K value (as a percentage of the ratio between Ino þ Hx to the total ATP and its degradation products) was determined as
described by Fan et al. (2008) with some modifications. 1 g sample of fish flesh was homogenized with 2 ml of cold (4 C) 10% perchloric acid solution, and centrifuged at 1500 g for 15 min. The sediment was washed with 2 ml of cold 5% perchloric acid solution, centrifuged at 1500 g for 15 min, and the process repeated three times. All the supernatants were collected in a centrifuge tube and pH value was adjusted to 6.4e6.5 using 1 mol/L NaOH. The white crystal was removed by centrifugation (1500 g, 15 min). Then the supernatant was made up to 10 ml with deionized water, filtered through a 0.45 mmmembrane filter and stored in 20 C for further analysis. Adenosine-triphosphate (ATP) and its related compounds
were analyzed by HPLC (Shimadzu LC-10AT series, Japan) equipped with SPD-10A (V) detector, VP-CDSC18 column (4.6 mm i.d. 250 mm, 5 mm). Sample (20 ml) was injected at a flow rate at 1 ml/min, and the peak was detected at 254 nm. The amounts of ATP and its related compounds were determined and calculated based on standard ATP, adenosine diphosphate (ADP), adenosine monophosphate (AMP), inosine monophosphate (IMP), hypoxanthine riboside (HxR) and hypoxanthine (Hx). K value was defined by the following equation
K คุ้มค่า (เป็นเปอร์เซ็นต์ของอัตราส่วนระหว่าง Ino Þ Hx จะรวมเอทีพีและผลิตภัณฑ์ย่อยสลายของตน) ถูกกำหนดเป็น
อธิบายโดยพัดลม, et al (2008) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ตัวอย่าง 1 กรัมของเนื้อปลาทำให้เป็นเนื้อเดียวกันมี 2 มล. เย็น (4? C) 10% สารละลายกรดเปอร์คลอริกและหมุนเหวี่ยงที่ 1,500 กรัมเป็นเวลา 15 นาที ตะกอนถูกล้างด้วย 2 มิลลิลิตรของสารละลายกรดเปอร์คลอริกเย็น 5%, หมุนเหวี่ยงที่ 1,500 กรัมเป็นเวลา 15 นาทีและกระบวนการซ้ำสามครั้ง supernatants ทั้งหมดถูกเก็บไว้ในหลอดและค่า pH centrifuge ค่าปรับ 6.4e6.5 ใช้ 1 mol / L NaOH คริสตัลสีขาวถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยง (1500 กรัม 15 นาที) จากนั้นใสที่ถูกสร้างขึ้นถึง 10 มล. ด้วยน้ำปราศจากไอออนกรองผ่านตัวกรอง 0.45 mmmembrane และเก็บไว้ใน? 20? C สำหรับการวิเคราะห์ต่อ Adenosine-triphosphate (ATP) และสารประกอบที่เกี่ยวข้อง
มาวิเคราะห์โดยวิธี HPLC (ชุด Shimadzu LC-10AT, ญี่ปุ่น) พร้อมกับ SPD-10A (V) ตรวจจับ, VP-CDSC18 คอลัมน์ (4.6 มม ID? 250 มมมม 5) ตัวอย่าง (20 มล.) ได้รับการฉีดที่อัตราการไหลที่ 1 มล. / นาทีและสูงสุดถูกตรวจพบที่ 254 นาโนเมตร จำนวนเงินของรายการเอทีพีและสารประกอบที่เกี่ยวข้องได้รับการพิจารณาและคำนวณตามมาตรฐานเอทีพี adenosine เพท (ADP), โมโนอะดีโนซีน (AMP), โมโน inosine (IMP) hypoxanthine riboside (HXR) และ hypoxanthine (Hx) ค่า K ที่ถูกกำหนดโดยสมการดังต่อไปนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
