Nuclease p1 produced by Penicillium

Nuclease p1 produced by Penicillium citrinum was purified and characterized. Fermentation was carried out for 49 h for optimum production.
The enzyme was purified to homogeneity according to SDS-PAGE by thermal deactivation, ultrafiltration, (NH4)2SO4 precipitation, phenyl
sepharose chromatography, ion-exchange chromatography and gel filtration. This protocol improved 93-fold purification and 5.4% recovery of
enzyme activity. The molecular mass of nuclease p1 from Penicillium citrinum was estimated to be in the range from 43 to 44 kDa. The enzyme
showed an obligate requirement for Zn2+ for activity. K+ had a significant effect on enzyme activity. Mg2+ and Ca2+ had a slight positive effect on
enzyme activity. While Cu2+, Co2+, Al3+, SDS and Triton X-100 were strong inhibitors of nuclease p1. The enzyme was completely stable in the pH
range from 5 to 6.5 and had a pH optimum of 5.4. The optimum temperature of nuclease p1 was 69 8C and enzyme was stable up to 70 8C. Km and
Vmax for the purified enzyme were 24.28 mg/ml and 0.36 mg/ml min, respectively, with RNA as substrate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Nuclease p1 ผลิตโดย Penicillium citrinum บริสุทธิ์และโดดเด่น การหมักได้รับการดำเนินการ 49 ชั่วโมงสำหรับการผลิตที่เหมาะสม.
เอนไซม์บริสุทธิ์เพื่อความสม่ำเสมอตาม SDS-PAGE จากการหมดอายุความร้อนกรอง (NH4) 2SO4 ฝน, ฟีนิล
โค Sepharose, โครมาแลกเปลี่ยนไอออนและการกรองเจล โปรโตคอลนี้ดีขึ้นทำให้บริสุทธิ์ 93 เท่าและการกู้คืน 5.4% ของ
เอนไซม์ มวลโมเลกุลของ p1 nuclease จาก Penicillium citrinum เป็นที่คาดกันว่าจะอยู่ในช่วง 43-44 กิโลดาลตัน เอนไซม์ที่
แสดงให้เห็นความต้องการภาระสำหรับ Zn2 + กิจกรรม K + มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในการทำงานของเอนไซม์ Mg2 + และ Ca2 + มีผลบวกเล็กน้อยใน
การทำงานของเอนไซม์ ในขณะที่ Cu2 + Co2 + Al3 + SDS และ Triton X-100 เป็นสารยับยั้งที่แข็งแกร่งของ p1 นิ เอนไซม์ได้อย่างสมบูรณ์มีเสถียรภาพในค่า pH
ช่วง 5-6.5 และมีค่า pH ที่เหมาะสม 5.4 อุณหภูมิที่เหมาะสมของ p1 nuclease 69 8C และเอนไซม์ที่มีเสถียรภาพได้ถึง 70 8C ค่า Km และ
Vmax สำหรับเอนไซม์เป็น 24.28 mg / ml และ 0.36 มิลลิกรัม / นาทีมิลลิลิตรตามลำดับโดยมีอาร์เอ็นเอเป็นสารตั้งต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Nuclease p1 produced by Penicillium citrinum was purified and characterized. Fermentation was carried out for 49 h for optimum production.
The enzyme was purified to homogeneity according to SDS-PAGE by thermal deactivation, ultrafiltration, (NH4)2SO4 precipitation, phenyl
sepharose chromatography, ion-exchange chromatography and gel filtration. This protocol improved 93-fold purification and 5.4% recovery of
enzyme activity. The molecular mass of nuclease p1 from Penicillium citrinum was estimated to be in the range from 43 to 44 kDa. The enzyme
showed an obligate requirement for Zn2 for activity. K had a significant effect on enzyme activity. Mg2 and Ca2 had a slight positive effect on
enzyme activity. While Cu2 , Co2 , Al3 ,SDS และ Triton X-100 ยับยั้งแรงของนิวเคลียส P1 . เอนไซม์มีเสถียรภาพอย่างสมบูรณ์ในช่วง pH
5 - 6.5 และมี pH ที่เหมาะสมของ 5.4 . อุณหภูมิที่เหมาะสมของนิวเคลียส P1 คือ 69 8C และ เอนไซม์ขึ้น 70 8C . km และ
Vmax สำหรับเอนไซม์คือ 24.28 mg / ml และ 0.36 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรต่อนาที ตามลำดับ มี RNA เป็นสับสเตรท