BrdU injections and tissue preparat

BrdU injections and tissue preparation

The TgAPP/PS1 and the WT mice were intraperitonially injected with 75 mg/kg 5-bromo-2-deoxyuridine solution (BrdU; Sigma, St. Louis, MO, USA) daily during the last 7 days of treatment. One day after the last injection, animals were anesthetized with phenobarbital and perfused transcar- dially with 4% paraformaldehyde in phosphate buffer (PF). The brains were removed, stored overnight in 4% PF, and transferred into 30% sucrose. Coronal sections (30 m) were cut on a Bright OTF5000 Cryostat (Jencons Scientific Inc., Bridgeville, PA, USA) and stored at 20°C in a cryopro- tectant. For Western blotting, the hippocampus was dissected immediately after removal of the brain from non-BrdU- injected mice and stored at 80°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ฉีด BrdU และเตรียมเนื้อเยื่อTgAPP/PS1 และหนู WT ถูกฉีด ด้วยโซลูชั่น 5-โบรโม-2-deoxyuridine 75 mg/kg (BrdU; intraperitonially ซิกมา St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) ทุกวันในระหว่างวันที่ 7 ของการรักษา วันหนึ่งหลังจากการฉีดครั้งสุดท้าย สัตว์ถูกด้วยกับ phenobarbital ก perfused transcar-dially กับ paraformaldehyde 4% ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (PF) สมองที่ออก เก็บไว้ค้างคืน 4% PF และเป็นซูโครส 30% ส่วน coronal (30 เมตร) ถูกตัดบน Cryostat การ OTF5000 ไบรท์ (Jencons Scientific Inc., Bridgeville, PA สหรัฐอเมริกา) และเก็บไว้ที่ 20° C ใน cryopro-tectant สำหรับ blotting วิธีเวสเทิร์น การฮิพโพแคมปัสถูก dissected ได้ทันทีหลังจากเอาสมองจาก-BrdU ใช่ฉีดหนู และเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ฉีด BrdU และการเตรียมเนื้อเยื่อTgAPP / PS1 และหนู WT ถูกฉีด intraperitonially 75 mg / kg วิธีการแก้ปัญหา 5 โบรโม-2-deoxyuridine (BrdU; ซิกเซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) ในชีวิตประจำวันในช่วง 7 วันของการรักษา . วันหนึ่งหลังจากการฉีดที่ผ่านมาสัตว์ที่ถูกอสัญญีกับ phenobarbital และ perfused transcar- dially กับ paraformaldehyde 4% ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (PF) สมองถูกถอดออกเก็บไว้ค้างคืนใน 4% PF และย้ายไปอยู่ที่ 30% น้ำตาลซูโครส ส่วนเวียน (30 เมตร) ที่ถูกตัดใน Bright OTF5000 Cryostat (Jencons ทางวิทยาศาสตร์สายคอิงค์บริดจ์, PA, สหรัฐอเมริกา) และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสใน tectant cryopro- สำหรับซับตะวันตก hippocampus ถูกชำแหละทันทีหลังจากที่การกำจัดของสมองจากการไม่ BrdU- ฉีดหนูและเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

brdu injections และการเตรียมเนื้อเยื่อ

tgapp / PS1 และน้ำหนักหนู intraperitonially ฉีด 75 มก. / กก. 5-bromo-2-deoxyuridine โซลูชั่น ( brdu ; Sigma , St . Louis , MO , USA ) ทุกวัน ในช่วง 7 วันของการรักษา วันหนึ่งหลังจากฉีดครั้งสุดท้าย สัตว์ถูกวางยาสลบ กับฟีโนบาร์บิทอลหนู transcar - dially กับพาราฟอร์มาลดิไฮด์ 4% ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PF )สมองถูกถอดออก เก็บไว้ค้างคืนใน 4% PF และโอนเป็น 30 เปอร์เซ็นต์น้ำตาลซูโครส เนื้อส่วน ( 30 เมตร ) ถูกตัดใน Cryostat otf5000 จ้า ( jencons scienti จึง C อิงค์ Bridgeville , PA , USA ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C ใน cryopro - tectant . สำหรับ Western blotting ฮิปโปแคมปัส คือผ่าทันทีหลังจากการกำจัดสมองจากไม่ brdu - ฉีดหนูและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 80 องศา