Girma et al., 2009b; Musoli et al. 2009) documented that
there are variations in Coffea-Gibberella xylarioides
pathosystem. These results, however, are largely
emanated from studies conducted on coffee varieties or
lines and the fungus isolates originated from semi-forest
and plantation production systems. So far, there is little
equivalent knowledge concerning the host-pathogen
interactions in ‘wild’ forest coffee systems. Thus, the main
objectives of this study were to examine the population
structure of G. xylarioides (Fusarium xylarioides) isolates
and coffee accessions originated from four contrasting
‘wild’ forest coffee sites in comparison with known strains
isolated from semi-forest and plantation coffee in
Ethiopia.
MATERIALS AND METHODS
Collections of fungal isolates
Pure cultures of 24 G. xylarioides (F. xylarioides) isolates
representing four forest coffee sites were selected from large
collections in different plots of Bonga, Berhane-Kontir and Yayu
(southwest) and Harenna (southeast) of Ethiopia. Then, the isolates
were compared with six known strains of the pathogen obtained
from semi-forest coffee at Jimma and that of plantation at Gera in
southwest Ethiopia (Table 1). The isolates were first retrieved on
fresh Spezieller Nährstoffarmer agar (SNA) (Nirenberg, 1976)
medium, from the stock culture on slant agar maintained at 4°C,
and grown for a week and then used for cultural and morphological
characterization. Out of these, four fungal isolates (each per
locality) and a strain from Gera were selected based on colony
growth to study host-pathogen interaction.
Cultural characterization of the isolates
For cultural characterization, each isolate was transferred from SNA
onto potato sucrose agar in 90 cm Petri dishes and, grown under
dark for the first three days, and then exposed to fluorescent light/
dark cycle at 22 ± 1°C temperature (Booth, 1971; Rutherford et al.,
2009). Cultural appearances such as colony color (upper and
lower), and aerial as well as radial growth were scored for 21 days
incubation at every three to five days interval. The apical mycelia
growth was rated visually as appressed (flat), slightly raised and
raised from the agar surface; and the colony density of isolates was
recorded as dense, intermediate and sparse (Girma, 2004). Radial
growth was measured with transparent ruler (mm), as colony
diameter from two perpendicular planes on the reverse side of the
Petri dishes. Colony color on obverse (upper) and types of
pigments from the reverse (under side) of the Petri dish for each
isolate was determined using color chart.
Morphological characterization of the isolates
All the isolates were grown on SNA plates for studying microscopic
structures of the fungus under aforementioned growth conditions
(Booth, 1971; Gerlach and Nirenberg, 1982; Rutherford et al.,
2009). Fourteen-day old cultures of each isolate was flooded with
10 ml distilled sterile water and rubbed gently from the agar surface
to free the fungus conidia. The spore suspensions were filtered
through cheese clothes into sterile beaker, while thoroughly stirring,
Girma et al., 2009b Musoli et al. 2009) เอกสารที่มีความแตกต่างใน Coffea Gibberella xylarioidespathosystem ผลลัพธ์เหล่านี้ อย่างไรก็ตาม เป็นส่วนใหญ่emanated จากศึกษาวิธีการใช้กาแฟพันธุ์ หรือบรรทัดและการเชื้อราที่แยกได้มาจากป่ากึ่งและระบบการผลิตไร่ ไกล มีน้อยความรู้เทียบเท่าที่เกี่ยวข้องกับโฮสต์ศึกษาโต้ตอบในระบบ ''ป่ากาแฟ ดังนั้น หลักวัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ได้ตรวจสอบประชากรโครงสร้างของ xylarioides กรัม (Fusarium xylarioides) แยกและกาแฟ accessions ต้นห้อง 4'ป่า' ป่าอเมริกากาแฟเมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่รู้จักกันแยกต่างหากจากป่ากึ่งสวนกาแฟในเอธิโอเปียวัสดุและวิธีการคอลเลกชันของเชื้อราที่แยกได้วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของ xylarioides กรัม 24 แยก (F. xylarioides)แทนกาแฟป่าสี่เลือกไซต์จากขนาดใหญ่คอลเลกชันในผืนอื่น Bonga, Berhane Kontir และ Yayu(ตะวันตกเฉียงใต้) และ Harenna (เฉียง) ของเอธิโอเปีย จากนั้น การแยกถูกเปรียบเทียบกับ 6 สายพันธุ์ที่รู้จักกันของการศึกษาได้รับจากกาแฟกึ่งป่าที่ Jimma และที่ไร่ที่ Gera ในตะวันตกเฉียงใต้ประเทศเอธิโอเปีย (ตาราง 1) ครั้งแรกถูกเรียกแยกได้ในสด Spezieller Nährstoffarmer agar อานา (SNA) (Nirenberg, 1976)กลาง จากวัฒนธรรมหุ้นบนเอียง agar เก็บที่ 4° Cโตต่อสัปดาห์ และใช้วัฒนธรรม และสัณฐานจำแนก จากนี้ เชื้อราสี่แยก (แต่ละต่อท้องถิ่น) และต้องใช้จาก Gera เลือกยึดอาณานิคมเจริญเติบโตเพื่อศึกษาศึกษาโฮสต์โต้ตอบสมบัติทางวัฒนธรรมของการแยกการจำแนกวัฒนธรรม แยกแต่ละถูกโอนย้ายจาก SNAบนมันฝรั่งซูโครส agar ในจาน Petri 90 ซม. และ ปลูกภายใต้มืดสามวันแรก และจากนั้น สัมผัสกับไฟเรืองแสง /วงจรมืดอุณหภูมิ 22 ± 1° C (บูธ 1971 รูเทอร์ฟอร์ด et al.,2009) นัดทางวัฒนธรรมเช่นโคโลนีสี (ด้านบน และล่าง), และทางอากาศ รวมทั้งรัศมีเจริญเติบโตได้คะแนน 21 วันบ่มในทุกช่วงเวลาสามถึงห้าวัน Mycelia ปลายยอดเจริญเติบโตเป็นอันดับเห็นเป็น appressed (แบน), เพิ่มขึ้นเล็กน้อย และยกจากพื้นผิวของ agar และความหนาแน่นของอาณานิคมของแยกบันทึกเป็นความหนาแน่นสูง กลาง และเบา (Girma, 2004) รัศมีเจริญเติบโตถูกวัด ด้วยไม้บรรทัดใส (mm), เป็นโคโลนีเส้นผ่าศูนย์กลางจากเครื่องบินตั้งฉากสองด้านกลับของการจาน petri โคโลนีสี obverse (บน) และชนิดของสีจากย้อนกลับ (ภายใต้ด้านข้าง) ของจานเพาะเชื้อสำหรับแต่ละเพราะถูกกำหนดโดยใช้แผนภูมิสีคุณสมบัติของของการแยกทั้งหมดแยกได้เติบโตบนแผ่น SNA สำหรับการศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์โครงสร้างของเชื้อราภายใต้เงื่อนไขดังกล่าวเจริญเติบโต(บูธ 1971 Gerlach และ Nirenberg, 1982 รูเทอร์ฟอร์ด et al.,2009) สิบสี่ - วันเก่าวัฒนธรรมของแต่ละแยกมีน้ำท่วมด้วยใส่น้ำกลั่น 10 ml และ rubbed เบา ๆ จากผิว agarฟรี conidia เห็ดรา บริการสปอร์ถูกกรองผ่านผ้าชีลงในบีกเกอร์ที่ใส่ ในขณะที่กวนอย่างละเอียด
การแปล กรุณารอสักครู่..

กีและคณะ, 2009b. Musoli และคณะ 2009) เอกสารที่
มีรูปแบบในกาแฟ-Gibberella xylarioides มี
pathosystem ผลลัพธ์เหล่านี้ แต่ส่วนใหญ่จะ
เล็ดลอดออกมาจากการศึกษาดำเนินการเกี่ยวกับกาแฟพันธุ์หรือ
เส้นและเชื้อราเชื้อมาจากกึ่งป่า
และระบบการผลิตการเพาะปลูก จนถึงขณะนี้มีน้อย
ความรู้เทียบเท่าเกี่ยวกับโฮสต์เชื้อโรค
ปฏิสัมพันธ์ใน 'ป่า' ระบบกาแฟป่า ดังนั้นหลัก
วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้มีการตรวจสอบประชากร
โครงสร้างของ xylarioides กรัม (Fusarium xylarioides) แยก
สายและเครื่องชงกาแฟมาจากสี่ตัดกัน
'ป่า' ป่าเว็บไซต์กาแฟในการเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่รู้จักกัน
ที่แยกได้จากกึ่งป่าไม้และเครื่องชงกาแฟในสวน
เอธิโอเปีย.
วัสดุและวิธีการ
คอลเลกชันของเชื้อราที่แยก
วัฒนธรรมบริสุทธิ์ 24 กรัม xylarioides (เอฟ xylarioides) แยก
เป็นตัวแทนของสี่ป่าเว็บไซต์กาแฟได้รับเลือกจากที่มีขนาดใหญ่
คอลเลกชันในแปลงที่แตกต่างกันของ Bonga, Berhane-Kontir และ Yayu
(ทิศตะวันตก) และ Harenna (ตะวันออกเฉียงใต้ ) ของเอธิโอเปีย จากนั้นสายพันธุ์
ที่ได้รับเมื่อเทียบกับหกสายพันธุ์ที่รู้จักกันของเชื้อโรคที่ได้รับ
จากเครื่องชงกาแฟกึ่งป่าที่จิมม่าและสวนที่เกราใน
ทิศตะวันตกเฉียงใต้เอธิโอเปีย (ตารางที่ 1) สายพันธุ์ที่ถูกดึงมาเป็นครั้งแรกใน
สด Spezieller Nährstoffarmerวุ้น (SNA) (Nirenberg, 1976)
กลางจากการเพาะเลี้ยงหุ้นในวุ้นเอียงเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส
และการเจริญเติบโตสำหรับสัปดาห์และนำมาใช้สำหรับวัฒนธรรมและลักษณะทางสัณฐานวิทยา
ตัวละคร เหล่านี้ออกจากสี่สายพันธุ์เชื้อรา (ต่อแต่ละ
ท้องที่) และสายพันธุ์จากเกราถูกเลือกขึ้นอยู่กับอาณานิคมของ
การเจริญเติบโตในการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างพืชเชื้อโรค.
ลักษณะวัฒนธรรมของเชื้อ
สำหรับลักษณะทางวัฒนธรรมที่แยกแต่ละถูกย้ายจาก SNA
บนวุ้นมันฝรั่งน้ำตาลซูโครสใน 90 ซม. จานเลี้ยงเชื้อและเติบโตภายใต้
ความมืดสำหรับสามวันแรกและสัมผัสแล้วกับแสงเรืองแสง /
มืดรอบวันที่ 22 ± 1 ° C อุณหภูมิ (บูธ, 1971;. รัทเธอร์และคณะ,
2009) ปรากฏตัวทางวัฒนธรรมเช่นสีอาณานิคม (บนและ
ล่าง) และทางอากาศรวมทั้งการเจริญเติบโตในแนวรัศมีถูกยิง 21 วัน
ฟักตัวในทุก 3-5 ช่วงวันที่ เส้นใยยอด
การเติบโตเป็นอันดับสายตาเป็น appressed (แบน), ยกสูงขึ้นเล็กน้อยและ
ยกขึ้นมาจากพื้นผิววุ้น; และความหนาแน่นของเชื้ออาณานิคมได้รับการ
บันทึกเป็นหนาแน่นกลางและเบาบาง (กี, 2004) Radial
การเจริญเติบโตของวัดด้วยไม้บรรทัดโปร่งใส (มม) ในฐานะอาณานิคม
เส้นผ่าศูนย์กลางจากสองระนาบตั้งฉากกับด้านหลังของ
จานเลี้ยงเชื้อ สีอาณานิคมบนผิวหน้า (ด้านบน) และชนิดของ
สีจากย้อนกลับ (ภายใต้ด้าน) ของจานเลี้ยงเชื้อสำหรับแต่ละ
แยกถูกกำหนดโดยใช้แผนภูมิสี.
ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเชื้อ
ทุกสายพันธุ์ที่ปลูกบนจาน SNA สำหรับการศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์
โครงสร้างของ เชื้อราภายใต้สภาวะการเจริญเติบโตดังกล่าว
(บูธ, 1971; Gerlach และ Nirenberg 1982;. รัทเธอร์และคณะ,
2009) สิบสี่วันวัฒนธรรมเก่าแก่ของแต่ละแยกถูกน้ำท่วมด้วย
10 มล. น้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและลูบเบา ๆ จากพื้นผิววุ้น
จะเป็นอิสระเชื้อราสปอร์ สปอร์แขวนลอยถูกกรอง
ผ่านเสื้อผ้าชีสลงในถ้วยแก้วผ่านการฆ่าเชื้อในขณะที่อย่างทั่วถึงกวน
การแปล กรุณารอสักครู่..

girma et al . , 2009b ; musoli et al . 2552 ) เอกสารที่
จะมีการเปลี่ยนแปลงใน gibberella coffea xylarioides
pathosystem . ผลลัพธ์เหล่านี้ แต่ส่วนใหญ่
emanated จากการศึกษาในพันธุ์กาแฟหรือ
เส้นและเชื้อราสายพันธุ์ที่มาจากป่าปลูก และการผลิตระบบกึ่ง
. ดังนั้นไกล , มีความรู้เกี่ยวกับโฮสต์น้อย
นี้เทียบเท่าปฏิสัมพันธ์ใน ' ป่า ' ระบบกาแฟป่า ดังนั้น วัตถุประสงค์หลักของการศึกษาครั้งนี้ เพื่อศึกษา
โครงสร้างประชากรของกรัม xylarioides ( Fusarium xylarioides ) และสายพันธุ์สายพันธุ์กาแฟที่มาจากสี่
'wild ' ตัดป่ากาแฟเว็บไซต์ในการเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่แยกได้จากกึ่งป่าและรู้จัก
ปลูกกาแฟในเอธิโอเปีย
วัสดุและวิธีการคอลเลกชันของเชื้อราไอโซเลท
เชื้อบริสุทธิ์ 24 กรัม xylarioides ( F . xylarioides ) ไอโซเลต
แทนสี่ป่ากาแฟเว็บไซต์ที่ถูกเลือกจากคอลเลกชันขนาดใหญ่ของบองก้า
ในแปลงที่แตกต่างกัน , และ berhane kontir yayu
( ตะวันตกเฉียงใต้ ) และ harenna ( ตะวันออกเฉียงใต้ ) ของเอธิโอเปีย แล้ว เปรียบเทียบกับสายพันธุ์
6 รู้จักสายพันธุ์ของเชื้อโรคได้
จากกาแฟที่กึ่งป่าจิมมาและที่ปลูกในเอธิโอเปียที่เก
ตะวันตกเฉียงใต้ ( ตารางที่ 1 ) แยกได้เป็นคนแรกที่ดึงบน
สด spezieller N และ hrstoffarmer ( SNA ) ( นิเรนเบิร์ก , 1976 )
) จากหุ้นวัฒนธรรมบนวุ้นไว้ที่ 4 องศาเอียง C
และเติบโตสำหรับสัปดาห์และจากนั้นใช้วัฒนธรรมและลักษณะทางสัณฐานวิทยา
ตัวละคร ออกของเหล่านี้สี่แยกเชื้อราต่อ
( แต่ละท้องถิ่น และสายพันธุ์จาก Gera ถูกเลือกขึ้นอยู่กับการเจริญเติบโตอาณานิคม
ศึกษาปฏิสัมพันธ์โฮสต์นี้ .
ลักษณะทางวัฒนธรรมของไอโซ
สมบัติทางวัฒนธรรม แต่ละแยก ถูกโอนจาก SNA
บนวุ้นซูโครสมันฝรั่งใน 90 ซม. จานเพาะเลี้ยงและปลูก
มืดสำหรับ 3 วันแรก แล้วสัมผัสกับเรืองแสง แสง /
มืดรอบที่ 22 ± 1 ° C ( บูธ , 1971 ; อุณหภูมิรัทเทอร์ฟอร์ด et al . ,
2009 ) ลักษณะทางวัฒนธรรม เช่น กลุ่มสี ( บนและล่าง
) และทางอากาศรวมทั้งรัศมีการเจริญเติบโตคะแนนสำหรับ 21 วัน
บ่มที่ทุกสามถึงห้าวัน ช่วง ส่วนปลายของเส้นใย
อยู่สายตาเป็นที่ถูกกดติดกับพื้นผิว ( แบน ) , ยกขึ้นเล็กน้อยและ
ขึ้นมาจากผิววุ้น และความหนาแน่นของเชื้อเป็นอาณานิคม
ไว้หนาแน่นกลาง และป่าโปร่ง ( girma , 2004 ) เจริญเรเดียล
วัดด้วยไม้บรรทัดใส ( มม. ) , เส้นผ่าศูนย์กลางอาณานิคม
จากสองเครื่องบินตั้งฉากบนด้านหลังของ
จานเพาะเลี้ยง อาณานิคมสีด้าน ( บน ) และประเภทของ
สีจากย้อนกลับ ( ด้านใต้ ) ในจานเลี้ยงเชื้อแต่ละ
แยกใช้วิเคราะห์กราฟสี ลักษณะสัณฐานวิทยาของเชื้อ
ทุกไอโซเลทที่ปลูกบนแผ่นสำหรับศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์
เรื่องโครงสร้างของเห็ดราภายใต้สภาวะการเติบโตดังกล่าว
( บูธ , 1971 ; เกอร์ลาช และ นิเรนเบิร์ก , 1982 ; Rutherford et al . ,
2009 ) สิบสี่วันเก่า วัฒนธรรมของแต่ละแยกถูกน้ำท่วมด้วย
10 มล. น้ำกลั่นปลอดเชื้อและลูบเบา ๆจากผิววุ้น
ฟรีเชื้อราโคนิ . การสร้างสปอร์แขวนลอยถูกกรอง
ผ่านเสื้อผ้าชีสลงในบีกเกอร์ที่เป็นหมัน ในขณะที่อย่างละเอียด กวน
การแปล กรุณารอสักครู่..
