Materials and methods:
Survey was done in seven areas of Kota districts in Rajasthan namely
Bargoan, Dadhevi, Ratkankara, Kalatalo, Mandana, Nanta and Ranpur
to find out the areas of production of smooth gourd. 120 seed samples
and plant parts were collected and screened using ISTA methods.
Dry seed examination of the seed samples was done and they were
categorised as symptomless and symptomatic carrying infection of
brown discoloured seeds. Samples of infected plant material were
also collected and subjected to dry seed examination, SBM and PDA
tests. In standard blotter test 10 seeds per plate were spaced in sterilized
petriplate containing three well moistened blotters and incubated
at 26 ± 20C under 12 h of alternating cycles of artificial light from
Phillips fluorescent tube fitted at a distance of 60cm apart and darkness
for seven days (Anon, 1985). Percentage of seed germination,
seed borne mycoflora, its percent incidence, pattern of fungal growth,
its effect on germination, seedling symptoms and other abnormalities
in seedlings were recorded on eight day of incubation. A few cases
incubation was prolonged and observations were made on 14th days.
While in PDA forty three seed samples belonging to all seven areas
of Kota districts of Rajasthan were studied. Sterilized seeds and plant
parts were aseptically plated on petriplates (10 seeds/ petriplate) containing
15-20 ml of PDA media and incubated for 7 days at 26 ± 20C
in 12h/12h of alternating cycles of artificial day light and darkness.
Percent incidence of mycoflora, seed germination and abnormality of
seedlings were examined by naked eyes as well as under stereo binocular
microscope on eight day of incubation.
For component plating seeds were soaked for 6-12hrs in sterilized water
individually, and seed components viz. seed coat, aleurone layer,
cotyledons and embryonal axis were dissected aseptically with the
help of sterilized forceps and a pair of needles under stereobinocular
microscope and inoculated at 26 ± 20C.
For wholemount preparations seeds were boiled in 10% KOH for 15
minutes to clear the tissue, washed thoroughly and seed coat, aleurone
layer, cotyledons and embryonal axis were separated. Each component
was boiled separately in 10ml of lacto phenol containing 2ml
of trypan blue/ cotton blue (1:1 v/v) for about 15 min and mounted in
polyvinyl alcohol (Singh, Mathur and Neergaard, 1977).
For microtomy usual microtome techniques were followed (Johansen,
1940). The wax embedded seeds were chopped from one side and
emerged in 1% aqueous solution of sodium lauryl sulphate for 12
hrs (1:1 v/v) and then transferred to acetoglycerine (mixture of acetic
acid+ glycerol in 1:1 ratio) for seven days for further softening. Blocks
were cut through microtome at 15-20 μ thickness, deparaffinised,
stained with safranine and light green combination and mounted
in DPX. For further studies two samples were selected, one form the
Bargoan (Sg-47) and other from Mandana (Sg-86) of Kota districts in
Rajasthan.
วัสดุและวิธีการ:สำรวจทำในพื้นที่ 7 อำเภอโกในรัฐราชสถานคือBargoan, Dadhevi, Ratkankara, Kalatalo, Mandana อควา และ Ranpurการหาพื้นที่การผลิตมะระเรียบ ตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ 120และชิ้นส่วนถูกเก็บรวบรวม และตรวจใช้วิธี ISTAการตรวจสอบตัวอย่างเมล็ดพันธุ์เมล็ดแห้งเสร็จเรียบร้อยแล้ว และพวกเขาจัดเป็น symptomless และดำเนินการติดเชื้ออาการน้ำตาลฮอร์โมนเมล็ด ตัวอย่างของวัสดุจากพืชติดเชื้อได้นอกจากนี้ยังรวบรวม และหักแห้งตรวจสอบเมล็ดพันธุ์ SBM และ PDAทดสอบ ในการทดสอบมาตรฐานป่านนี้ 10 เมล็ดต่อแผ่นถูกเว้นระยะห่างในการฆ่าเชื้อpetriplate ที่ประกอบด้วยสามดีชื้น blotters และได้รับการกกที่ 26 ± 20C 12 ชม.สลับรอบแสงไฟจากฟิลลิปส์ฟลูออเรสเซนต์หลอดติดตั้งในระยะห่าง 60 ซม.และความมืดสำหรับเจ็ดวัน (Anon, 1985) เปอร์เซ็นต์การงอกของเมล็ดเมล็ดลม mycoflora เป็นอุบัติการณ์ร้อยละ รูปแบบการเจริญเติบโตของเชื้อรามีผลต่อการงอก อาการต้นกล้า และความผิดปกติอื่น ๆต้นกล้าถูกบันทึกลงในวันที่แปดของการกกไข่ บางกรณีกกไข่ได้นาน และทำข้อสังเกตในวันที่ 14ในตัวอย่างเมล็ด PDA สามสี่สิบของพื้นที่ทั้งหมดเจ็ดขณะของโก ได้ศึกษาอำเภอของรัฐราชสถาน เมล็ดที่ผ่านการฆ่าเชื้อและโรงงานส่วน aseptically ได้ถูกชุบบน petriplates (10 เมล็ด / petriplate) ที่ประกอบด้วย15-20 ml ของ PDA สื่อ และได้รับการกก 7 วันที่ 26 ± 20Cใน 12 ชม. 12 ชั่วโมงสลับรอบแสงประดิษฐ์วันและความมืดอุบัติการณ์ร้อยละ mycoflora การงอกของเมล็ด และความผิดปกติของต้นกล้าถูกตรวจสอบ ด้วยตาเปล่าเช่นเดียว กับภาย ใต้สเตอริโอส่องทางไกลกล้องจุลทรรศน์ในวันที่แปดของกกไข่สำหรับคอมโพเนนต์ชุบ เมล็ดที่แช่สำหรับ 6-12hrs ในน้ำผ่านการฆ่าเชื้อแต่ละ และเมล็ดส่วนประกอบได้แก่เมล็ดพันธุ์ ตรา ชั้น aleuronecotyledons และแกน embryonal ถูก dissected aseptically กับการคีมที่ผ่านการฆ่าเชื้อและคู่ของเข็มภายใต้ stereobinocularกล้องจุลทรรศน์ และ inoculated ที่ 26 ± 20 เซลเซียสสำหรับ wholemount การเตรียมเมล็ดที่ต้มใน 10% เกาะ 15นาทีเพื่อล้างเนื้อ เยื่อ ล้างสะอาด และเมล็ด aleuroneชั้น cotyledons embryonal แกนถูกแยกออกจากกัน แต่ละส่วนประกอบถูกต้มแยกต่างหากใน 10 มล.ของแลคโตวางประกอบด้วย 2 มล.ของ trypan น้ำเงิน/ ผ้าฝ้ายสีน้ำเงิน (1:1 v/v) ประมาณ 15 นาที และติดตั้งโพลีไวนิลแอลกอฮอล์ (สิงห์ Mathur และ Neergaard, 1977)สำหรับ microtomy microtome ปกติเทคนิคถูกตาม (Johansen1940) . ขี้ผึ้งฝังเมล็ดถูกสับจากด้านหนึ่ง และมา 1% ละลายของโซเดียม lauryl ซัลเฟต 12น. (1:1 v/v) แล้ว โอนย้ายไป acetoglycerine (ส่วนผสมของอะซิติกกรด + กลีเซอรในอัตราส่วน 1:1) เจ็ดวันสำหรับอ่อนเพิ่มเติม บล็อกถูกตัดผ่าน microtome ที่ความหนา 15-20 μ deparaffinisedสี safranine และชุดสีเขียวอ่อน และติดตั้งใน DPX การศึกษาต่อไปเลือกตัวอย่างที่สอง รูปแบบหนึ่งBargoan (จำนวน 47) และอื่น ๆ จาก Mandana ที่ (จำนวน 86) ในเมืองโกตาในรัฐราชสถาน
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ:
การสำรวจที่ทำในเจ็ดพื้นที่ของอำเภอโกตาในรัฐราชสถานคือ
Bargoan, Dadhevi, Ratkankara, Kalatalo, Mandana, Nanta และ Ranpur
ที่จะหาพื้นที่ของการผลิตของมะระเรียบ 120 ตัวอย่างเมล็ด
และส่วนต่างๆของพืชถูกเก็บรวบรวมและคัดกรองโดยใช้วิธีการ ISTA.
ตรวจสอบเมล็ดแห้งของตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ได้ทำและพวกเขาก็
แบ่งเป็น symptomless และมีอาการติดเชื้อตามบัญชีของ
เมล็ดสีน้ำตาลสีซีดจาง ตัวอย่างของวัสดุจากพืชที่ติดเชื้อถูก
ยังได้รวบรวมและอยู่ภายใต้การตรวจสอบให้แห้งเมล็ด SBM และ PDA
ทดสอบ ในการทดสอบหมึกมาตรฐาน 10 เมล็ดต่อแผ่นถูกเว้นระยะห่างในการฆ่าเชื้อ
petriplate สามประจำวันอย่างดีชุบและบ่ม
ที่อุณหภูมิ 26 ± 20C อายุต่ำกว่า 12 ชั่วโมงสลับรอบของแสงประดิษฐ์จาก
ฟิลลิปหลอดนีออนติดตั้งที่ระยะ 60 ซมออกจากกันและความมืด
เป็นเวลาเจ็ดวัน ( อานนท์, 1985) ร้อยละของการงอกของเมล็ด,
เมล็ดพันธุ์พาหะ mycoflora อุบัติการณ์ร้อยละรูปแบบของการเจริญเติบโตของเชื้อรา,
ผลกระทบต่อการงอกของต้นกล้าและอาการผิดปกติอื่น ๆ
ในต้นกล้าได้รับการบันทึกไว้ในวันที่แปดของการบ่ม บางกรณี
การบ่มได้รับเป็นเวลานานและข้อสังเกตที่ถูกสร้างขึ้นในวันที่ 14.
ขณะที่อยู่ใน PDA สี่สิบสามตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ที่อยู่ในพื้นที่ทั้งเจ็ด
ของอำเภอโกตาของรัฐราชสถานศึกษา เมล็ดฆ่าเชื้อและโรงงาน
ชิ้นส่วนถูกชุบปลอดเชื้อใน petriplates (10 เมล็ด / petriplate) ที่มี
15-20 มล. ของสื่อ PDA และบ่มเป็นเวลา 7 วันที่ 26 ± 20C
ใน 12h / 12h สลับรอบของแสงวันเทียมและความมืด.
ร้อยละอุบัติการณ์ของ mycoflora, งอกและความผิดปกติของ
ต้นกล้าได้รับการตรวจสอบโดยตาเปล่าเช่นเดียวกับภายใต้สเตอริโอสองตา
กล้องจุลทรรศน์ในวันที่แปดของการบ่ม.
สำหรับองค์ประกอบชุบเมล็ดแช่ในน้ำ 6-12hrs ฆ่าเชื้อ
เป็นรายบุคคลและส่วนประกอบเมล็ดพันธุ์ ได้แก่ เยื่อหุ้มเมล็ดชั้น aleurone,
ใบเลี้ยงและแกน embryonal ถูกชำแหละปลอดเชื้อด้วย
ความช่วยเหลือของคีมฆ่าเชื้อและคู่ของเข็มภายใต้ stereobinocular
กล้องจุลทรรศน์และเชื้อที่อุณหภูมิ 26 ± 20C.
สำหรับเมล็ดเตรียม wholemount ถูกต้มใน 10% KOH 15
นาทีเพื่อล้าง เนื้อเยื่อล้างให้สะอาดและเยื่อหุ้มเมล็ด, aleurone
ชั้นใบเลี้ยงและแกน embryonal ถูกแยกออก แต่ละองค์ประกอบ
ต้มแยกต่างหากใน 10ml ของฟีนอล lacto มี 2ml
สีฟ้า Trypan / สีฟ้าผ้าฝ้าย (1: 1 v / v) ประมาณ 15 นาทีและติดตั้งใน
. โพลีไวนิลแอลกอฮอล์ (ซิงห์ Mathur และ Neergaard, 1977)
สำหรับ microtomy เทคนิค microtome ปกติ ตามมา (ฮันเซน,
1940) เมล็ดขี้ผึ้งฝังถูกสับจากด้านหนึ่งและ
โผล่ออกมาใน 1% สารละลายโซเดียมลอริลซัลเฟตเป็นเวลา 12
ชั่วโมง (1: 1 v / v) และจากนั้นโอนไป acetoglycerine (ส่วนผสมของอะซิติก
กรด + กลีเซอรอลในอัตราส่วน 1: 1) เจ็ด วันสำหรับการชะลอตัวต่อไป บล็อก
ถูกตัดผ่าน microtome ที่ 15-20 หนาμ, deparaffinised,
ย้อมด้วยสี safranine และการรวมกันสีเขียวอ่อนและติดตั้ง
ใน DPX สำหรับการศึกษาต่อทั้งสองตัวอย่างได้รับการคัดเลือกเป็นหนึ่งในรูปแบบ
Bargoan (SG-47) และอื่น ๆ จาก Mandana (SG-86) ของอำเภอโกตาใน
รัฐราชสถาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
