 30 นาทีในเครื่องหมุนเหวี่ยง 50 มิลลิลิตรและหลอด 5 mL ของ supernatant แก้ไขเพิ่มเติมจากที่5000 rpm 30 นาที) ในแม็กซี่หมุนกรองหลอด (สปินซี่กรองหลอด PVDF 0.45 m-ลเท รศลเท บางนาตราด Ill. สหรัฐอเมริกา)ตลับหมึกแยกเฟสของแข็ง (SPE) (โอเอซิส HLB 6 cc solidphaseเปิดใช้งานสกัด น้ำ Corp. ลฟอร์ด มวล., สหรัฐอเมริกา),ด้วยเมทานอล (3.5 มิลลิลิตร) และล้าง ด้วยน้ำ (3.5 มิลลิลิตร) ใช้กับดัก nonpolar interferences โดยการดูดซับใน supernatant คืนรูปปรุงแต่ง(1.5 mL) เศษส่วนที่ประกอบด้วยอะคริลาไมด์จากตรตลับหมึกถูก eluted กับ 0.5 mL ของน้ำ แล้ว มันถูกเพิ่มเติม elutedมี 1.5 mL ของน้ำ และเศษส่วน eluted นี้ถูกรวบรวม เครื่องหมายวางนอกตลับ Varian ตร (พันธบัตร Elut - Accucatโหมดผสม C8, SAX และ SCX ตลับแยกเฟสของแข็ง 3 mLVarian Inc. ฮาร์เบอร์ซิตี้ แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) ที่สูงของ 1mlข้างเตียงดูดซับ ตลับ Varian ตรถูกปรับวยเม 2.5 มล. ตาม ด้วย 2.5 mL ของน้ำ เศษส่วนรวบรวมจากตลับหมึกตร (1.5 mL) ถูกโหลดในการ Varianตร และ eluted เครื่องหมาย 1 มิลลิลิตรก่อนเก็บส่วนเหลือส่วน eluted ตัวอย่างคือ filtrated ด้วยตัวกรอง 0.22 เมตร(Fisherbrand สนามบินนานาชาติทางวิทยาศาสตร์ Fisher ตสเบิร์ก Penn. สหรัฐอเมริกา) และวิเคราะห์ โดย LC/MS/MS ที่ใช้ C-48 เป็นน้ำอุณหภูมิห้องคอลัมน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการที่ใช้ (Liquid Chromatography / มวลสาร /
มวลสาร) สำหรับการตรวจจับริลาไมด์ในการศึกษาครั้งนี้จะขึ้นอยู่
กับโปรโตคอลที่พัฒนาโดยดร. สตีเฟนมัสเซอร์และเพื่อนร่วมงาน
จากองค์การอาหารและยาสหรัฐที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
(FDA 2002) ตัวอย่างถูกปั่นและ 9.96 มล
H2O และ 40? ลิตรมาตรฐานภายใน (5 ng / 13C3 ริลาไมด์ใน
0.1% กรด) ถูกบันทึกอยู่ใน 1 กรัมของตัวอย่างหดหาย.
กลุ่มตัวอย่างถูกผสมเป็นเวลา 20 นาทีด้วย หมุนปั่น ตัวอย่าง
ถูกปั่นแล้วที่ 9000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีใน 50 มล centrifuge
หลอดและ 5 มิลลิลิตรใสก็ปั่นต่อไป (ที่
5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที) ในหลอดกรอง Maxi-Spin (Maxi-ปั่นกรอง
หลอด 0.45- ? M-PVDF ออลเทค, ออลเทครศ., เดียร์ฟิลด์, อิลลินอยส์., สหรัฐอเมริกา).
การสกัดเฟสของแข็ง (SPE) ตลับหมึก (OASIS HLB 6 ซีซี solidphase
สกัดน้ำคอร์ปฟอร์ด, Mass. USA) ใช้งานได้
กับเมทานอล (3.5 มิลลิลิตร) และล้างด้วยน้ำ (3.5 มิลลิลิตร) ถูกนำมาใช้
เพื่อดักจับรบกวน nonpolar โดยการดูดซับในสารละลาย recombined
(1.5 มิลลิลิตร) ส่วนริลาไมด์ที่มีส่วนผสมจาก SPE
ตลับหมึกถูกชะ 0.5 มิลลิลิตรของน้ำ จากนั้นมันก็ชะเพิ่มเติม
กับ 1.5 มิลลิลิตรของน้ำและนี้ส่วนชะถูกเก็บรวบรวม เครื่องหมาย
ถูกวางไว้ที่ด้านนอกของ Varian SPE ตลับหมึก (บอนด์ Elut - Accucat,
โหมดผสม C8, แซ็กโซโฟนและ SCX; ตลับสกัดเฟสของแข็ง 3 มล
. Varian อิงค์ฮาร์เบอร์ซิตี้รัฐแคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) ที่ความสูงของ 1 มิลลิลิตร
เหนือเตียงตัวดูดซับ ตลับหมึก Varian SPE ถูกปรับอากาศ
2.5 มลเมทานอลตามด้วย 2.5 มิลลิลิตรของน้ำ เศษ
ที่เก็บรวบรวมได้จากตลับหมึก SPE นี้ (1.5 มิลลิลิตร) ถูกโหลดใน Varian
SPE และชะกับมาร์ค 1 มิลลิลิตรก่อนที่จะจัดเก็บภาษีส่วนที่เหลือของ
ส่วนชะ กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการกรองด้วย 0.22-? M กรอง
(Fisherbrand, สนามบินนานาชาติฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์. สเบิร์ก, เพนน์. USA) และ
วิเคราะห์โดย LC / MS / MS ที่อุณหภูมิห้องโดยใช้น้ำ C-48
คอลัมน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการที่ใช้ ( Liquid Chromatography / Mass Spectrometry /มวลสาร ) เพื่อตรวจสอบในการศึกษานี้ใช้อะคริลาไมด์ในขั้นตอนที่พัฒนาโดย ดร. สตีเวน มัสเซอร์และเพื่อนร่วมงานจากองค์การอาหารและยาสหรัฐ ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย( FDA 2002 ) กลุ่มตัวอย่างเป็นโฮโม และ 3 มล.H2O และ 40 ลิตรมาตรฐานภายใน ( 5 ng / ml 13c3 อะคริลาไมด์ใน0.1% กรด ) คือเพิ่ม 1 กรัมของโฮโมตัวอย่างจำนวนรวม 20 นาทีด้วยการหมุนปั่น . ตัวอย่างเป็นระดับที่ 9000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีในเครื่อง 50 มล.ท่อ , และ 5 มิลลิลิตร และน่านเป็นอีกระดับ ( ที่5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที ) ใน Maxi หลอดปั่นกรอง ( กรองยังหมุนหลอด , 0.45-m PVDF โดยเพราะเพราะ , , เดียร์ฟิลด์ ป่วย อเมริกา )เป็นส่วนแยก ( เอสพี ) ตลับหมึก ( hlb 6 CC solidphase โอเอซิสการสกัดน้ำคอร์ป , ฟอร์ด , มวล . , USA ) , เปิดกับเมทานอล ( 3.5 มิลลิลิตร ) และล้างด้วยน้ำ ( 3.5 ml ) ใช้กับดักการแทรกแซงไม่มีขั้วในน้ำนมสูง โดยการดูดซับ( 1.5 ml ) ซึ่งประกอบด้วยเศษจากสารอะครีลาไมด์ตลับหมึกได้รับตัวอย่าง 0.5 มิลลิลิตรของน้ำ งั้น มันคือตัวอย่างเพิ่มเติมกับ 1.5 มิลลิลิตรของน้ำและส่วนเก็บข้อมูลตัวอย่าง . เครื่องหมายวางอยู่บนด้านนอกของเครื่องเอสพี elut - accucat ตลับ ( พันธบัตร ,โหมด ดองผสม และ แซ็ค scx ; 3-ml ส่วนแยกตลับเครื่องอิงค์ , เมืองท่า , รัฐแคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) ที่ความสูง 1 มิลลิลิตรดูดซับข้างบนเตียง เครื่องเอสพีตลับเป็นปรับอากาศ2.5 ml ต่อ ตามด้วย 2.5 มิลลิลิตรของน้ำ เศษส่วนรวบรวมจากเอสพีตลับ ( 1.5 ml ) ถูกโหลดในแวเรียนเอสพี และตัวอย่างให้ 1-ml ก่อนเก็บส่วนที่เหลือของมาร์คตัวอย่างการแบ่งส่วน ตัวอย่างที่ผลิตด้วยเครื่องกรอง 0.22-m( fisherbrand ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ . สเบิร์ก , เพนน์ , . , USA ) และวิเคราะห์โดย LC / MS / MS ที่อุณหภูมิห้องโดยใช้ c-48 น้ำคอลัมน์