Lomonte, B., Moreno, E., Tarkowski,

Lomonte, B., Moreno, E., Tarkowski, A., Hanson, L.Å., Mac- carana, M., 1994. Neutralizing interaction between heparins and myotoxin II, a lysine 49 phospholipase A2 from Bothrops asper snake venom. Identification of a heparin-binding and cytolytic toxin region by the use of synthetic peptides and molecular modeling. J. Biol. Chem. 269, 29867–29873.
PLA2s having a Lys in position 49, instead of the highly conserved Asp, were first described in the 1980s in the venoms of various crotaline snakes (Maraganore et al., 1984). Despite initial claims of residual enzymatic activity in these variants, it was demonstrated that Lys49 PLA2s were devoid of catalytic activity due to their inability to bind Ca2þ, a key cofactor for PLA2 activity. Although devoid of enzymatic activity, Lys49 PLA2 homologues were shown to display toxicity, especially myotoxicity, thus becoming highly interesting molecular models to understand how these proteins exert plasma membrane damage in the absence of catalysis. Using myotoxin II, a well characterized Lys49 PLA2 homologue from the venom of Bothrops asper, Lomonte et al. identified, for the first time, the structural determinants of cytotoxicity in a PLA2 homologue.
On the basis of the previously known ability of heparin to inhibit myonecrosis induced by basic PLA2 myotoxins from Bothrops sp venoms (Melo et al., 1993), the authors characterized the interaction between heparins of different molecular sizes and myotoxin II. It was found that heparin forms macromolecular complexes with myotoxin II at a heparin:toxin molar ratio of 1:5, and that O- and N- sulfates of heparin play a role in this binding. Several synthetic peptides, covering various sequences of myotoxin II, were prepared and their interaction with heparin was assessed. It was found that the peptide comprising residues 115–129 of the toxin, constituted by hydrophobic and cationic residues, was able to bind to heparin and, perhaps more importantly, to induce cytotoxicity on an endothelial cell line. These observations demonstrated that such stretch of residues, located at the C-terminal region of the molecule, could by itself interact and disorganize the plasma membrane of cells. Furthermore, the ability of heparin to inhibit myotoxicity was explained by the inter- action of this glycosaminoglycan with the cytolytic C- terminal region of myotoxin II.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Lomonte บี Moreno, E., Tarkowski, A. แฮนสัน L.Å, Mac-carana, M., 1994 Neutralizing โต้ตอบระหว่าง heparins และ myotoxin II เป็นไลซีน 49 phospholipase A2 จากพิษงู Bothrops asper รหัสของภูมิภาค รวมเฮพาริน และ cytolytic พิษโดยการใช้เปปไทด์สังเคราะห์และแบบจำลองโมเลกุล J. Biol. Chem. 269, 29867 – 29873PLA2s มีเป็น Lys ในตำแหน่ง 49 แทน Asp นำสูง มีอธิบายไว้ก่อนในทศวรรษ 1980 ในดีงู crotaline ต่าง ๆ (Maraganore et al., 1984) แม้ มีการเรียกร้องสิทธิเริ่มต้นของกิจกรรมเอนไซม์ในระบบที่เหลือในตัวแปรเหล่านี้ มันถูกแสดงว่า Lys49 PLA2s ได้ไร้กิจกรรมตัวเร่งปฏิกิริยาเนื่องจากไม่สามารถผูก Ca2þ, cofactor สำคัญสำหรับกิจกรรม PLA2 แม้ไร้กิจกรรมเอนไซม์ในระบบ Lys49 PLA2 homologues ได้แสดงเพื่อแสดงความเป็นพิษ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง myotoxicity จึง กลายเป็น แบบจำลองโมเลกุลน่าสนใจมากจะเข้าใจว่าโปรตีนเหล่านี้ออกแรงเสียพลาสมาเมมเบรนของเร่งปฏิกิริยา ใช้ myotoxin II การ homologue Lys49 PLA2 characterized ดีจากพิษของ Bothrops asper, Lomonte et al. ระบุ ครั้งแรก ดีเทอร์มิแนนต์โครงสร้างของ cytotoxicity ใน PLA2 homologueโดยก่อนหน้านี้รู้จักความสามารถของเฮพารินยับยั้ง myonecrosis เกิดจากพื้นฐาน PLA2 myotoxins จาก Bothrops sp ดี (Melo et al., 1993), ผู้เขียนลักษณะการโต้ตอบระหว่าง heparins ขนาดโมเลกุลและ myotoxin II พบว่า เฮพารินฟอร์ม macromolecular คอมเพล็กซ์กับ myotoxin II ที่เป็นพิษ: เฮพารินสบอัตราของ 1:5 และที่ O - และ N-sulfates ของเฮพารินมีบทบาทในการผูกนี้ ได้เตรียมหลายสังเคราะห์เปปไทด์ ครอบคลุมลำดับต่าง ๆ ของ myotoxin II และการโต้ตอบกับเฮพารินถูกประเมิน พบว่า เพปไทด์ที่ประกอบด้วย 115-129 ของพิษ ทะลัก โดย hydrophobic และ cationic ตก ตกไม่สามารถผูกเข้ากับเฮพารินและ บางทีมากกว่าที่สำคัญ ชวน cytotoxicity บนบรรทัดเซลล์บุผนังหลอดเลือด ข้อสังเกตเหล่านี้แสดงว่า เช่นยืดตก ตั้งอยู่ที่เขต C-เทอร์มินัลของโมเลกุล ได้ ด้วยตัวเองโต้ตอบ และ disorganize เมมเบรนของพลาสม่าเซลล์ นอกจากนี้ ความสามารถของเฮพารินยับยั้ง myotoxicity ถูกอธิบาย โดยอินเตอร์การดำเนินการนี้ glycosaminoglycan มี cytolytic C สถานีภูมิภาคของ myotoxin II

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Lomonte บี, เรโน, อี Tarkowski, A. , แฮนสัน L.A. , MAC- Carana, M. , 1994. ปฏิสัมพันธ์ระหว่าง Neutralizing heparins และ myotoxin II, ไลซีน 49 phospholipase A2 จาก Bothrops ตงพิษงู บัตรประจำตัวของเฮผูกพันและภูมิภาค cytolytic พิษโดยการใช้เปปไทด์สังเคราะห์และการสร้างแบบจำลองโมเลกุล เจ Biol Chem 269, 29867-29873.
PLA2s มีลิซใน 49 ตำแหน่งแทนการอนุรักษ์สูงงูเห่าถูกอธิบายไว้เป็นครั้งแรกในปี 1980 ในการออกฤทธิ์ของงู crotaline ต่างๆ (Maraganore et al., 1984) แม้จะมีการเรียกร้องครั้งแรกของกิจกรรมของเอนไซม์ที่เหลือในสายพันธุ์เหล่านี้มันก็แสดงให้เห็นว่า Lys49 PLA2s ได้ไร้การเร่งปฏิกิริยาเนื่องจากไม่สามารถที่จะผูกCa2þ, ปัจจัยที่สำคัญสำหรับกิจกรรม PLA2 แม้ว่าไร้เอนไซม์, homologues Lys49 PLA2 ที่มีการแสดงที่จะแสดงความเป็นพิษโดยเฉพาะอย่างยิ่ง myotoxicity จึงกลายเป็นแบบจำลองโมเลกุลที่น่าสนใจอย่างมากที่จะเข้าใจว่าโปรตีนเหล่านี้ออกแรงความเสียหายเยื่อหุ้มในกรณีที่ไม่มีปฏิกิริยา ใช้ myotoxin ครั้งที่สองลักษณะดี Lys49 PLA2 คล้ายคลึงกันจากพิษของ Bothrops ตง, Lomonte และคณะ ระบุเป็นครั้งแรกที่กำหนดโครงสร้างของความเป็นพิษในคล้ายคลึงกัน PLA2.
บนพื้นฐานของความสามารถในการเป็นที่รู้จักกันก่อนหน้านี้ของเฮในการยับยั้งการ myonecrosis เกิดจาก myotoxins PLA2 พื้นฐานจาก Bothrops SP ออกฤทธิ์ (Melo et al., 1993) ผู้เขียน ลักษณะการทำงานร่วมกันระหว่าง heparins ขนาดโมเลกุลที่แตกต่างกันและ myotoxin ครั้งที่สอง พบว่ารูปแบบเฮโมเลกุลเชิงซ้อนกับ myotoxin II ที่เฮ: สารพิษอัตราส่วน 1: 5 และที่ O- และ N- ซัลเฟตของเฮมีบทบาทในการนี้มีผลผูกพัน เปปไทด์สังเคราะห์หลายครอบคลุมลำดับต่าง ๆ ของ myotoxin ครั้งที่สองได้รับการเตรียมความพร้อมและการมีปฏิสัมพันธ์กับเฮได้รับการประเมิน พบว่าเปปไทด์ที่ประกอบไปด้วยสารตกค้าง 115-129 สารพิษ, ประกอบด้วยสารตกค้างไม่ชอบน้ำและประจุบวกก็สามารถที่จะผูกกับเฮและอาจสำคัญกว่าที่จะทำให้เกิดความเป็นพิษในเซลล์บุผนังหลอดเลือด ข้อสังเกตเหล่านี้แสดงให้เห็นว่ายืดดังกล่าวตกค้างอยู่ที่ภูมิภาค C ขั้วของโมเลกุลที่สามารถโต้ตอบด้วยตัวเองและทำให้สับสนเยื่อหุ้มเซลล์ นอกจากนี้ความสามารถในการที่จะยับยั้งเฮ myotoxicity ถูกอธิบายโดยการดำเนินการระหว่างของ glycosaminoglycan นี้กับ cytolytic C- ภูมิภาคขั้ว myotoxin ครั้งที่สอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

lomonte บี โมเรโน , E . A , tarkowski , , แฮนสัน แอลเอ ̊ , Mac - คาราน่า , เอ็ม , 1994 neutralizing และปฏิสัมพันธ์ระหว่าง heparins myotoxin II , ไลซีน 49 phospholipase A2 จาก bothrops โดยใช้พิษงู รหัสของยา และสารพิษ cytolytic ภูมิภาค โดยการใช้สารสังเคราะห์ และแบบจำลองโมเลกุล เจ วท บ วท . เคมี 269 , 29867 – 29873 .
pla2s มี . ในตำแหน่ง 49แทนที่จะขอศึกษา ASP , เป็นคนแรกที่อธิบายไว้ในยุค 80 ในพิษของงู crotaline ต่างๆ ( maraganore et al . , 1984 ) แม้จะมีการเรียกร้องครั้งแรกของเอนไซม์ที่ตกค้างในตัวแปรเหล่านี้มันแสดงให้เห็นว่า lys49 pla2s ขาดฤทธิ์ เพราะตนไม่สามารถผูกแคลเซียมþเป็นโคแฟกเตอร์ที่สำคัญสำหรับกิจกรรม pla2 . แม้ว่าปราศจากเอนไซม์ ,lys49 pla2 ในถูกแสดงเพื่อแสดงความเป็นพิษ โดยเฉพาะ myotoxicity จึงกลายเป็นที่น่าสนใจสูงโมเลกุลแบบเข้าใจว่าโปรตีนเหล่านี้โหมเยื่อหุ้มเซลล์เสียหาย ในกรณีที่ไม่มีปฏิกิริยา การใช้ myotoxin II , ลักษณะผิวดี lys49 pla2 จากพิษของ bothrops asper lomonte , et al . ระบุว่า เป็นครั้งแรกที่ปัจจัยกำหนดโครงสร้างของเซลล์ผิวใน pla2 .
บนพื้นฐานของความสามารถของยาที่รู้จักกันก่อนหน้านี้เพื่อยับยั้งการ myonecrosis เกิดจากพื้นฐาน pla2 ไมโทซินจาก bothrops SP พิษ ( เมโล et al . , 1993 ) , ผู้เขียนลักษณะปฏิสัมพันธ์ระหว่าง heparins ขนาดโมเลกุลที่แตกต่างกันและ myotoxin IIผลการวิจัยพบว่า รูปแบบของ heparin macromolecular เชิงซ้อนที่มี myotoxin II ที่ใส่ยาพิษ : อัตราส่วนโมล 1 : 5 และ O - N - สม็อกของ heparin มีบทบาทในการรวม สารสังเคราะห์ต่าง ๆครอบคลุมลำดับต่าง ๆของ myotoxin II เตรียมและปฏิสัมพันธ์กับยาถูกประเมิน พบว่าเปปไทด์ประกอบด้วยสารตกค้าง 115 – 129 ของสารพิษตั้งขึ้นโดยตกค้าง ) และ cationic ก็สามารถผูกกับเฮปารินและ บางทียิ่ง เพื่อก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์เยื่อบุหลอดเลือดเส้น . สังเกตเหล่านี้แสดงให้เห็นว่ายืดดังกล่าวตกค้างอยู่ในภูมิภาคซึ่งในโมเลกุล โดยตัวเองโต้ตอบ และความระส่ำระสายพลาสมาเมมเบรนของเซลล์ นอกจากนี้ความสามารถของปอดที่จะยับยั้ง myotoxicity ถูกอธิบายโดยระหว่างการกระทำของโชว์มียัวร์เลิฟกับ cytolytic ซี - เทอร์มินอลภูมิภาคของ myotoxin II