Protein Characterization. The lytic

Protein Characterization.
The lytic activities of lysozymes were analyzed by light scattering assays as previously described. Commercially sourced human lysozyme (Sigma, USA) and hen egg white lysozyme (Fisher Scientific, USA) were used as controls. Kinetic assays used 300 μg/mL M. luteus and 14 nM enzymes in a 100 mM KHPO4 buffer, pH 6.0. The plates were assessed for a decrease in absorbance at 450 nm over 30 min on a Spectra Max 190 plate reader at 25 °C, and specific rates were calculated from the initial linear portion of the curve. Pseudo Michaelis−Menten kinetics were assessed at four different substrate concentrations (50, 100, 200, and 400 μg/ mL M. luteus) with 14 nM enzymes in 100 mM KHPO4, pH 6.0. The parameters Km, Vmax, and Vmax/Km were calculated by nonlinear regression using Prism version 5.0 (GraphPad Software Inc., USA). Ki values were accessed by measuring the specific activities (using 300 μg/mL M. luteus and 14 nM enzymes in 100 mM KHPO4, pH 6.0) in the presence of Ivyc, E.coli MliC,and P. aeruginosa Ivyp at concentrations varying from 0 to15 μM. Ki was computed by
nonlinear regression with eq 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีนจำแนก กิจกรรมของ lysozymes lytic ถูกวิเคราะห์ โดยแสง scattering assays อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ Lysozyme มนุษย์ในเชิงพาณิชย์จากแหล่ง (ซิก สหรัฐอเมริกา) และไก่ไข่ขาว lysozyme (Fisher วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้เป็นตัวควบคุม Assays เดิม ๆ ใช้ 300 μg/mL M. luteus และ 14 nM เอนไซม์ในบัฟเฟอร์ 100 มม. KHPO4 ค่า pH 6.0 แผ่นถูกประเมินลดลง absorbance ที่ 450 nm 30 นาทีบนเครื่องอ่านแผ่น 190 แรมสเป็คตราสูงสุดที่ 25 ° C และราคาเฉพาะคำนวณได้จากส่วนที่เส้นเริ่มต้นของเส้นโค้ง จลนพลศาสตร์ Michaelis−Menten หลอกถูกประเมินที่ความเข้มข้นแตกต่างกันพื้นผิวสี่ (50, 100, 200 และ 400 μg / mL M. luteus) กับเอนไซม์ nM 14 มม. 100 KHPO4 ค่า pH 6.0 มีคำนวณพารามิเตอร์ Km, Vmax และ Vmax/Km โดยถดถอยไม่เชิงเส้นที่ใช้ปริซึมรุ่น 5.0 (GraphPad ซอฟต์แวร์ Inc., USA) ค่า Ki ถูกเข้าถึง โดยการวัดกิจกรรมเฉพาะ (ใช้ที่ 300 μg/mL M. luteus และเอนไซม์ nM 14 มม. 100 KHPO4 ค่า pH 6.0) ในต่อหน้าของ Ivyc ระบบ MliC และ P. aeruginosa Ivyp ที่ความเข้มข้นที่แตกต่างจาก 0 to15 μM กี่ถูกคำนวณโดยถดถอยไม่เชิงเส้นมี 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลักษณะโปรตีน.
กิจกรรม lytic ของ lysozymes มาวิเคราะห์โดยการตรวจกระเจิงแสงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ไลโซไซม์ที่มาของมนุษย์ในเชิงพาณิชย์ (ซิกม่าสหรัฐอเมริกา) และไก่ไข่สีขาวไลโซไซม์ (ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม การวิเคราะห์การเคลื่อนไหวที่ใช้ 300 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเมตร luteus และเอนไซม์ 14 นาโนเมตรในบัฟเฟอร์ 100 มิลลิ KHPO4 ค่า pH 6.0 แผ่นได้รับการประเมินการลดการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรกว่า 30 นาที Spectra อ่านแผ่นแม็กซ์ 190 ที่ 25 ° C และอัตราที่เฉพาะเจาะจงจะถูกคำนวณจากส่วนเชิงเส้นเริ่มต้นของเส้นโค้ง จลนศาสตร์ Pseudo Michaelis-Menten มีการประเมินที่สี่ความเข้มข้นของสารตั้งต้นที่แตกต่างกัน (50, 100, 200, และ 400 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร M. luteus) ด้วยเอนไซม์ 14 นาโนเมตรใน 100 มิลลิ KHPO4 ค่า pH 6.0 พารามิเตอร์กิโลเมตร, Vmax และ Vmax / กิโลเมตรจะถูกคำนวณโดยการถดถอยเชิงเส้นโดยใช้ปริซึมรุ่น 5.0 (GraphPad ฟแวร์อิงค์สหรัฐอเมริกา) ค่า Ki ถูกเข้าถึงได้โดยการวัดกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง (ใช้ 300 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร M. luteus และเอนไซม์ 14 นาโนเมตรใน 100 มิลลิ KHPO4 ค่า pH 6.0) ในการปรากฏตัวของ Ivyc, E.coli MliC และพี aeruginosa Ivyp ที่ระดับความเข้มข้นที่แตกต่างจาก 0 ถึง 15 ไมครอน กิได้รับการคำนวณโดย
การถดถอยเชิงเส้นที่มีอีคิว 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษากิจกรรมของเอนไซม์โปรตีน .
lysozymes วิเคราะห์โดยการกระจายแสง ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ เชิงพาณิชย์ที่มามนุษย์ไลโซไซม์ ( Sigma , USA ) และไข่ขาวไลโซไซม์ ( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , USA ) ที่ใช้ควบคุม 1 ) ใช้ 300 เมตร luteus μ g / ml และ 14 nm เอนไซม์ใน 100 มม. khpo4 บัฟเฟอร์ pH 6.0 .แผ่นจะถูกประเมินสำหรับการลดลงในค่า 450 nm กว่า 30 นาที ในช่วงสูงสุด 190 แผ่นอ่าน 25 °องศาเซลเซียสและอัตราเฉพาะคำนวณจากส่วนที่เส้นเริ่มต้นของเส้นโค้ง บริษัท เวสเทิร์น หลอกมาก menten จลนศาสตร์มีการประเมิน 4 ความเข้มข้นตั้งต้นที่แตกต่างกัน ( 50 , 100 , 200 และ 400 เมตร luteus μ g / ml ) กับ 14 นาโนเมตรเอนไซม์ใน khpo4 100 มม. ที่ pH 6.0 . พารามิเตอร์กิโลเมตรVmax และ Vmax / km ) คำนวณโดยการถดถอยแบบไม่เชิงเส้นโดยใช้ปริซึม ( graphpad รุ่น 5.0 ซอฟต์แวร์ Inc . , USA ) คีค่ามีการเข้าถึงได้โดยวัดกิจกรรมเฉพาะ ( ใช้ 300 เมตร luteus μ g / ml และ 14 nm เอนไซม์ใน khpo4 100 มม. ที่ pH 6.0 ) ในการแสดงตนของ ivyc E.coli mlic และ P . aeruginosa , ivyp ที่ความเข้มข้นแตกต่างจาก 0 to15 μม. กิถูกคำนวณโดย
การถดถอยเชิงเส้นกับ EQ 1