Trypan Blue Dye Exclusion AssayCell

Trypan Blue Dye Exclusion Assay
Cell viability was determined by Trypan blue (Invitrogen™, Carlsbad, CA, USA) dye exclusion in order to evaluate the cytotoxic effect induced by extract treatment. HEKa cells were seeded at a density of 6 × 105 cells and MCF-7 were seeded at 106 cells in 35 mm plate in 2 mL of the relative complete medium and treatments were performed when cells reached the 90% of confluence. Treatments and controls were performed as for MTS assay. At the end of treatment, cultures were trypsinized and a sample of cell suspension (20 μL) was mixed with Trypan blue (20 μL; 0.4% dye solution). A Cell Countess system (Invitrogen) was used to count the number of viable and non-viable cells and the percentage viability was calculated. Three independent experiments were performed in triplicate for each treatment and controls with vehicles and medium only.
3.13. Estimation of GJIC by Scrape-Loading Dye Transfer (SL/DT) Assay
GJIC was assessed using the SL/DT technique described by El-Fouly [146]. Cells were seeded at 6 × 105 cells/plate (HEKa) and at 106 cells/plate (MCF-7) in 35 mm cell culture dishes, and incubated at 37 °C and 5% humidified atmosphere. Only cells at 95% confluence were used for the experiments herein, they were incubated with the test compounds (UP, IP and LP fractions) at the two lower tested concentrations in the vitality tests. The incubation with test substances was 30 min, 2 h or 4 h. Controls with only medium or vehicles were included in each experiment. After treatment, the MCF-7 and HEKa cells were rinsed carefully with PBS without Ca2+ Mg2+, and then scraped and incubated with 0.5 mL of 0.1% (w/v) Lucifer Yellow CH (Molecular Probes, Invitrogen), for 3 min. The cells were then washed with PBS and fixed with 4% paraformaldehyde. The distance that Lucifer Yellow had travelled through gap junctions was observed with a laser scanning confocal microscope (Carl Zeiss, Munchen, Germany) and the number of fluorescent cells (cell in communication via gap junctions) was compared with the controls. Six random images were recorded for each plate and means were considered. Three independent experiments for each cell type were performed in triplicate for each treatment and for controls with the vehicles and medium only.
3.14. Laser Scanning Confocal Microscopy
Fresh jellyfish tissues containing symbiont cells were imaged using a Zeiss LSM Pascal confocal microscope excited using a 488 nm (argon) and 543 nm (He–Ne) lasers. Emissions were collected using two detection channels within 505–530 nm (virtual green) and over 560 nm (virtual red) emission. Following spectral mapping of innate cell fluorescence, online profiling was used to image a consistent number of clustered cells in tissues from different jellyfish anatomical portions. The offline tools of confocal microscopy were used to measure the cell and subcellular dimensions.
3.15. Statistical Analysis
Statistical analysis was performed using a Student’s t-test and an analysis of variance (ANOVA) test to analyse any differences in the measured endpoints observed between controls and the treatment groups. In the GJIC assays, these tests were used to analyse fluorescent cell average values. The mean and standard deviation (SD) were calculated for all data.
Mar. Drugs 2013, 11 1753
4. Conclusions
This study revealed that partially characterized fractions of an extract of the zooxanthellate Cotylorhiza tuberculata jellyfish exert antioxidant ability and a cell-specific cytotoxicity against MCF-7 breast cancer cells rather than against non-malignant HEKa cells. The cytotoxicity correlated with an effective enhancement of cell-cell communication mediated by gap junction communication, which may represent one of the targets in the action mechanism of the extract bioactivity. Since the goal for an effective anticancer drug is to prove a cytotoxic selective effect preferentially expressed for cancer cells rather non-malignant cells, we believe the jellyfish C. tuberculata deserves further studies to verify the effects of the extract fractions on additional cell lines. Further studies directed towards the isolation of the active compound(s) and in-depth knowledge on antiproliferative activity and the molecular targets of marine natural compounds may provide valuable information for the development of therapeutic approaches towards new strategies of cancer prevention and control. In this framework, on going work in our laboratory will verify the hypothesis of the role of C. tuberculata extracts as transcriptional activators of connexin proteins.
In several Mediterranean coastal areas, C. tuberculata populations seasonally reach high biomass values. Therefore, our results suggest increased attention should be paid to the jellyfish-algal symbiont consortium of C. tuberculata for its potential as a source of bioactive compounds of nutraceutical and chemopreventive relevance. The exploitation of the jellyfish/algal consortium, occurring with large unexploited biomasses in coastal areas, should be enhanced by promoting new studies towards the complete characterization of the bioactive molecules and their molecular action mechanisms.
More generally, jellyfish biomasses represent a source of pharmacological research largely unexplored and may lead to a future different perception of jellyfish outbreaks in our seas.
Acknowledgments
The research leading to these results has received funding from the European Community’s Seventh Framework Programme (FP7/2007–2013) under Grant Agreement No. 266445 for the project Vectors of Change in Oceans and Seas Marine Life, Impact on Economic Sectors (VECTORS) and by the ENPI CBCMED programme MED-JELLYRISK—Integrated monitoring of jellyfish outbreaks under anthropogenic and climatic impacts in the Mediterranean Sea coastal zones: Trophic and socio-economic risks (Project registration numberI-A/1.3/098).
Conflict of Interest
The authors declare no conflict of interest.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์แยกสี Trypan Blueเซลล์ชีวิตที่ถูกกำหนด โดยแยกสี Trypan blue (Invitrogen ™ คาร์ลส CA, USA) เพื่อประเมินผล cytotoxic เกิดจากสารสกัดรักษา HEKa เซลล์ถูก seeded ที่ความหนาแน่นของเซลล์× 105 6 และ MCF-7 ถูก seeded ที่ 106 เซลล์ในจานขนาด 35 มม.ใน 2 mL กลางสมบูรณ์ญาติ และดำเนินการรักษาเมื่อเซลล์ 90% บรรจบ รักษาและควบคุมได้ดำเนินการสำหรับทดสอบ MTS เมื่อสิ้นสุดการรักษา วัฒนธรรมถูก trypsinized และตัวอย่างของเซลล์ระงับ (20 μL) ถูกผสมกับ Trypan blue (20 μL; 0.4% ย้อมโซลูชัน) ระบบเซลล์เคาน์เต (Invitrogen) ใช้ในการนับจำนวนของเซลล์ทำงานได้ และไม่ทำงาน และชีวิตเปอร์เซ็นต์ไม่ได้ ทดลองอิสระสามได้ดำเนินการใน triplicate สำหรับแต่ละการรักษาและควบคุมยานพาหนะและปานกลางเท่านั้น3.13 การประเมินของ GJIC โดยทดสอบการโหลดครูดย้อมโอน (SL/DT)GJIC was assessed using the SL/DT technique described by El-Fouly [146]. Cells were seeded at 6 × 105 cells/plate (HEKa) and at 106 cells/plate (MCF-7) in 35 mm cell culture dishes, and incubated at 37 °C and 5% humidified atmosphere. Only cells at 95% confluence were used for the experiments herein, they were incubated with the test compounds (UP, IP and LP fractions) at the two lower tested concentrations in the vitality tests. The incubation with test substances was 30 min, 2 h or 4 h. Controls with only medium or vehicles were included in each experiment. After treatment, the MCF-7 and HEKa cells were rinsed carefully with PBS without Ca2+ Mg2+, and then scraped and incubated with 0.5 mL of 0.1% (w/v) Lucifer Yellow CH (Molecular Probes, Invitrogen), for 3 min. The cells were then washed with PBS and fixed with 4% paraformaldehyde. The distance that Lucifer Yellow had travelled through gap junctions was observed with a laser scanning confocal microscope (Carl Zeiss, Munchen, Germany) and the number of fluorescent cells (cell in communication via gap junctions) was compared with the controls. Six random images were recorded for each plate and means were considered. Three independent experiments for each cell type were performed in triplicate for each treatment and for controls with the vehicles and medium only.3.14. Laser Scanning Confocal MicroscopyFresh jellyfish tissues containing symbiont cells were imaged using a Zeiss LSM Pascal confocal microscope excited using a 488 nm (argon) and 543 nm (He–Ne) lasers. Emissions were collected using two detection channels within 505–530 nm (virtual green) and over 560 nm (virtual red) emission. Following spectral mapping of innate cell fluorescence, online profiling was used to image a consistent number of clustered cells in tissues from different jellyfish anatomical portions. The offline tools of confocal microscopy were used to measure the cell and subcellular dimensions.3.15. Statistical AnalysisStatistical analysis was performed using a Student’s t-test and an analysis of variance (ANOVA) test to analyse any differences in the measured endpoints observed between controls and the treatment groups. In the GJIC assays, these tests were used to analyse fluorescent cell average values. The mean and standard deviation (SD) were calculated for all data.Mar. Drugs 2013, 11 17534. ConclusionsThis study revealed that partially characterized fractions of an extract of the zooxanthellate Cotylorhiza tuberculata jellyfish exert antioxidant ability and a cell-specific cytotoxicity against MCF-7 breast cancer cells rather than against non-malignant HEKa cells. The cytotoxicity correlated with an effective enhancement of cell-cell communication mediated by gap junction communication, which may represent one of the targets in the action mechanism of the extract bioactivity. Since the goal for an effective anticancer drug is to prove a cytotoxic selective effect preferentially expressed for cancer cells rather non-malignant cells, we believe the jellyfish C. tuberculata deserves further studies to verify the effects of the extract fractions on additional cell lines. Further studies directed towards the isolation of the active compound(s) and in-depth knowledge on antiproliferative activity and the molecular targets of marine natural compounds may provide valuable information for the development of therapeutic approaches towards new strategies of cancer prevention and control. In this framework, on going work in our laboratory will verify the hypothesis of the role of C. tuberculata extracts as transcriptional activators of connexin proteins.In several Mediterranean coastal areas, C. tuberculata populations seasonally reach high biomass values. Therefore, our results suggest increased attention should be paid to the jellyfish-algal symbiont consortium of C. tuberculata for its potential as a source of bioactive compounds of nutraceutical and chemopreventive relevance. The exploitation of the jellyfish/algal consortium, occurring with large unexploited biomasses in coastal areas, should be enhanced by promoting new studies towards the complete characterization of the bioactive molecules and their molecular action mechanisms.
More generally, jellyfish biomasses represent a source of pharmacological research largely unexplored and may lead to a future different perception of jellyfish outbreaks in our seas.
Acknowledgments
The research leading to these results has received funding from the European Community’s Seventh Framework Programme (FP7/2007–2013) under Grant Agreement No. 266445 for the project Vectors of Change in Oceans and Seas Marine Life, Impact on Economic Sectors (VECTORS) and by the ENPI CBCMED programme MED-JELLYRISK—Integrated monitoring of jellyfish outbreaks under anthropogenic and climatic impacts in the Mediterranean Sea coastal zones: Trophic and socio-economic risks (Project registration numberI-A/1.3/098).
Conflict of Interest
The authors declare no conflict of interest.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทริแพน Assay ยกเว้นย้อมสีฟ้า
มีชีวิตเซลล์ถูกกำหนดโดย Trypan สีฟ้า (Invitrogen ™, คาร์ลส, CA, USA) ยกเว้นสีย้อมเพื่อประเมินผลกระทบที่เป็นพิษที่เกิดจากการรักษาสารสกัดจาก เซลล์ Heka เป็นเมล็ดที่มีความหนาแน่นของ 6 × 105 และเซลล์ MCF-7 เป็นเมล็ดที่ 106 เซลล์ในแผ่น 35 มม 2 มิลลิลิตรของกลางที่สมบูรณ์ญาติและการรักษาได้ดำเนินการเมื่อเซลล์ถึง 90% ของการบรรจบกัน การรักษาและการควบคุมการดำเนินการเช่นเดียวกับการทดสอบเอ็มทีเอ ในตอนท้ายของการรักษาวัฒนธรรมถูก trypsinized และตัวอย่างของเซลล์แขวนลอย (20 ไมโครลิตร) ผสมกับ Trypan สีฟ้า (20 ไมโครลิตร; 0.4% การแก้ปัญหาสีย้อม) ระบบเคานเซลล์ (Invitrogen) ถูกใช้ในการนับจำนวนของเซลล์ที่มีชีวิตและไม่ทำงานได้และมีชีวิตร้อยละที่คำนวณได้ สามทดลองที่เป็นอิสระได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับการรักษาแต่ละคนและการควบคุมที่มียานพาหนะและขนาดกลางเท่านั้น.
3.13 ประมาณ GJIC โดยขูดโหลดโอนย้อม (SL / DT) Assay
GJIC ได้รับการประเมินโดยใช้ SL / เทคนิค DT อธิบาย El-Fouly [146] เซลล์ที่ถูกเมล็ดที่ 6 × 105 เซลล์ / แผ่น (Heka) และ 106 เซลล์ / แผ่น (MCF-7) ใน 35 มมอาหารเพาะเลี้ยงเซลล์และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและ 5% ความชื้นบรรยากาศ เฉพาะเซลล์ที่บรรจบกัน 95% ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองในที่นี้พวกเขาถูกบ่มกับสารทดสอบ (UP, IP และเศษส่วน LP) ที่สองความเข้มข้นของการทดสอบที่ต่ำกว่าในการทดสอบพลัง บ่มกับสารทดสอบ 30 นาที, 2 ชั่วโมงหรือ 4 ชั่วโมง การควบคุมที่มีขนาดกลางเท่านั้นหรือยานพาหนะถูกรวมอยู่ในการทดลองแต่ละ หลังจากการรักษา MCF-7 และเซลล์ Heka ถูกล้างอย่างระมัดระวังกับพีบีเอสโดยไม่ต้อง Ca2 + Mg2 + และคัดลอกและบ่ม 0.5 มิลลิลิตร 0.1% (w / v) ลูซิเฟอร์เหลือง CH (วัดระดับโมเลกุล, Invitrogen) เป็นเวลา 3 นาที เซลล์ถูกล้างแล้วกับพีบีเอสและคงมี 4% paraformaldehyde ระยะทางที่ลูซิเฟอร์เหลืองได้เดินทางผ่านทางแยกช่องว่างเป็นที่สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน confocal (Carl Zeiss, มิวนิค, เยอรมนี) และจำนวนของเซลล์เรืองแสง (มือถือในการสื่อสารผ่านทางแยกช่องว่าง) เมื่อเทียบกับการควบคุม หกสุ่มภาพที่ถูกบันทึกไว้สำหรับแต่ละแผ่นและวิธีการได้รับการพิจารณา สามทดลองที่เป็นอิสระสำหรับประเภทแต่ละเซลล์ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับการรักษาแต่ละคนและสำหรับการควบคุมที่มียานพาหนะและขนาดกลางเท่านั้น.
3.14 เลเซอร์สแกน Confocal กล้องจุลทรรศน์
เนื้อเยื่อแมงกะพรุนสดที่มีเซลล์ symbiont ถูกถ่ายภาพโดยใช้ Zeiss LSM Pascal กล้องจุลทรรศน์ confocal ตื่นเต้นใช้ 488 นาโนเมตร (อาร์กอน) และ 543 นาโนเมตร (เขา-Ne) เลเซอร์ ปล่อยก๊าซเรือนกระจกที่ถูกเก็บรวบรวมโดยใช้สองช่องทางการตรวจสอบภายใน 505-530 นาโนเมตร (สีเขียวเสมือน) และกว่า 560 นาโนเมตร (สีแดงเสมือน) ปล่อยก๊าซเรือนกระจก ต่อไปนี้การทำแผนที่สเปกตรัมของเซลล์เรืองแสงธรรมชาติโปรไฟล์ออนไลน์ได้ถูกใช้ในภาพเป็นจำนวนที่สอดคล้องกันของเซลล์คลัสเตอร์ในเนื้อเยื่อจากแมงกะพรุนที่แตกต่างกันส่วนทางกายวิภาค เครื่องมือแบบออฟไลน์ของกล้องจุลทรรศน์ confocal ถูกนำมาใช้ในการวัดขนาดของเซลล์และ subcellular.
3.15 การวิเคราะห์สถิติ
การวิเคราะห์สถิติที่ดำเนินการโดยใช้นักศึกษา t-test และการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) การทดสอบการวิเคราะห์ความแตกต่างใด ๆ ใน endpoints วัดสังเกตระหว่างตัวควบคุมและกลุ่มการรักษา ในการตรวจ GJIC การทดสอบเหล่านี้ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์ค่าเฉลี่ยเซลล์เรืองแสง ค่าเฉลี่ยและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) จะถูกคำนวณสำหรับข้อมูลทั้งหมด.
มีนาคม ยาเสพติด 2013, 11 1753
4. สรุปผล
การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเศษมีลักษณะเฉพาะบางส่วนของสารสกัดจาก zooxanthellate Cotylorhiza แมงกะพรุนออกแรง tuberculata ความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระและเป็นพิษต่อเซลล์เซลล์ที่เฉพาะเจาะจงกับ MCF-7 เซลล์มะเร็งเต้านมมากกว่ากับเซลล์ Heka ที่ไม่ใช่มะเร็ง พิษมีความสัมพันธ์กับการเพิ่มประสิทธิภาพของการสื่อสารที่มีประสิทธิภาพของเซลล์เซลล์ไกล่เกลี่ยโดยการสื่อสารทางแยกช่องว่างซึ่งอาจจะเป็นหนึ่งในเป้าหมายในการดำเนินการกลไกของสารสกัดชีวภาพ เนื่องจากเป้าหมายสำหรับยาต้านมะเร็งที่มีประสิทธิภาพคือการพิสูจน์พิษผลการเลือกแสดงพิเศษสำหรับเซลล์มะเร็งมากกว่าเซลล์ที่ไม่ร้ายแรงเราเชื่อว่าแมงกะพรุน C. tuberculata สมควรได้รับการศึกษาต่อไปเพื่อตรวจสอบผลกระทบของสารสกัดจากเศษส่วนในเซลล์เพิ่มเติม ศึกษาเพิ่มเติมโดยตรงต่อการแยกสารประกอบที่ใช้งาน (s) และความรู้ในเชิงลึกเกี่ยวกับกิจกรรมการยับยั้งการเจริญและเป้าหมายโมเลกุลของสารธรรมชาติทางทะเลอาจให้ข้อมูลที่มีค่าในการพัฒนาวิธีการรักษาที่มีต่อกลยุทธ์ใหม่ในการป้องกันและควบคุมโรคมะเร็ง ในกรอบนี้จะไปทำงานในห้องปฏิบัติการของเราจะตรวจสอบสมมติฐานของบทบาทของซี tuberculata สารสกัดเป็นตัวกระตุ้นการถอดรหัสของโปรตีน connexin.
ในพื้นที่ชายฝั่งทะเลหลายเมดิเตอร์เรเนียน, C. ประชากร tuberculata ฤดูกาลถึงค่ามวลชีวภาพสูง ดังนั้นผลของเราขอแนะนำให้ความสนใจเพิ่มขึ้นควรจะจ่ายให้สมาคม symbiont แมงกะพรุน-สาหร่ายซี tuberculata สำหรับศักยภาพที่แท้จริงของแหล่งที่มาของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพของความ nutraceutical และ chemopreventive การแสวงหาผลประโยชน์ของสมาคมแมงกะพรุน / สาหร่ายที่เกิดขึ้นกับชีวมวลไมขนาดใหญ่ในพื้นที่ชายฝั่งทะเลควรได้รับการปรับปรุงโดยการส่งเสริมการศึกษาใหม่ที่มีต่อตัวละครที่สมบูรณ์ของโมเลกุลออกฤทธิ์ทางชีวภาพและกลไกการกระทำของพวกเขาในระดับโมเลกุล.
มากกว่าปกติชีวมวลแมงกะพรุนเป็นตัวแทนของแหล่งที่มาของการวิจัยทางเภสัชวิทยา ส่วนใหญ่ยังมิได้สำรวจและอาจนำไปสู่การรับรู้ที่แตกต่างกันในอนาคตของการระบาดของแมงกะพรุนในทะเลของเรา.
กิตติกรรมประกาศ
งานวิจัยที่นำไปสู่ผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับเงินทุนจากกรอบที่เจ็ดของประชาคมยุโรปโครงการ (FP7 / 2007-2013) ภายใต้ข้อตกลงฉบับที่แกรนท์ 266445 สำหรับโครงการ เวกเตอร์ของการเปลี่ยนแปลงในมหาสมุทรและทะเล Marine Life, ผลกระทบต่อภาคเศรษฐกิจ (VECTORS) และ ENPI CBCMED โปรแกรมตรวจสอบ Med-JELLYRISK-แบบบูรณาการของการระบาดของแมงกะพรุนภายใต้ผลกระทบต่อมนุษย์และสภาพภูมิอากาศในทะเลเมดิเตอร์เรเนียนชายฝั่ง: ชั้นและความเสี่ยงทางเศรษฐกิจและสังคม (โครงการลงทะเบียน numberI-A / 1.3 / 098).
ความขัดแย้งที่น่าสนใจ
ผู้เขียนได้ประกาศความขัดแย้งไม่มี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไตรแพนสีฟ้าสียกเว้นการทดสอบ
เซลล์ถูกกำหนดจากไตรแพนสีฟ้า ( Invitrogen ™ Carlsbad , CA , USA ) ยกเว้นย้อมเพื่อประเมินความเป็นพิษต่อสารสกัดจากผลที่เกิดจากการรักษาheka เซลล์มีเมล็ดในอัตราความหนาแน่น 6 × 105 เซลล์และ mcf-7 ถูก seeded ที่ 106 เซลล์ในจาน 35 มม. 2 ml ของญาติสมบูรณ์ปานกลาง และการทดลองปฏิบัติ เมื่อเซลล์ถึง 90% ของการบรรจบกัน การรักษาและการควบคุมการปฏิบัติสำหรับแพทย์ ตามลำดับ ในตอนท้ายของการรักษาวัฒนธรรมเป็น trypsinized และตัวอย่างเซลล์แขวนลอย ( 20 μลิตร ) ผสมกับไตรแพนสีฟ้า ( 20 μ l ; สารละลายสี 0.4% ) ระบบเคาน์เตสเซลล์ ( Invitrogen ) ใช้นับจำนวนเซลล์ได้และไม่ได้ และร้อยละ 1 คือการคำนวณ 3 การทดลองอิสระมีการปฏิบัติทั้งสามใบสำหรับแต่ละการรักษาและการควบคุมรถและขนาดกลางเท่านั้น
3.13 .การประมาณ gjic โดยขูดโหลดการย้อม ( SL / dt ) (
gjic ประเมินใช้ SL / DT เทคนิคอธิบายไว้โดย El fouly [ 146 ] เซลล์ถูก seeded 6 × 105 เซลล์ / แผ่น ( heka ) และที่ 106 เซลล์ / แผ่น ( mcf-7 35 มม. ) ในเซลล์วัฒนธรรมอาหารและบ่มที่ 37 ° C และ 5% humidified บรรยากาศ เซลล์ที่ 95% บรรจบนำมาทดลองในที่นี้พวกเขาถูกบ่มกับสารทดสอบ ( IP และ LP เศษส่วน ) ที่ลดความเข้มข้นของพลังสองทดสอบการทดสอบ บ่มเพาะกับสารทดสอบ 30 นาที 2 ชั่วโมง หรือ 4 ชั่วโมง การควบคุมปานกลางเท่านั้น หรือยานพาหนะที่ใช้ในแต่ละการทดลอง หลังจากการรักษา mcf-7 heka cells และล้างอย่างระมัดระวังด้วย PBS ปราศจากแคลเซียม mg2 แล้วนำไปบ่มด้วย 05 ml 0.1% ( w / v ) ลูซิเฟอร์สีเหลือง CH ( โมเลกุลโพรบ Invitrogen , ) เป็นเวลา 3 นาที เซลล์แล้วล้างด้วย pbs และแก้ไขด้วย 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์ . ระยะทางที่ได้เดินทางผ่านช่องว่างทางลูซิเฟอร์สีเหลืองสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ด้วยเลเซอร์ ( Carl Zeiss Munchen , ,เยอรมนี ) และจำนวนเซลล์เรืองแสง ( เซลล์ในการสื่อสารผ่านทางช่องว่างทางแยก ) คือเมื่อเทียบกับการควบคุม . หกภาพแบบสุ่มที่ถูกบันทึกไว้สำหรับแต่ละจาน และวิธีการพิจารณาด้วย 3 การทดลองอิสระสำหรับเซลล์แต่ละชนิดมีการปฏิบัติทั้งสามใบสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง และการควบคุมด้วยยานพาหนะและขนาดกลางเท่านั้น .
3.14 . การสแกนกล้องจุลทรรศน์
ด้วยเลเซอร์สดแมงกะพรุนเนื้อเยื่อที่มีเซลล์มี symbiont อื่นๆใช้ Zeiss และปาสคาลด้วยกล้องจุลทรรศน์ตื่นเต้นใช้ 488 nm ( อาร์กอน ) และ 543 nm ( เขา ( NE ) เลเซอร์ การใช้สองช่องทางภายในการตรวจหาจำนวน 505 – 530 nm ( เสมือนสีเขียว ) และกว่า 560 nm ( เสมือนสีแดง ) ออกมา ตามแผนที่ของสเปกตรัมของการเรืองแสงของเซลล์ innateออนไลน์การใช้ภาพตัวเลขที่สอดคล้องกันของกลุ่มเซลล์ในเนื้อเยื่อจากแมงกะพรุนที่แตกต่างกันสำหรับส่วน ออฟไลน์เครื่องมือด้วยกล้องจุลทรรศน์ที่ใช้ในการวัดขนาดของเซลล์และตําแหน่งภายในเซลล์ .
3.15 .
สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลวิเคราะห์โดยใช้ t-test นักเรียนและการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) การทดสอบเพื่อวิเคราะห์ความแตกต่างในวัดช่วยสังเกตระหว่างการควบคุมและกลุ่ม ใน gjic ตรวจ ผลตรวจวิเคราะห์เซลล์เรืองแสง เฉลี่ยค่า ค่าเฉลี่ย และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD ) ได้ให้ข้อมูล ยา
มี.ค. 2013 , 11 1144
4ผลการศึกษาพบว่า ลักษณะ
บางส่วน ส่วนสารสกัดจาก zooxanthellate cotylorhiza tuberculata แมงกะพรุนใช้ความสามารถต้านออกซิเดชันและเซลล์เฉพาะพิษต่อเซลล์มะเร็งเต้านม mcf-7 มากกว่ากับ heka ปลอดมะเร็งเซลล์มะเร็งมีความสัมพันธ์กับการส่งเสริมประสิทธิภาพของการสื่อสารผ่านสื่อกลาง astrocytoma โดยการสื่อสารช่องว่างรอยต่อ ซึ่งอาจเป็นตัวแทนของเป้าหมายในการดำเนินการกลไกของสารสกัดทางชีวภาพ . เนื่องจากเป้าหมายสำหรับยาต้านมะเร็งที่มีประสิทธิภาพคือการเลือกแสดงผลพิสูจน์ความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง preferentially ค่อนข้างไม่มะเร็งเซลล์เราเชื่อว่า แมงกะพรุน ซี. tuberculata สมควรศึกษาเพิ่มเติมตรวจสอบผลของการแยกเศษส่วนเซลล์เพิ่มเติมการศึกษาต่อโดยตรงต่อการแยกสารประกอบที่ใช้งาน ( s ) และความรู้เชิงลึกเกี่ยวกับกิจกรรมการเกิดอนุมูลอิสระเป้าหมายโมเลกุลของสารประกอบธรรมชาติทางทะเลที่อาจให้ข้อมูลที่มีคุณค่าในการพัฒนาวิธีการรักษาที่มีต่อกลยุทธ์ใหม่ของการป้องกันโรคมะเร็งและการควบคุม ในกรอบนี้ไปทำงานในห้องปฏิบัติการของเราจะตรวจสอบสมมติฐานในบทบาทของ tuberculata particle แยกเป็นสารโปรตีนคอนเน็กซิน .
ในหลายพื้นที่ชายฝั่งเมดิเตอร์เรเนียน ประชากรค . tuberculata ฤดูกาลถึงมวลชีวภาพสูงค่า ดังนั้นจากผลการศึกษาเพิ่มขึ้น ควรให้ความสนใจกับแมงกะพรุนสาหร่าย symbiont กลุ่ม Ctuberculata สำหรับศักยภาพเป็นแหล่งของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสถานการและความเกี่ยวข้อง การใช้ประโยชน์ของแมงกะพรุน / สาหร่ายกลุ่มที่เกิดขึ้นมีขนาดใหญ่มูลค่าหาเปรียบไม่ได้ BIOMASSES ในพื้นที่ชายฝั่งทะเล ควรปรับปรุง โดยส่งเสริมการศึกษาใหม่ที่มีคุณสมบัติที่สมบูรณ์ของโมเลกุลทางชีวภาพและกลไกของการกระทำของโมเลกุล
มากขึ้นโดยทั่วไปแมงกะพรุน BIOMASSES เป็นตัวแทนของแหล่งที่มาของการวิจัยทางเภสัชวิทยาไป unexplored และอาจนำไปสู่การรับรู้ที่แตกต่างกันในอนาคตของแมงกะพรุนระบาดในทะเลของเรา ขอบคุณ

เพื่อนำไปสู่ผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับทุนจากโครงการกรอบที่เจ็ดประชาคมยุโรป ( fp7 / 2007 – 2013 ) ภายใต้ข้อตกลงไม่ แกรนท์266445 สำหรับโครงการเปลี่ยนแปลงในมหาสมุทรและทะเลเวกเตอร์ชีวิตทางทะเล ผลกระทบต่อภาคเศรษฐกิจ ( เวกเตอร์ ) และโดย enpi cbcmed ด้วยโปรแกรม jellyrisk บูรณาการการระบาดและผลกระทบภายใต้ภูมิอากาศ anthropogenic แมงกะพรุนในทะเลเมดิเตอร์เรเนียนชายฝั่งโซน : อันดับความเสี่ยง เศรษฐกิจและสังคม ( โครงการลงทะเบียน numberi-a / 1.3 / 098 ) .
ความขัดแย้งของผลประโยชน์
ผู้เขียนประกาศไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์