2. Experimental
2.1. Reagents and Solutions
Aniline (AR-grade), alcohol oxidase (AOX) (A2404, EC1.1.3.13, 10–40 units/mg protein, from Pichia pastoris), ascorbic acid (A5960), gallic acid (G7384) and l-cysteine (W326305) were purchased from Sigma-Aldrich (Saint Louis, MO, USA). Absolute ethanol (>99.5%), methanol, orthophosphoric acid 85% and sodium hydroxide (pellets) were delivered by Merck (Nottingham, UK). All chemicals were of analytical reagent grade. The Milli-Q water used was obtained from a Millipore Direct-QTM 5 purification system. Stock solutions of ethanol was prepared daily in 0.1 M phosphate buffer of suitable pH and stored at 4 °C in refrigerator. The phosphate buffer 0.1 M solutions of pH values between 4 and 8 were used for pH studies. The pH was measured using a commercial glass electrode and a pH-meter (model 9318, Hanna Instruments, Woonsocket, RL, USA) calibrated at the pH values of 4.00, 7.00 and 9.00.
2. ทดลอง2.1. reagents และโซลูชั่นAniline (AR-เกรด), แอลกอฮอล์ oxidase (AOX) (A2404, EC1.1.3.13, 10 – 40 หน่วย/มิลลิกรัม โปรตีน จาก Pichia pastoris), กรดแอสคอร์บิค (A5960), กรด gallic (G7384) และ l-cysteine (W326305) ถูกซื้อจากซิก-Aldrich (Louis เซนต์ MO สหรัฐอเมริกา) แอบโซลูทเอทานอล (> 99.5%), เมทานอล orthophosphoric กรด 85% และโซดาไฟ (เกล็ด) ถูกส่ง โดยบริษัทเมอร์ค (น็อตติงแฮม UK) ทั้งหมดเคมีภัณฑ์เกรดรีเอเจนต์ที่วิเคราะห์ได้ น้ำ Q ที่ใช้ได้รับจากระบบฟอก 5 QTM ตรงมาก หุ้นโซลูชั่นของเอทานอลได้เตรียมวันในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.1 M ของค่า pH ที่เหมาะสม และเก็บไว้ที่ 4 ° C ในตู้เย็น ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M โซลูชั่นของค่า pH ระหว่าง 4 และ 8 ใช้สำหรับการศึกษาค่า pH มีวัด pH ใช้เป็นอิเล็กโทรดแก้วทางการค้าและมีค่า pH เมตร (ในรุ่นที่ 9318, Hanna เครื่อง Woonsocket, RL สหรัฐอเมริกา) ปรับเทียบที่ค่า pH 4.00, 7.00 น. และ 9.00
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. การทดลอง
2.1 รีเอเจนต์และโซลูชั่น
สวรรค์ (AR เกรด) oxidase เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (AOX) (A2404, EC1.1.3.13, 10-40 หน่วย / มก. โปรตีนจาก Pichia pastoris) วิตามินซี (A5960) ฝรั่งเศสกรด (G7384) และลิตร -cysteine (W326305) ซื้อจาก Sigma-Aldrich (Saint Louis, MO, USA) แอบโซลูทเอทานอล (> 99.5%) เมทานอลกรด orthophosphoric 85% และโซดาไฟ (เม็ด) ได้รับการจัดส่งโดยเมอร์ (น็อตติงแฮมสหราชอาณาจักร) สารเคมีทั้งหมดเป็นของเกรดน้ำยาวิเคราะห์ น้ำ Milli-Q ใช้ที่ได้รับจากคโดยตรง QTM 5 ระบบฟอก การแก้ปัญหาสต็อกของเอทานอลถูกจัดทำขึ้นเป็นประจำทุกวันใน 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH ที่เหมาะสมและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสในตู้เย็น ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.1 M การแก้ปัญหาของค่าพีเอชระหว่างวันที่ 4 และ 8 ถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษาความเป็นกรดด่าง พีเอชได้รับการวัดโดยใช้อิเล็กโทรดแก้วในเชิงพาณิชย์และค่า pH เมตร (รุ่น 9318 ฮันนาเครื่องดนตรี, Woonsocket, RL สหรัฐอเมริกา) การสอบเทียบที่ค่าพีเอช 4.00, 7.00 และ 9.00
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . ทดลอง
2.1 . สารเคมีและโซลูชั่น
สีสวรรค์ ( AR เกรด ) ของแอลกอฮอล์ ( ชนิด ) ( a2404 ec1.1.3.13 , 10 – 40 หน่วยต่อมิลลิกรัมโปรตีน จาก pichia pastoris ) , กรดแอสคอร์บิค ( a5960 ) เพิ่มขึ้น ( g7384 ) และแอลซีสเทอีน ( w326305 ) ซื้อจาก ซิกม่า Aldrich ( นักบุญหลุยส์ โม สหรัฐอเมริกา ) แน่นอน ( เอทานอล 99.5% ) , เมทานอลออร์โธฟอสฟอริกแอซิด 85% และโซดาไฟ ( เกล็ด ) ถูกส่งจากบริษัทเมอร์ค ( น็อตติงแฮม , UK ) ทั้งหมดเคมีภัณฑ์เป็นวิเคราะห์สารเคมีเกรด การใช้น้ำได้รับจาก milli-q มิลลิตรง QTM 5 บริสุทธิ์ระบบ หุ้นโซลูชั่นของเอทานอลที่เตรียมไว้ทุกวัน ใน 0.1 M phosphate buffer pH และอุณหภูมิที่เหมาะสม 4 ° C ในตู้เย็น ฟอสเฟตบัพเฟอร์ 01 เมตร โซลูชั่นของค่า pH ระหว่าง 4 และ 8 ตามลำดับเพื่ออ ศึกษา ค่า pH คือการวัดโดยใช้ขั้วไฟฟ้าแก้วพาณิชย์และเครื่องวัด ( แบบ 9318 ฮันนา เครื่องมือ Woonsocket RL , USA ) ปรับที่ค่า pH ของ 4.00 , 7.00 และ 9.00 .
การแปล กรุณารอสักครู่..