2. Materials and methods2.1. Bacter

2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains and cell suspension
S. Senftenberg KVCC 0590 and S. Tennessee KVCC 0592 were obtained from the Korea Veterinary Culture Collection (KVCC; Anyang, Republic of Korea) and S. Typhimurium DT 104 was obtained from the bacteria culture collection of Seoul National University (Seoul, Republic of Korea) for this study. Stock cultures were prepared by mixing 0.7 ml of cultures grown in tryptic soy broth (TSB; Difco, BD, Sparks, MD) for 24 h at 37 °C with 0.3 ml of sterile 50 % (v/v) glycerol and kept frozen at –80 °C. Working cultures were streaked onto tryptic soy agar (TSA; Difco, BD), incubated at 37 °C for 24 h and stored at 4 °C. Each strain of S. Senftenberg, S. Typhimurium, and S. Tennessee was cultured in 5 ml TSB at 37 °C for 24 h, harvested by centrifugation at 4000 × g for 20 min at 4 °C, and washed three times with sterile 0.2 % peptone water (PW; Bacto, Sparks, MD). The final pellets were resuspended in sterile 0.2 % PW, corresponding to approximately 108-109 CFU/ml.
2.2. Sample preparation and inoculation
Experiments were performed using commercially processed creamy peanut butter purchased at a local grocery store (Seoul, Republic of Korea) and stored at room temperature (22 ± 1 °C). The composition of the peanut butter (in the order listed on the product label) consisted of roasted peanuts, sugar, hydrogenated vegetable oil (cottonseed, soybean and rapeseed oil) and salt. The nutrition facts label indicated 16 g of fat, 7 g of protein, 6 g of total carbohydrate and 150 mg of sodium per each 32 g serving. Thirty g samples of peanut butter were aseptically placed in sterile 100 ml Pyrex glass beakers. For inoculation, 0.3 ml of culture was added to each sample and thoroughly mixed for 2 min with a sterile spoon to ensure even distribution of the pathogen. Uniform distribution of inoculum was confirmed by similar log CFU counts (log 5 – 6 CFU/g) on xylose lysine desoxycholate agar (XLD; Difco) that were obtained from 1 g sub-samples of inoculated peanut butter taken from three randomly selected locations. After inoculation, approximately 5 g was removed to obtain 25 g of inoculated sample. Water activity of inoculated peanut butter was 0.26 and pH was 5.99. Aw and pH were measured by an Aqualab model 4TE aw meter (Decagon Devices, Pullman, WA) and a pH meter (Mettler-Toledo, Switzerland).
2.3. Microwave heating treatment
microwave treatment was performed in a previously described apparatus (Sung and Kang, 2014). For treatment, 25 g of peanut butter (adjusted to aw = 0.26 with addition of sterile distilled water) was placed in a 100 ml Pyrex beaker. For the inactivation study, an inoculated sample-filled beaker was placed at the center of the turntable inside the cavity and subjected to microwave heating at 3 different power levels (2, 4, and 6 kW) for up to 5 min. For temperature measurements, the geometric center temperature of a non-inoculated sample in a beaker was measured with a fiber optic sensor (FOT-L; FISO Technologies Inc., Quebec, Canada) connected to a signal conditioner (TMI-4; FISO Technologies Inc., Quebec, Canada). To assess quality changes during microwave heating, non-inoculated sample-filled beakers were treated with microwave heating at 3 different power levels (2, 4, and 6 kW) for 5 min.
2.4. Bacterial enumeration
After microwave heating treatment, 25 g of sample was mixed with 50 ml of 0.2 % PW pre-chilled in ice-water to rapidly cool the sample, thus reducing the effect of residual heat. Then, the sample and 0.2 % PW mixture was diluted with 175 ml of sterile 0.2 % PW and homogenized for 2 min in a stomacher (EASY MIX, AES Chemunex, Rennes, France). After homogenization, 1 ml aliquots of homogenized samples were ten-fold serially diluted in 9 ml of sterile 0.2 % PW, and 0.1 ml of sample or diluent was spread-plated onto XLD for the enumeration of S. Senftenberg, Typhimurium, and Tennessee. Where low populations of surviving cells were anticipated, 1 ml aliquots of the original homogenate were equally distributed between four plates and spread-plated. All plates were incubated at 37 °C for 24 h and colonies were counted. Experiments were conducted three times.
2.5. Acid value, Peroxide value and Color measurement
After 5 min of microwave heating treatment, the acid and peroxide values of peanut butter were measured as indicators of lipid oxidation. Acid value titrations were determined according to the American Oil Chemists' Society (AOCS) Cd 3d-63 (1998). Peroxide values were determined by iodometric titration according to AOCS Ja 8-87 (2009). Acid value is milligrams of potassium hydroxide necessary to neutralize the free acid in 1 g of sample and peroxide value is the amount of peroxide oxygen per 1 kg of sample. Also, Hunter’s color values (L, a and b) were measured using a Minolta colorimeter (model CR300, Minolta Co., Osaka, Japan) after 5 min of microwave heating. Untreated samples were used as controls. L, a, and b values indicate color lightness, redness, and yellowness of the sample, respectively. Experiments were conducted three times.
2.6. Statistical analysis
All data were analyzed by one-way ANOVA using the Statistical Analysis System (SAS Institute, Cary, NC, USA) and Duncan`s multiple range test to determine if there were significant differences (P < 0.05) in mean values. Microbial counts were transformed to log10 values prior to analysis

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์และระงับเซลล์S. Senftenberg KVCC 0590 และ S. เทนเนสซี KVCC 0592 ได้รับมาจากเกาหลีรับรองวัฒนธรรมชุด (KVCC อัน เกาหลี) และ S. Typhimurium DT 104 ได้รับจากการรวบรวมวัฒนธรรมที่แบคทีเรียของมหาวิทยาลัยแห่งชาติโซล (โซล เกาหลี) สำหรับการศึกษานี้ วัฒนธรรมที่หุ้นถูกเตรียม โดยผสม 0.7 ml ของวัฒนธรรมที่ปลูกถั่วเหลือง tryptic ซุป (TSB Difco, BD สปาร์ค MD) ใน 24 h ที่ 37 ° C ด้วย 0.3 ml ของกลีเซอร 50% (v/v) ที่ผ่านการฆ่าเชื้อ และเก็บไว้แช่แข็งที่ –80 องศาเซลเซียส วัฒนธรรมการทำงานขึ้นลายลงบนถั่วเหลือง tryptic agar (TSA Difco, BD), incubated ที่ 37 ° C ใน 24 ชม และจัดเก็บที่ 4 องศาเซลเซียส ต้องใช้แต่ละ S. Senftenberg, s ได้ Typhimurium และ เทนเนสซี s ได้ถูกอ่างใน 5 ml TSB ที่ 37 ° C ใน 24 h เก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 4000 × g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C และล้างสามครั้งน้ำกอซ 0.2% peptone (PW Bacto สปาร์ค MD) ขี้สุดท้ายถูก resuspended ในกอซ 0.2% PW ที่สอดคล้องกับประมาณ 108-109 CFU/ml2.2. ตัวอย่างการเตรียมและ inoculationทดลองได้ดำเนินการโดยใช้การประมวลผลในเชิงพาณิชย์ครีมถั่วลิสงเนยซื้อที่ร้านค้าร้านขายของชำท้องถิ่น (โซล เกาหลี) และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (22 ± 1 ° C) ส่วนประกอบของเนยถั่วลิสง (ในใบสั่งที่แสดงบนฉลากผลิตภัณฑ์) ประกอบด้วยถั่วลิสง น้ำตาล น้ำมันพืช hydrogenated (ดัด ถั่วเหลือง และน้ำมันเมล็ดต้น) และเกลือ ป้ายชื่อข้อมูลโภชนาการระบุ 16 g ของไขมัน 7 g ของโปรตีน 6 กรัม ของคาร์โบไฮเดรตทั้งหมด และ 150 มิลลิกรัมของโซเดียมต่อบริการแต่ละ 32 กรัม ตัวอย่าง 30 กรัมเนยถั่วลิสง aseptically ไว้ใน beakers แก้ว Pyrex 100 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อ สำหรับ inoculation, 0.3 ml ของวัฒนธรรมถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละอย่าง และอย่างละเอียดผสมใน 2 นาทีกับช้อนใส่ให้การศึกษากระจายได้ กระจายสม่ำเสมอของ inoculum ถูกยืนยัน โดยนับ CFU ล็อกคล้าย (ล็อก 5 – 6 CFU/g) xylose ไลซีน desoxycholate agar (XLD Difco) ที่ได้รับมาจากตัวอย่างย่อย 1 g inoculated เนยถั่วลิสงที่นำมาจากสามแบบสุ่มเลือกตำแหน่งที่ตั้ง หลังจาก inoculation ประมาณ 5 กรัมถูกเอารับ 25 กรัมของตัวอย่าง inoculated กิจกรรมน้ำเนยถั่วลิสง inoculated ถูก 0.26 และ pH 5.99 กม. และ pH ที่วัด โดยมี Aqualab รุ่น 4TE กม. เมตร (Decagon อุปกรณ์ พูลแมน WA) และเครื่องวัด pH (Mettler Toledo สวิตเซอร์แลนด์)2.3 การบำบัดความร้อนไมโครเวฟรักษาไมโครเวฟที่ดำเนินการในเครื่องมือที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Sung และกัง 2014) การรักษา ถั่วลิสงเนย 25 กรัม (ปรับกม. = 0.26 บวกน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ) ถูกวางลงในบีกเกอร์ Pyrex เป็น 100 ml การศึกษายกเลิกการเรียก บีกเกอร์สำหรับ inoculated ตัวอย่างกรอกข้อมูลไว้ที่ศูนย์กลางของการหมุนภายในโพรง และการไมโครเวฟที่ความร้อนระดับพลังงานแตกต่างกัน 3 (2, 4 และ 6 กิโลวัตต์) สำหรับถึง 5 นาที สำหรับการวัดอุณหภูมิ อุณหภูมิจุดศูนย์กลางของตัวอย่างที่ไม่ใช่ inoculated ในบีกเกอร์ถูกวัดกับแบบไฟเบอร์ออปติกเซนเซอร์ (FOT-L FISO เทคโนโลยี Inc. ควิเบก แคนาดา) เชื่อมต่อกับการปรับสัญญาณ (TMI-4 FISO เทคโนโลยีอิงค์ ควิเบก แคนาดา) เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงคุณภาพระหว่างไมโครเวฟเครื่องทำความร้อน ไม่ inoculated beakers กรอกตัวอย่างได้รับการรักษา ด้วยไมโครเวฟที่ความร้อนที่ใช้พลังงานแตกต่างกัน 3 ระดับ (2, 4 และ 6 กิโลวัตต์) สำหรับ 5 นาที2.4. แบคทีเรียการแจงนับหลังจากบำบัดความร้อนไมโครเวฟ 25 กรัมของตัวอย่างถูกผสมกับ 50 ml ของ PW ก่อนแช่ในน้ำแข็งให้เย็นตัวอย่าง อย่างรวดเร็วช่วยลดผลของความร้อนที่เหลือ 0.2% แล้ว ตัวอย่างและ 0.2% ผสม PW ถูกผสมกับ 175 ml ของกอซ 0.2% PW และ homogenized เป็นกลุ่มสำหรับ 2 นาทีในแผงประดับหน้าอก (ผสมง่าย AES Chemunex แรนส์ ฝรั่งเศส) หลัง homogenization, 1 ml aliquots homogenized เป็นกลุ่มตัวอย่าง ten-fold serially แตกออกใน 9 ml ของกอซ 0.2% PW และ 0.1 มล.ของตัวอย่างหรือ diluent ถูกมาชุบบน XLD สำหรับการแจงนับ ของ S. Senftenberg, Typhimurium เทนเนสซี ถูกคาดว่าประชากรต่ำของรอดเซลล์ aliquots 1 ml ของ homogenate เดิมได้กระจายระหว่างสี่แผ่นเท่า ๆ กัน และแพร่กระจายชุบ แผ่นทั้งหมดถูก incubated ที่ 37 ° C ใน 24 ชม และอาณานิคมถูกนับ ได้ดำเนินการทดลอง 3 ครั้ง2.5 ค่ากรด ค่าเพอร์ออกไซด์ และวัดสีหลังจาก 5 นาทีของไมโครเวฟที่ความร้อนรักษา ค่าเปอร์ออกไซด์ และกรดของเนยถั่วลิสงถูกวัดเป็นตัวบ่งชี้ของการเกิดออกซิเดชันของไขมัน Titrations ค่ากรดถูกกำหนดตามสังคมของนักเคมีน้ำมันอเมริกัน (AOCS) ซีดี 3d-63 (1998) ค่าเปอร์ออกไซด์ถูกกำหนด โดยการไทเทรต iodometric ตาม AOCS Ja 8-87 (2009) Milligrams ของโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ที่ต้องแก้กรดอิสระใน 1 กรัมของตัวอย่างมีค่ากรด และค่าเปอร์ออกไซด์คือ จำนวนของเปอร์ออกไซด์ออกซิเจนต่อ 1 กิโลกรัมของตัวอย่าง ยัง ค่าสีของฮันเตอร์ (L แบบ และ b) ถูกวัดโดยใช้เครื่อง Minolta (รุ่น CR300, Minolta Co. โอซาก้า ญี่ปุ่น) หลัง 5 นาทีของไมโครเวฟที่ความร้อน ตัวอย่างที่ไม่ถูกรักษาถูกใช้เป็นตัวควบคุม L, a และ b ค่าบ่งชี้ความสว่างสี แดง และ yellowness ของตัวอย่าง ตามลำดับ ได้ดำเนินการทดลอง 3 ครั้ง2.6. สถิติวิเคราะห์มีวิเคราะห์ข้อมูลทั้งหมด โดยใช้ระบบการวิเคราะห์ทางสถิติ (SAS สถาบัน แครีแกรนต์ NC, USA) การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว และดันแคนในหลายช่วงทดสอบเพื่อดูถ้ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.05) ค่าเฉลี่ย การตรวจนับจุลินทรีย์ถูกแปลงค่า log10 ก่อนวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียและเซลล์ระงับเอส
Senftenberg KVCC 0590 และเอสเทนเนสซี KVCC 0592 ที่ได้รับจากเกาหลีสัตวแพทย์วัฒนธรรมสะสม (KVCC; Anyang สาธารณรัฐเกาหลี) และ S. Typhimurium DT 104 ที่ได้รับจากคอลเลกชันวัฒนธรรมแบคทีเรียของมหาวิทยาลัยแห่งชาติโซล (โซลสาธารณรัฐเกาหลี) การศึกษาครั้งนี้ วัฒนธรรมหุ้นได้จัดทำขึ้นโดยการผสม 0.7 มล. ของวัฒนธรรมที่ปลูกใน tryptic น้ำซุปถั่วเหลือง (TSB; Difco, BD, ปาร์กส์, MD) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส 0.3 มิลลิลิตรผ่านการฆ่าเชื้อ 50% (v / v) กลีเซอรอลและเก็บแช่แข็งที่ -80 ° C วัฒนธรรมการทำงานที่ได้รับลายลงบนถั่วเหลือง tryptic วุ้น (TSA; Difco, BD) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส แต่ละสายพันธุ์ของเอส Senftenberg เอส Typhimurium และเอสเทนเนสซีเป็นที่เลี้ยงใน 5 มล. TSB ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง, เก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและล้างสามครั้งที่มีการฆ่าเชื้อ น้ำเปปโตน 0.2% (PW; Bacto ประกาย, MD) เม็ดสุดท้ายถูก resuspended ในการฆ่าเชื้อ 0.2% PW สอดคล้องกับประมาณ 108-109 CFU / มล.
2.2 การเตรียมตัวและการให้วัคซีนทดลองดำเนินการโดยใช้การประมวลผลในเชิงพาณิชย์ครีมเนยถั่วลิสงซื้อได้ที่ร้านขายของชำในท้องถิ่น (โซลสาธารณรัฐเกาหลี) และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (22 ± 1 ° C)
องค์ประกอบของเนยถั่วลิสง (ในคำสั่งที่ระบุไว้บนฉลากผลิตภัณฑ์) ประกอบด้วยถั่วลิสงคั่ว, น้ำตาล, น้ำมันพืชเติมไฮโดรเจน (ฝ้ายน้ำมันถั่วเหลืองและเรพซีด) และเกลือ ฉลากโภชนาการที่ระบุไว้ 16 กรัมของไขมัน 7 กรัมโปรตีน 6 กรัมคาร์โบไฮเดรตรวมและ 150 มิลลิกรัมของโซเดียมละ 32 กรัมให้บริการ สามสิบตัวอย่างกรัมเนยถั่วลิสงถูกวางไว้ในการฆ่าเชื้อปลอดเชื้อ 100 มล. Pyrex บีกเกอร์แก้ว สำหรับการฉีดวัคซีน 0.3 มล. ของวัฒนธรรมถูกบันทึกอยู่ในแต่ละตัวอย่างและผสมเป็นเวลา 2 นาทีด้วยช้อนผ่านการฆ่าเชื้อเพื่อให้แน่ใจว่าการกระจายของเชื้อโรค การกระจายชุดของเชื้อได้รับการยืนยันโดยการเข้าสู่ระบบที่คล้ายกันนับโคโลนี (log 5-6 โคโลนี / กรัม) ในไซโลสไลซีน desoxycholate วุ้น (XLD; Difco) ที่ได้รับจาก 1 กรัมย่อยตัวอย่างของเนยถั่วลิสงเชื้อที่นำมาจากสามสถานที่สุ่มเลือก หลังจากการฉีดวัคซีนประมาณ 5 กรัมจะถูกลบออกที่จะได้รับ 25 กรัมของตัวอย่างเชื้อ กิจกรรมทางน้ำของเนยถั่วลิสงเชื้อเป็น 0.26 และค่าความเป็นกรดเป็น 5.99 Aw และค่า pH ถูกวัดโดยรูปแบบการ Aqualab 4TE อัเมตร (รูปสิบเหลี่ยมอุปกรณ์พูลแมนวอชิงตัน) และเครื่องวัดค่าความเป็นกรด (Mettler-Toledo วิตเซอร์แลนด์).
2.3 การรักษาความร้อนไมโครเวฟรักษาไมโครเวฟได้ดำเนินการในอุปกรณ์ที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (ซองและคัง 2014)
สำหรับการรักษา 25 กรัมของเนยถั่วลิสง (ปรับให้อั = 0.26 มีการเพิ่มของน้ำกลั่นหมัน) ถูกวางลงในบีกเกอร์ขนาด 100 มล Pyrex สำหรับการศึกษาการใช้งานซึ่งเป็นถ้วยที่เต็มไปด้วยตัวอย่างเชื้อถูกวางไว้ที่ศูนย์กลางของแผ่นเสียงภายในโพรงและภายใต้ความร้อนจากไมโครเวฟที่ 3 ระดับพลังงานที่แตกต่างกัน (2, 4, และ 6 กิโลวัตต์) ได้ถึง 5 นาที สำหรับการตรวจวัดอุณหภูมิอุณหภูมิศูนย์ทางเรขาคณิตของกลุ่มตัวอย่างที่ไม่ใช่เชื้อในถ้วยแก้ววัดที่มีเซ็นเซอร์ใยแก้วนำแสง (FOT-L; FISO เทคโนโลยีอิงค์ควิเบกแคนาดา) เชื่อมต่อกับสัญญาณปรับอากาศ (TMI-4; FISO เทคโนโลยี อิงค์ควิเบกแคนาดา) เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงคุณภาพในระหว่างการทำความร้อนเครื่องไมโครเวฟ, บีกเกอร์ที่เต็มไปด้วยตัวอย่างเชื้อที่ไม่ได้รับการรักษาด้วยความร้อนจากไมโครเวฟที่ 3 ระดับพลังงานที่แตกต่างกัน (2, 4, และ 6 กิโลวัตต์) เป็นเวลา 5 นาที.
2.4 นับแบคทีเรียหลังจากการรักษาความร้อนเครื่องไมโครเวฟ, 25 กรัมของกลุ่มตัวอย่างได้รับการผสมกับ 50 มล. 0.2% PW ก่อนแช่เย็นในน้ำแข็งน้ำเย็นอย่างรวดเร็วตัวอย่างซึ่งช่วยลดผลกระทบของความร้อนที่เหลือ
จากนั้นกลุ่มตัวอย่างและ 0.2% ส่วนผสม PW ถูกเจือจางด้วย 175 มล. ของการฆ่าเชื้อ 0.2% PW และปั่นเป็นเวลา 2 นาทีใน Stomacher (ที่ง่าย MIX, AES Chemunex, แรนส์, ฝรั่งเศส) หลังจากที่เป็นเนื้อเดียวกัน, 1 มิลลิลิตร aliquots ตัวอย่างปั่นสิบเท่าปรับลดลำดับ 9 มิลลิลิตรผ่านการฆ่าเชื้อ 0.2% PW และ 0.1 มิลลิลิตรตัวอย่างหรือเจือจางกระจายชุบบน XLD สำหรับแจงนับของเอส Senftenberg ที่ Typhimurium และเทนเนสซี ในกรณีที่มีประชากรต่ำของเซลล์ที่รอดตายได้รับการคาดการณ์ไว้ 1 มิลลิลิตร aliquots ของ homogenate เดิมมีการกระจายอย่างเท่าเทียมกันระหว่างสี่จานและกระจายชุบ แผ่นทั้งหมดถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและอาณานิคมนับ การทดลองครั้งที่สาม.
2.5 ค่ากรดค่าเปอร์ออกไซด์และการวัดสีหลังจาก 5 นาทีของการรักษาความร้อนจากไมโครเวฟค่ากรดเปอร์ออกไซด์ของเนยถั่วลิสงวัดเป็นตัวชี้วัดของการเกิดออกซิเดชันของไขมัน
กรดค่าไตเตรทได้รับการพิจารณาตามที่นักเคมีอเมริกันน้ำมัน 'สังคม (AOCS) 3d Cd-63 (1998) ค่าเปอร์ออกไซด์ที่ถูกกำหนดโดยการไทเทรต iodometric ตาม AOCS Ja 8-87 (2009) ค่ากรดมิลลิกรัมของโพแทสเซียมไฮดรอกไซจำเป็นที่จะต้องแก้กรดใน 1 กรัมของกลุ่มตัวอย่างและความคุ้มค่าเปอร์ออกไซด์ปริมาณออกซิเจนเปอร์ออกไซด์ต่อ 1 กิโลกรัมของตัวอย่าง นอกจากนี้ฮันเตอร์ของค่าสี (L, a และ b) ได้รับการวัดโดยใช้ colorimeter Minolta (CR300 รุ่น Minolta Co. , โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) หลังจาก 5 นาทีความร้อนจากไมโครเวฟ ได้รับการรักษาตัวอย่างถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม ลิตรและค่าขบ่งบอกถึงความสว่างสีแดงและสีเหลืองของกลุ่มตัวอย่างตามลำดับ การทดลองครั้งที่สาม.
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติทั้งหมดวิเคราะห์ข้อมูลโดยทางเดียว ANOVA โดยใช้ระบบการวิเคราะห์ทางสถิติ (SAS Institute, แครี, NC, USA) และ Duncan`s ทดสอบช่วงหลายเพื่อตรวจสอบว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (P <0.05) ค่าเฉลี่ย
นับจุลินทรีย์ถูกเปลี่ยนไป log10 ค่าก่อนที่จะมีการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สายพันธุ์แบคทีเรียและเซลล์แขวนลอย
S . Senftenberg kvcc 0590 และ เทนเนสซี kvcc 0592 ได้มาจากเกาหลีสัตวแพทย์วัฒนธรรมของสะสม ( kvcc ; Anyang , เกาหลีใต้ ) และ S . typhimurium DT 104 ได้จากแบคทีเรียคอลเลกชันของมหาวิทยาลัยแห่งชาติโซล ( โซล สาธารณรัฐเกาหลี ) สำหรับการศึกษานี้หุ้นวัฒนธรรมเตรียมโดยการผสม 0.7 ml ของวัฒนธรรม ที่ปลูกในน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ; difco BD , ประกายไฟ , MD ) 24 ชั่วโมง 37 ° C กับ 0.3 มล. ปลอดเชื้อ 50 % ( v / v ) กลีเซอรอลและเก็บไว้ที่ - 80 องศา ทำงานวัฒนธรรมลายลงบนอาหารวุ้นถั่วเหลือง ( TSA ; difco BD ) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา แต่ละสายพันธุ์ของเอสเซนเฟนแบล์ค , S . typhimurium , S .เทนเนสซีเลี้ยงใน 5 ml TSB 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง , การเก็บเกี่ยวโดยการเหวี่ยงแยกที่ 4000 × G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C และล้างสามครั้งกับหมัน 0.2% เปปโตนน้ำ ( PW ; Bacto , ประกายไฟ , MD ) เม็ดสุดท้ายถูก resuspended ในหมัน 0.2% PW ที่ประมาณ 108-109 CFU / มล.
2.2 . การเตรียมตัวอย่างและการฉีดวัคซีน
ทดลองใช้แปรรูปในเชิงพาณิชย์ครีมเนยถั่วซื้อที่ร้านขายของชำท้องถิ่น ( โซล สาธารณรัฐเกาหลี ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิห้อง ( 22 ± 1 ° C ) ส่วนผสมของเนยถั่ว ( ในใบสั่งที่ระบุบนฉลากสินค้า ) มีถั่วลิสงคั่ว , น้ำตาล , hydrogenated น้ำมันพืช ( น้ำมันถั่วเหลือง และเมล็ดฝ้าย ) และเกลือโภชนาการข้อเท็จจริงฉลากระบุ 16 กรัมของไขมัน 7 กรัม โปรตีน 6 กรัมของคาร์โบไฮเดรตทั้งหมดและ 150 มิลลิกรัมของโซเดียมต่อแต่ละ 32 G ให้ จำนวน 30 กรัม เนยถั่วเป็น aseptically วางไว้ในปลอดเชื้อ 100 ml Pyrex แก้วถ้วย . สำหรับการฉีดวัคซีน , 0.3 มล. ของวัฒนธรรมที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่างละเอียด และผสมกับช้อนเป็นหมัน 2 นาทีเพื่อให้กระจายของเชื้อโรคการแจกแจงปริมาณที่ได้รับการยืนยันโดยเข้าสู่ระบบ ( log CFU ใกล้เคียงนับ 5 – 6 cfu / g ) B desoxycholate ไลซีน ( xld ; difco ) ที่ความเข้มข้น 1 กรัม เนยถั่วย่อยตัวอย่างเชื้อจากสามการสุ่มเลือกสถานที่ หลังจากได้รับเชื้อประมาณ 5 กรัม ถูกลบออกเพื่อให้ได้ 25 กรัมจากตัวอย่าง กิจกรรมน้ำเชื้อของเนยถั่วลิสงเป็น 026 และ pH 5.99 . อ้อ pH วัดจากรูปแบบ aqualab 4te Aw เครื่องวัด ( สิบเหลี่ยมอุปกรณ์ , พูลแมน , WA ) และเครื่องวัด ( เมทเลอร์ โทเลโด สวิตเซอร์แลนด์ ) .
2.3 การรักษาการรักษา
ไมโครเวฟไมโครเวฟแสดงในเครื่องมือที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( ซอง คัง ปี 2014 ) การรักษา , 25 กรัมเนย ( ปรับอ่า = 026 ยังเป็นหมันของน้ำกลั่นอยู่ใน 100 ml Pyrex แก้ว . สำหรับการทำให้เป็นเชื้อตัวอย่างเต็มแก้วอยู่ที่ศูนย์ของแผ่นเสียงภายในโพรงและภายใต้ความร้อนจากไมโครเวฟ ในอำนาจที่แตกต่างกัน 3 ระดับ ( 2 , 4 , และ 6 กิโลวัตต์ ) ถึง 5 นาที สำหรับการวัดอุณหภูมิศูนย์เรขาคณิตอุณหภูมิของตัวอย่างไม่เชื้อในบีกเกอร์เป็นวัดที่มีไฟเบอร์ออปติกเซนเซอร์ ( fot-l ; fiso เทคโนโลยีอิงค์ , ควิเบก , แคนาดา ) เชื่อมต่อกับสัญญาณแอร์ ( tmi-4 ; fiso เทคโนโลยีอิงค์ , ควิเบก , แคนาดา ) เพื่อศึกษาการเปลี่ยนแปลงคุณภาพระหว่างการให้ความร้อนด้วยไมโครเวฟ ไม่ใส่เต็มถ้วยตัวอย่างได้รับการรักษาด้วยคลื่นไมโครเวฟที่แตกต่างกัน 3 ระดับ พลังงาน ( 24 และ 6 กิโลวัตต์ ) 5 นาที
2.4 . แบคทีเรียแจง
หลังการรักษาไมโครเวฟ , 25 กรัม จำนวน ผสม 50 มิลลิลิตร 0.2% PW ก่อนแช่เย็น น้ำแข็งจะเย็นตัวอย่างรวดเร็ว ดังนั้นการลดผลกระทบของความร้อนที่เหลือ งั้น , ตัวอย่างและ 0.2% PW ผสมเจือจางด้วย 175 มิลลิลิตร และเป็นหมัน 0.2% PW บด 2 นาทีในแผงประดับหน้าอก ( ผสมง่าย AES CHEMUNEX แรนส์ , ฝรั่งเศส )หลังจากการ 1 ml เฉยๆของโฮโมจำนวนสิบเท่าเป็นเจือจางใน 9 มล. เป็นหมัน 0.2% PW และ 0.1 มิลลิลิตร หรือเจือจางตัวอย่างถูกกระจายลงบน xld ชุบสำหรับการฆ่าเชื้อและ S . typhimurium , เทนเนสซี ที่มีประชากรน้อยรอดเซลล์ได้คาดการณ์ไว้1 ml เฉยๆของปริมาณเดิมกันสี่จานและการแพร่กระจายระหว่างชุบ ทุกจานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่และอาณานิคมถูกนับ การทดลอง 3 ครั้ง
2.5 ค่าของกรด ค่าเปอร์ออกไซด์และ
วัดสีหลังจาก 5 นาทีของการรักษาความร้อนไมโครเวฟกรดและค่าเปอร์ออกไซด์ของเนยถั่วลิสงวัดตัวบ่งชี้ของลิปิดออกซิเดชัน titrations ค่าของกรดถูกกำหนดตามนักเคมีน้ำมันสังคมอเมริกัน ( aocs ) ซีดี 3d-63 ( 1998 ) iodometric การไทเทรตมีค่าเปอร์ออกไซด์ โดยพิจารณาตาม aocs จา 8-87 ( 2009 )ค่าเป็นกรดมิลลิกรัมของโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ที่จำเป็นเพื่อต่อต้านกรดฟรีใน 1 กรัมของตัวอย่างและค่าเปอร์ออกไซด์ปริมาณออกซิเจนเปอร์ออกไซด์ต่อ 1 กิโลกรัม ตัวอย่าง นอกจากนี้ นักล่าค่าสี ( L , a และ b ) จะถูกวัดโดยใช้ Minolta colorimeter ( แบบ cr300 , MINOLTA Co . , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) หลังจาก 5 นาที ความร้อนจากไมโครเวฟ ตัวอย่างดิบที่ใช้ควบคุม ผม , ,และ B ค่าบ่งชี้ความสว่าง สี แดง และเหลือง ของตัวอย่าง ตามลำดับ การทดลอง 3 ครั้ง
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
วิเคราะห์ข้อมูลโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนโดยใช้ระบบการวิเคราะห์ทางสถิติ ( SAS Institute , แครี่ , NC , USA ) และ Duncan ' s Multiple Range Test เพื่อตรวจสอบว่า มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.05 ) หมายถึงค่าจุลินทรีย์นับถูกแปลงค่าก่อนการวิเคราะห์
LN