Isolation and identification of bac

Isolation and identification of bacterial strains
Bacterial strains associated with Artemia cysts were
isolated according the following procedure: 0.01 g of Artemia
cysts recovered from Sebkhat El Adhibet in the South East of
Tunisia (33°44 N – 10°46 E) were incubated in 60 ml sterile
falcons containing 30 ml of filtered and autoclaved sea water
(FASW) (salinity 34 g l-1 and pH 7.99) at Shaker incubator
(28°C, 120 rpm) and exposed to constant incandescent light of
Shaker (Lab-Line Orbit Environ-Shaker). Under these
conditions, hatched larvae appeared after 18 to 20 hours of
incubation. Water samples (1 ml) were enriched 24 h at 30° C
in nutrient broth sea water (NBSW) (salinity 34 g l-1 and pH
7.99) and speared on nutrient agar plate and incubated at 30 °C.
The most appeared colonies were reisolated on Petri plates
with nutrient agar. Gram negative rods were identified using
Rapid NF Plus strips (Remel. USA) according the
manufacture’s recommendation.
Isolation and identification of yeast strain (Candida utilis)
Pure culture of Candida utilis used in this study was
isolated on Sabuoraud agar plate from the American biomass
known as “Kambautcha” in our Laboratory. Biochemical
characterization of Candida utilis was carried out by Api 20 C
Aux (Bio Merieux, France) test.
Well diffusion agar assay (WDAA)
Potential probiotic strains were tested for their antagonistic
activity using the well diffusion agar assay (WDAA) (34)
against three target strains: Vibrio parahemolitycus
ATCC17802, Vibrio alginolyticus ATCC17749, and Vibrio
alginolyticus (S1) isolated from infected fish previously
described by Ben Kahla-Nakbi et al.(2). The pathogenic
bacteria were grown in 10 ml of nutrient broth and cultured for
24 hours on nutrient agar at 30°C. The common colonies from
pure culture were suspended in 10 ml of physiological medium
and well mixed during 5 min. One ml was spread over the agar
plates. Potential probiotic strains were cultured in 10 ml
nutrient broth for 24 hours, 100 μl of the supernatant were
introduced into the wells of the MH agar medium and
incubated for a period of 24 h at 30 °C. Antibacterial activity
was defined as the diameter (mm) of the clear inhibitory zone
formed around the well.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแยกและจำแนกสายพันธุ์แบคทีเรียสายพันธุ์แบคทีเรียที่เกี่ยวข้องกับซีสต์อาร์ทีเมียถูกแยกตามขั้นตอนต่อไปนี้: 0.01 กรัมของอาร์ทีเมียซีสต์หายจากSebkhat เอ Adhibet ในตะวันออกเฉียงใต้ของตูนิเซีย(33 ° 44 N - 10 ° 46 E) ถูกบ่มใน 60 มล. หมันเหยี่ยวที่มี30 มิลลิลิตรกรองและมวลน้ำทะเล(FASW) (ความเค็ม 34 กรัม l-1 และค่า pH 7.99) ที่ศูนย์บ่มเพาะ Shaker (28 ° C, 120 รอบต่อนาที) และสัมผัสกับแสงจากหลอดไส้คงที่ของการปั่น(Lab-Line วงโคจร Environ-Shaker) ภายใต้เหล่านี้สภาพตัวอ่อนฟักปรากฏขึ้นหลังจาก 18-20 ชั่วโมงของการบ่ม ตัวอย่างน้ำ (1 มล.) ได้รับการอุดม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสในน้ำซุปสารอาหารทะเล(NBSW) (ความเค็ม 34 กรัม l-1 และค่า pH 7.99) และแทงบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส. อาณานิคมปรากฏมากที่สุด เป็นการเพิ่มประมาณอนุภาคถูกบนจานเพาะเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ แท่งแกรมลบที่ถูกระบุโดยใช้แถบอย่างรวดเร็วอิทพลัส (Remel. สหรัฐอเมริกา) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต. การแยกและจำแนกสายพันธุ์ยีสต์ (Candida utilis) วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของ utilis Candida ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับการแยกบนแผ่นSabuoraud วุ้นจากชีวมวลอเมริกันที่รู้จักกันขณะที่ "Kambautcha" ในห้องปฏิบัติการของเรา ชีวเคมีลักษณะของ utilis Candida ได้ดำเนินการโดย Api 20 C Aux (ไบโอ Merieux, ฝรั่งเศส) การทดสอบ. ทดสอบอาหารเลี้ยงเชื้อแพร่กระจายดี (WDAA) สายพันธุ์โปรไบโอติกที่มีศักยภาพได้รับการตรวจเป็นศัตรูของพวกเขากิจกรรมโดยใช้การทดสอบอาหารเลี้ยงเชื้อแพร่กระจายได้ดี (WDAA) (34) กับ สามสายพันธุ์เป้าหมาย: Vibrio parahemolitycus ATCC17802, Vibrio alginolyticus ATCC17749 และ Vibrio alginolyticus (S1) ที่แยกได้จากปลาที่ติดเชื้อก่อนหน้านี้. อธิบายโดยเบน Kahla-Nakbi et al, (2) ที่ทำให้เกิดโรคแบคทีเรียที่ถูกปลูกใน 10 มล. ของน้ำซุปและสารอาหารเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส อาณานิคมที่พบบ่อยจากเชื้อบริสุทธิ์ถูกระงับใน 10 มล. ของกลางทางสรีรวิทยาและผสมกันในช่วง5 นาที หนึ่งมิลลิลิตรแผ่กระจายไปทั่ววุ้นแผ่น โปรไบโอติกสายพันธุ์ที่มีศักยภาพในการเพาะเลี้ยง 10 มล. น้ำซุปสารอาหาร 24 ชั่วโมง 100 ไมโครลิตรของสารละลายที่ถูกนำเข้ามาในหลุมของกลางวุ้นMH และบ่มเป็นระยะเวลา24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ฤทธิ์ต้านแบคทีเรียถูกกำหนดเป็นขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง (มม) เขตยับยั้งที่ชัดเจนที่เกิดขึ้นรอบตัวได้เป็นอย่างดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกและจำแนกสายพันธุ์แบคทีเรีย
สายพันธุ์แบคทีเรียที่เกี่ยวข้องกับ artemia )
แยกตามขั้นตอนต่อไปนี้ : 0.01 กรัม อาร์ทีเมีย
ซีสต์หายจาก sebkhat El adhibet ในทางตะวันออกเฉียงใต้ของ
ตูนิเซีย ( 33 / 44 / 46 – 10 ° E ) ) 60 ml เป็นหมัน
เหยี่ยวที่มี 30 มล. กรองและ สังเคราะห์น้ำทะเล
( fasw ) ( ความเค็ม 34 กรัม L-1 และ pH 799 )
( 28 องศา C เขย่าตู้ 120 รอบต่อนาที ) และสัมผัสกับแสงที่คงที่ของ
เครื่องปั่น ( โคจรเส้น Lab สิ่งแวดล้อมเครื่องปั่น ) ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้
, ฟักอ่อนปรากฏขึ้นหลังจาก 18 ถึง 20 ชั่วโมง
การบ่ม ตัวอย่างน้ำ 1 มิลลิลิตรอุดม 24 H 30 °องศาเซลเซียส
ในน้ำทะเล ( nbsw nutrient broth ) ( ความเค็ม 34 กรัม L-1 และ pH
- ) และ speared บนจานวุ้นสารอาหารและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C .
ส่วนใหญ่ปรากฏอยู่ในจาน Petri อาณานิคม reisolated
กับ NUMB3RS . แท่งกรัมลบที่ถูกระบุว่าใช้
NF อย่างรวดเร็วบวกแถบ ( remel . สหรัฐอเมริกา ) ตามคำแนะนำของผลิต
.
แยกและจำแนกสายพันธุ์ของยีสต์ Candida utilis )
เชื้อบริสุทธิ์ของ Candida utilis ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ
แยกบน sabuoraud agar plate จาก
ชีวมวลอเมริกันที่รู้จักกันเป็น " kambautcha " ในห้องปฏิบัติการของเรา ลักษณะสมบัติทางชีวเคมี
ของ Candida utilis กระทำโดย API 20 C
AUX ( ไบโอ merieux , ฝรั่งเศส ) ทดสอบ .
ดี agar ( wdaa )
3 สายพันธุ์ โปรไบโอติก ทดสอบศักยภาพของพันธุกรรม
ใช้ดี agar assay ( wdaa ) ( 34 )
กับสามเป้าหมาย parahemolitycus
atcc17802 เชื้อแบคทีเรียสายพันธุ์ : atcc17749 , Vibrio alginolyticus ,และ Vibrio alginolyticus
( S1 ) ที่แยกได้จากปลาที่ติดเชื้อก่อนหน้านี้
อธิบายโดยเบน ดาหลา nakbi et al . ( 2 ) แบคทีเรียก่อโรค
โตใน 10 ml ของน้ำสารอาหารและอาหาร
24 ชั่วโมงบนอาหารวุ้นสารอาหารที่ 30 องศา พบอาณานิคมจาก
เชื้อบริสุทธิ์ถูกระงับใน 10 ml ของร่างกายกลาง
และผสมกันระหว่าง 5 นาที 1 ml พบการแพร่กระจายมากกว่าวุ้น
แผ่นโปรไบโอติกสายพันธุ์ที่มีศักยภาพ เพาะเลี้ยงใน 10 ml
nutrient broth ตลอด 24 ชั่วโมง 100 μ L ของน่านคือ
แนะนำลงในอาหารวุ้น และบ่อของ MH
บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 30 องศา มีการกิจกรรม
หมายถึงเส้นผ่านศูนย์กลาง ( มม. ) ของชัดเจน
โซนยับยั้งที่เกิดขึ้นรอบ ๆ ดี