Analysis of FAMEs
Lipid was extracted from the pulverized bee pollen by employing hexane according to the method of Miraliakbari and Shahidi (2008). The recovered lipid was derivatized to the FAMEs according to Li et al. (2005). FAMEs were injected onto a RTX-wax capillary column coated with 100% polyethylene glycol (30 m, 0.32 mm inner diameter, 0.25 µm film thickness; Restek Corp., Bellefonte, PA) installed in Shimadzu 2010 Gas Chromatography (Shimadzu Co. Ltd., Kyoto, Japan) equipped with a flame ionization detector. The sample (1 µL) was injected with a split ratio of 50:1 and the inlet temperature was set at 250C. The initial oven temperature was 100C and the initial time was 1 min. Then the temperature increased to 250C at a rate of 10C/min and kept for 8 min. The carrier gas was nitrogen with a flow rate of 1.0 mL/min. Identification of FAME was achieved by comparing their retention times with those of authentic compounds analyzed under the same conditions. The composition of the fatty acids was expressed as relative area percent of total FAMEs.
Carotenoid Extraction and Determination The carotenoid extraction procedure was carried out as described by Lin et al. (2005). Briefly, the pulverized bee pollen (1.0 g) was mixed with 10 mL of acetone, the mixture was shaken for 10 min and the extract was collected with a suction pipe. This procedure was repeated four times with acetone and then the residue was extracted with petroleum ether until it became colorless. The joined extracts were combined with the same volume of 10% Na2SO4 solution for partition. The upper layer was collected and the lower layer was repeatedly extracted with 40 mL of petroleum ether twice. All the supernatants were combined and evaporated under reduced pressure. The content of total carotenoids was measured as described before (Xu et al. 2008).
Statistical Analysis All experiments were performed in triplicate. The values of mean ± standard deviation were calculated from three replicates of each experiment and statistical significance was defined at P < 0.05. Where appropriate, the differences between means were determined by Duncan's multiple range tests using SPSS 11.5 statistics software (SPSS Inc., Chicago, IL).
การวิเคราะห์ขวัญ
ไขมันสกัดจากเกสรผึ้งแหลกลาญโดยใช้เฮกเซนตามวิธีการของ miraliakbari และ Shahidi (2008) ไขมันที่ถูกกู้คืนจะ derivatized หนี้ตาม li ตอัล (2005) ขวัญถูกฉีดลงบนคอลัมน์ฝอย rtx ขี้ผึ้งเคลือบด้วย 100% พลาสติกคอล (30 เมตร 0.32 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม. คอร์ป restek, Bellefonte,ต่อปี) ที่ติดตั้งใน Shimadzu 2010 แก๊ส chromatography (Shimadzu ร่วม จำกัด .., เกียวโต, ญี่ปุ่น) พร้อมกับเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ ตัวอย่าง (1 ไมโครลิตร) ถูกฉีดด้วยอัตราส่วนแบ่ง 50:1 และอุณหภูมิขาเข้าตั้งอยู่ที่ 250c เตาอบที่อุณหภูมิเริ่มต้น 100C และเวลาเริ่มต้นเป็น 1 นาที จากนั้นอุณหภูมิจะเพิ่มขึ้นในอัตราที่ 250c ของ 10c/min และเก็บไว้เป็นเวลา 8 นาทีผู้ให้บริการก๊าซไนโตรเจนก็มีอัตราการไหล 1.0 มล. / นาที บัตรประจำตัวของชื่อเสียงประสบความสำเร็จโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาของพวกเขากับคนของสารที่แท้จริงวิเคราะห์ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน องค์ประกอบของกรดไขมันที่ถูกแสดงเป็นร้อยละพื้นที่ญาติของหนี้รวม
.สกัด carotenoid และการกำหนดขั้นตอนการสกัด carotenoid ถูกหามออกตามที่อธิบายไว้โดย lin เอตอัล (2005) สั้นเกสรผึ้งแหลกลาญ (1.0 กรัม) ผสมกับ 10 มล. ของอะซิโตน, ส่วนผสมที่ถูกเขย่าเป็นเวลา 10 นาทีและสารสกัดจากถูกเก็บรวบรวมด้วยท่อดูดขั้นตอนนี้ซ้ำครั้งที่สี่ด้วยอะซิโตนและสารตกค้างที่ถูกสกัดด้วยปิโตรเลียมอีเธอร์จนกระทั่งมันกลายเป็นไม่มีสี สารสกัดเข้าร่วมถูกรวมกับปริมาณเดียวกันของการแก้ปัญหา Na2SO4 10% สำหรับพาร์ติชัน ชั้นบนเป็นที่เก็บรวบรวมและชั้นล่างถูกสกัดซ้ำด้วย 40 มล. ของปิโตรเลียมอีเทอร์สองครั้งsupernatants ทั้งหมดถูกรวมกันและระเหยภายใต้ความกดดันลดลง เนื้อหาของ carotenoids ทั้งหมดถูกวัดตามที่อธิบายไว้ก่อน (xu และคณะ. 2008).
การวิเคราะห์ทางสถิติการทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจะถูกคำนวณจากสามซ้ำของแต่ละการทดลองและนัยสำคัญทางสถิติที่ถูกกำหนดไว้ที่ p <0.05 ที่เหมาะสมความแตกต่างระหว่างวิธีการได้รับการพิจารณาโดยการทดสอบช่วงของดันแคนหลายเครื่องโดยใช้ spss 11.5 สถิติซอฟต์แวร์ (INC spss., Chicago, IL).
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)