2.4. Isolation and quantification o

2.4. Isolation and quantification of exopolysaccharides (EPS)
EPS was isolated from the media according to a method modified
from Liu et al. [5]. Lactobacillus (1 109 CFU/mL) were inoculated
(1%, v/v) into 200 mL of MRS broth supplemented with 2%
glucose at 37 C for 24 h. The bacterial cells were removed by
centrifugation at 6000 g for 10 min. Trichloroacetic acid was
added to the supernatant liquid to a final concentration of 4% (w/v),
and the mixturewas stirred at 4 C for 3 h. The precipitated proteins
were removed by centrifugation at 22,000 g for 30 min. The
supernatant liquid was then concentrated five times by evaporation.
The EPS was precipitated by adding four volumes of 95% cold
ethanol and then stored at 4 C for 24 h, followed by centrifugation
at 22,000 g at 4 C for 20 min. The precipitated EPS was dialyzed
(molecular weight cut-off: 6000 Da to 8000 Da) at 4 C for 48 h and
then lyophilized to obtain a dried powder. The amount of total EPS
was measured using the phenolesulfuric acid method [7].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การแยกและนับของ exopolysaccharides (EPS)EPS ถูกแยกต่างหากจากสื่อตามวิธีการปรับเปลี่ยนจากหลิว et al. [5] มี inoculated แลคโตบาซิลลัส (1 109 CFU/mL)(1%, v/v) เป็น 200 mL ของ MRS ซุปเสริม ด้วย 2%กลูโคสที่ 37 C ใน 24 ชม ออกจากเซลล์แบคทีเรียcentrifugation ที่ g 6000 สำหรับ 10 นาทีกรด Trichloroacetic ถูกเพิ่มของเหลว supernatant จะเข้มข้นสุดท้าย 4% (w/v),และ mixturewas การกวนที่ 4 C สำหรับ 3 h โปรตีน precipitatedถูกลบ โดย centrifugation ที่ g 22000 ใน 30 นาทีของเหลว supernatant ถูกแล้วงวดห้าครั้งEPS ถูกตกตะกอน ด้วยการเพิ่มวอลุ่ม 4 เย็น 95%เอทานอลแล้ว เก็บไว้ที่ 4 C ใน 24 ชม ตาม centrifugationที่ g 22000 ที่ C 4 ใน 20 นาที Precipitated EPS เป็น dialyzed(น้ำหนักโมเลกุลตัด: ดา 6000 กับ 8000 ดา) ที่ 4 C สำหรับ 48 h และแล้ว lyophilized รับผงแห้ง จำนวนรวม EPSถูกวัดโดยวิธีกรดของ phenolesulfuric [7]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การแยกและปริมาณของ exopolysaccharides (EPS)
กำไรต่อหุ้นที่แยกได้จากสื่อการตามวิธีการแก้ไข
จากหลิวและคณะ [5] แลคโตบาซิลลัส (1 109 CFU / มิลลิลิตร) ถูกเชื้อ
(1% v / v) เป็น 200 มิลลิลิตรของน้ำซุป MRS เสริมด้วย 2%
กลูโคสที่ 37 C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์แบคทีเรียที่ถูกถอดออกโดย
การหมุนเหวี่ยงที่ 6000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที กรดไตรคลอโรถูก
เพิ่มเข้าไปในของเหลวใสที่จะมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 4% (w / v)
และ mixturewas กวนที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง โปรตีนตกตะกอน
ถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 22,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาที
ของเหลวใสเข้มข้นแล้วห้าครั้งโดยการระเหย.
กำไรต่อหุ้นได้รับการตกตะกอนโดยการเพิ่มสี่เล่ม 95% เย็น
เอทานอลแล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงตามด้วยการหมุนเหวี่ยง
ที่ 22,000 กรัมที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที กำไรต่อหุ้นตกตะกอนถูก dialyzed
(น้ำหนักโมเลกุล cut-off: 6000 ดาดา 8000) ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ
แห้งแล้วจะได้รับผงแห้ง ปริมาณของกำไรทั้งหมด
ได้รับการวัดโดยใช้วิธีการที่กรด phenolesulfuric [7]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การแยกและปริมาณของ exopolysaccharides ล้านบาท ( EPS )
แยกจากสื่อตามวิธีแก้ไข
จาก Liu et al . [ 5 ] แลคโตบาซิลัส ( 1 109 CFU / มิลลิลิตร หัวเชื้อ
( 1 % v / v ) 200 มล. MRS broth เติม 2 %
กลูโคสที่ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์แบคทีเรียที่ถูกกำจัดโดย
3 6 , 000 กรัม นาน 10 นาที กรดไตรคลอโรอะซิติกถูก
เพิ่มของเหลวที่นำให้ความเข้มข้นสุดท้าย 4 % ( w / v )
และ mixturewas กวนที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมงตกตะกอนโปรตีน
ถูกเอาออกโดยการเหวี่ยงแยก 22 , 000 กรัมเป็นเวลา 30 นาที จากนั้นนำ
ของเหลวเข้มข้น 5 เท่า โดยการระเหย .
EPS มาตกตะกอน โดยการเพิ่มสี่เล่ม 95% เย็น
เอทานอลแล้วเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ตามด้วย 3
22 , 000 กรัม ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที ตกตะกอน EPS คือซิ
( น้ำหนักโมเลกุล : 6000 ถึง 8000 ตัดดา ดา ) ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ
แล้วไลโอได้รับแห้งผง จํานวนทั้งหมด EPS
ถูกวัดโดยใช้วิธี phenolesulfuric [ กรด
7 ]