In this study, we tested the hypoth

In this study, we tested the hypothesis that the amount of nerve growth factor (NGF) required for pheochromocytoma (PC12) cell culture can be dramatically reduced by controlled release of NGF from a collagen gel coating on the culture surface. Cells were cultured on collagen gels loaded with various amounts of NGF. As a control, PC12 cells were cultured on collagen gels with daily addition of various amounts of NGF to the culture medium. After an initial 12 h burst, NGF was steadily released from the gels for 4 days. Apoptotic activity and cell viability were determined using terminal uridine nick end labeling and the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, respectively. Neuronal differentiation was determined using immunocytochemistry and Western blot analysis. Compared to 100 ng NGF daily addition (300 ng over 3 days), 10 ng NGF daily addition showed dramatically decreased cell viability and neuronal differentiation and increased apoptotic activity. In contrast, collagen gels loaded with 10 ng NGF yielded cell viability, apoptotic activity, and neuronal differentiation similar to those of culture with 100 ng NGF daily addition. Our method reduced the amount of NGF required for PC12 cell culture to 1/3th of that used in daily addition without affecting cell viability, apoptosis, or differentiation. This method could economize large-scale culture of stem cells by reducing the amount of costly growth factors needed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการศึกษานี้ เราทดสอบสมมติฐานที่ว่า จำนวนเส้นประสาทเจริญเติบโตปัจจัย (NGF) จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ pheochromocytoma (PC12) สามารถอย่างมากลดลง โดยควบคุมปล่อยของ NGF จากสารเคลือบผิวเจลคอลลาเจนบนผิววัฒนธรรม เซลล์มีอ่างบนคอลลาเจนมีจำนวน NGF ต่าง ๆ เป็นตัวควบคุม PC12 เซลล์มีอ่างบนคอลลาเจนทุกวันบวกจำนวน NGF ปานกลางวัฒนธรรมต่าง ๆ หลังจากเริ่มต้น 12 h ระเบิด NGF ลำออกจากเจวัน 4 Apoptotic กิจกรรมเซลล์ชีวิตถูกกำหนดและใช้ติดฉลากสิ้นนิค uridine เทอร์มินัลและวิเคราะห์โบรไมด์ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium ตามลำดับ Neuronal สร้างความแตกต่างที่ถูกกำหนดโดยใช้ immunocytochemistry และการวิเคราะห์คืนในตาตะวันตก เมื่อเทียบกับ 100 ng NGF นี้ทุกวัน (300 ng มากกว่า 3 วัน), 10 ng NGF วันแสดงให้เห็นชีวิตของเซลล์ลดลงอย่างมากและสร้างความแตกต่าง neuronal และเพิ่มกิจกรรม apoptotic ในทางตรงกันข้าม คอลลาเจนเจโหลด ด้วย 10 ng NGF ผลเซลล์ชีวิต กิจกรรมของ apoptotic และ neuronal สร้างความแตกต่างที่ใกล้เคียงกับวัฒนธรรมกับ 100 ng NGF นี้ทุกวัน วิธีของเราลดลงจำนวน NGF ที่จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ PC12 1/บุหงา ที่ใช้นอกจากนี้ทุกวัน โดยไม่มีผลกระทบต่อชีวิตเซลล์ apoptosis หรือสร้างความแตกต่าง วิธีนี้สามารถประหยัดวัฒนธรรมใหญ่ของสเต็มเซลล์ โดยการลดจำนวนของปัจจัยการเจริญเติบโตค่าใช้จ่ายที่จำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการศึกษานี้เราได้ทดสอบสมมติฐานว่าปริมาณของปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) ที่จำเป็นสำหรับการ pheochromocytoma (PC12) การเพาะเลี้ยงเซลล์จะลดลงอย่างมากโดยการควบคุมการปลดปล่อยของเอ็นจีจากคอลลาเจนเจลเคลือบบนพื้นผิววัฒนธรรม เซลล์ที่ถูกเลี้ยงในเจลคอลลาเจนที่เต็มไปด้วยปริมาณต่างๆของเอ็นจี การควบคุมเซลล์ PC12 ถูกเลี้ยงในเจลคอลลาเจนที่มีการเพิ่มรายวันของปริมาณต่างๆของ NGF กลางวัฒนธรรม หลังจากที่เริ่มต้นระเบิด 12 ชั่วโมง, เอ็นจีได้รับการปล่อยตัวจากเจลอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 4 วัน กิจกรรมในกระบวนการตายและมีชีวิตเซลล์ได้รับการพิจารณาโดยใช้ขั้ว uridine ติดฉลากปลายกรงขังและ 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5-diphenyltetrazolium ทดสอบโบรไมด์ตามลำดับ ความแตกต่างของเส้นประสาทถูกกำหนดโดยใช้ immunocytochemistry และการวิเคราะห์ดวงตะวัน เมื่อเทียบกับ 100 นาโนกรัม NGF นอกจากนี้ในชีวิตประจำวัน (300 นาโนกรัมในช่วง 3 วัน) 10 นาโนกรัม NGF นอกจากนี้แสดงให้เห็นความมีชีวิตประจำวันลดลงอย่างมากและความแตกต่างของเซลล์ประสาทและเพิ่มกิจกรรมที่เกิด apoptosis ในทางตรงกันข้ามเจลคอลลาเจนที่เต็มไปด้วย 10 นาโนกรัม NGF ผลมีชีวิตเซลล์ apoptotic กิจกรรมและความแตกต่างของเส้นประสาทที่คล้ายกับที่ของวัฒนธรรมที่มี 100 นาโนกรัม NGF นอกจากนี้ทุกวัน วิธีการของเราลดปริมาณของ NGF จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ PC12 1/3 ของที่ใช้ในชีวิตประจำวันนอกจากนี้โดยไม่มีผลต่อการมีชีวิตเซลล์ apoptosis หรือความแตกต่าง วิธีนี้สามารถประหยัดวัฒนธรรมขนาดใหญ่ของเซลล์ต้นกำเนิดโดยการลดปริมาณของปัจจัยการเจริญเติบโตค่าใช้จ่ายที่จำเป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษาครั้งนี้ได้ทดสอบสมมติฐานที่ว่า จำนวนของปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท ( ngf ) ที่จำเป็นสำหรับอีเห็นน้ำมลายู ( pc12 ) เซลล์เพาะเลี้ยงสามารถลดลงอย่างมากโดยควบคุมการปลดปล่อยของ ngf จากคอลลาเจนเจลเคลือบบนพื้นผิวของวัฒนธรรม เซลล์เพาะเลี้ยงบนคอลลาเจนเจลโหลดกับปริมาณต่างๆของ ngf . เป็นตัวควบคุมpc12 เซลล์เพาะเลี้ยงบนคอลลาเจนเจลด้วยนอกจากนี้ทุกวันปริมาณต่างๆของ ngf กับวัฒนธรรมสื่อ หลังจากเริ่มต้น 12 ชั่วโมง ระเบิด ngf ถูกปล่อยตัวจากเจลอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 4 วัน กิจกรรมกลุ่มที่มีเซลล์ถูกใช้ terminal ยูริดีนนิคจบการติดฉลากและ 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2,5-diphenyltetrazolium โบรไมด์ ) ตามลำดับการกำหนดและวิเคราะห์ความแตกต่างโดยใช้ immunocytochemistry Western blot . เมื่อเทียบกับ 100 ng ngf ทุกวัน นอกจากนี้ ( 300 ng เกิน 3 วัน ) 10 กรัม ngf ทุกวัน นอกจากนี้พบว่า ลดลงอย่างมาก และการสร้างเซลล์ และในกลุ่มที่มีกิจกรรมที่เพิ่มขึ้น ในทางตรงกันข้าม , คอลลาเจนเจลบรรจุ 10 ng ngf จำนวนเซลล์ในกลุ่มที่มีกิจกรรม ,การสร้างความแตกต่างและคล้ายคลึงกับวัฒนธรรมด้วย 100 ng ngf ทุกวัน นอกจากนี้ วิธีการลดปริมาณของ ngf ที่จําเป็นสําหรับ pc12 เซลล์ไป 1 / 3 ของที่ใช้มากขึ้นทุกวัน โดยไม่มีผลต่อเซลล์ ( หรือการเปลี่ยนแปลง . วิธีนี้จะประหยัดสเต็ม เซลล์ขนาดใหญ่ วัฒนธรรม โดยการลดปริมาณของแพงปัจจัยการเจริญเติบโตเป็น