2.4. Amylase activity assay
The amylase activity was measured based on the Miller (1959)
method with slight modification. The reaction mixture included
0.5 ml of the enzyme and 0.5 ml of 0.1% of soluble starch dissolved
in 0.1 m of 100 mM sodium acetate buffer at pH 5.0. The mixture,
after incubation for 30 min at 70 C, was boiled for 5 min in the
presence of 1 ml of DNS. The released reducing sugar was measured
using a spectrophotometer (BioMate™-3, Thermo Scientific,
Alpha Numerix, Woodfield Dr, Webster, NY, USA) at 540 nm by
using maltose as a standard reducing sugar. One unit of a-amylase
activity was defined as the amount of enzyme that produced
1 lmol of maltose per minute under the enzyme activity
conditions.
2.4 กิจกรรมอะไมเลส assay
กิจกรรมอะไมเลสวัดอยู่บนพื้นฐานของมิลเลอร์ (1959)
วิธีการที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ผสมปฏิกิริยารวม
0.5 มลของเอนไซม์และ 0.5 มิลลิลิตร 0.1% ของแป้งที่ละลายน้ำละลาย
ใน 0.1 เมตร 100 มิลลิโซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ที่ pH 5.0 ส่วนผสม,
หลังจากบ่มนาน 30 นาทีที่ 70 องศาเซลเซียสถูกต้มเป็นเวลา 5 นาทีใน
การแสดงตนของ 1 มิลลิลิตรของ DNS น้ำตาลลดปล่อยวัด
โดยใช้ Spectrophotometer (Biomate ™ -3, เทอร์โมวิทยาศาสตร์,
อัลฟา Numerix, Woodfield Dr, เว็บสเตอร์, นิวยอร์ก, ประเทศสหรัฐอเมริกา) ที่ 540 นาโนเมตรโดย
ใช้มอลโตสเป็นน้ำตาลลดมาตรฐาน หน่วยหนึ่งของอะไมเลส
กิจกรรมถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ผลิต
1 lmol ของมอลโตสต่อนาทีภายใต้การทำงานของเอนไซม์
เงื่อนไข
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4 . กิจกรรมการทดสอบอะไมเลส
วัดจากกิจกรรมตาม มิลเลอร์ ( 1959 )
วิธีกับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปฏิกิริยาผสมรวม
0.5 มิลลิลิตรเอนไซม์และ 0.5 มิลลิลิตร 0.1% ของละลายแป้งละลาย
ใน 0.1 M 100 mM โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.0 . ส่วนผสม ,
หลังจากบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 70 C ถูกต้มนาน 5 นาที ใน 1 มิลลิลิตร
ตนของ DNSตัวลดน้ำตาลวัด
โดยใช้ Spectrophotometer ( ไบโอเมท™ - 3 , เทอร์โมวิทยาศาสตร์
อัลฟ่า numerix Woodfield , ดร , เว็บสเตอร์ , นิวยอร์ก , สหรัฐอเมริกา ) 540 nm โดย
ใช้มอลโตส เป็นมาตรฐานการลดน้ำตาล หน่วยหนึ่งของกิจกรรม a-amylase
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ผลิต
1 lmol ของน้ำตาลต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขกิจกรรม
เอนไซม์
การแปล กรุณารอสักครู่..