Cellular ResponseTo evaluate the re

Cellular Response
To evaluate the response of neural cell populations to these biomaterials, the adhesion density and process extension of PC-12 cells were measured. Briefly, 150 μL of each sample type was evenly spread on the bottoms of standard 24-well flat bottom culture plates (Becton Dickinson Labware). Culture medium consisted of 84% high glucose DMEM, 12.5% platelet poor horse serum, 2.5% fetal bovine serum, and 1% PenStrep. Cells were plated atop chitosan, chitosan-genipin, and control surfaces of a tissue culture polystyrene (TCPS) at a density of 5.0 x104 cells/well with n=4 wells/sample. Culture plates were maintained in an incubator at 37oC and 5% CO2 for 96 hours. Cells were then fixed with 4% paraformaldehyde, permeabilized with 0.1% Triton X-100, and stained with propidium iodide (0.05 mg/mL). A Nikon Diaphot 300 microscope, Nikon mercury lamp, and a CCD (Diagnostic Instruments) were used for imaging. Adhesion density and process length were quantified with Image-J.
F. Statistical Analysis
Results are reported as mean values±standard error of the mean. One-tailed ANOVA was used to compare means: between groups. Post-hoc comparisons were performed using Tukey’s and Dunnet’s test. Significance was ascribed to p-values less than 0.05.
III. RESULTS
Rheometrical characterization of each chitosan-genipin revealed a trend of increasing storage modulus for every increase in genipin concentration (Figure 1). Concentrations of 0.05% genipin possessed a storage modulus of 13.53 Pa in the LVR, while 0.20% genipin yielded 239.92 Pa. Natural nerve tissue was significantly more deformable (p < 0.01) than all genipin-chitosan hydrogels at a LVR storage modulus of 1.15 Pa (Figure 2).
PC-12 cells plated atop genipin-chitosan gels adhered at a significantly greater density (p < 0.01) when compared to adhesion on TCPS and un-crosslinked chitosan substrates (Figure 3). Likewise, PC-12 process extension was measured on each surface. Chitosan did not have any identifiable process extension. In comparing process extension in all genipin-chitosan surfaces against TCPS, no significant differences were found (p > 0.05).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตอบรับโทรศัพท์การประเมินการตอบสนองของเซลล์ประสาทประชากรถึงวัสดุเหล่านี้ การยึดเกาะ แน่นและขยายกระบวนการพีซี-12 เซลล์ถูกวัด สั้น ๆ 150 μL ของแต่ละชนิดอย่างถูกกระจายบนพื้นของแผ่นวัฒนธรรมด้านล่างแบนทั้ง 24 มาตรฐาน (Becton สันมือ) สารที่ประกอบด้วยกลูโคสสูง 84% DMEM, 12.5% เกล็ดเลือดม้าจนเซรั่ม เซรั่มวัวทารก 2.5% และ 1% PenStrep เซลล์ถูกชุบบนไคโตซาน ไคโตซาน genipin และพื้นผิวควบคุมของโฟมเยื่อ (TCPS) ที่มีความหนาแน่นของ 5.0 x104 เซลล์/ดี ด้วย n = 4 หลุม/ตัวอย่าง วัฒนธรรมแผ่นถูกเก็บรักษาไว้ในตู้อบที่ 37oC และ 5% CO2 96 ชั่วโมง เซลล์ได้รับการแก้ไขแล้ว ด้วย 4% paraformaldehyde, permeabilized ด้วย 0.1% Triton X-100 และย้อม ด้วยไอโอไดด์ propidium (0.05 mg/mL) กล้องจุลทรรศน์ Nikon Diaphot 300, Nikon โคมไฟ และ CCD (วินิจฉัยเครื่องมือ) ใช้สำหรับการถ่ายภาพ ความหนาแน่นของการยึดเกาะและความยาวของกระบวนการถูกวัด ด้วยภาพเจเอฟการวิเคราะห์ทางสถิติจะรายงานผลเป็น values±standard หมายถึงข้อผิดพลาดของค่าเฉลี่ย ใช้เดียว ANOVA เปรียบเทียบหมายถึง: ระหว่างกลุ่ม เปรียบเทียบเฉพาะกิจโพสต์ถูกดำเนินการโดยใช้การทดสอบของ Tukey และของ Dunnet สำคัญคือกำหนดค่า p น้อยกว่า 0.05 นั้นIII. ผลRheometrical สมบัติของแต่ละไคโตซาน genipin เปิดเผยแนวโน้มของโมดูลัสเก็บเพิ่มทุกเพิ่มความเข้มข้น genipin (1 รูป) ความเข้มข้นของ genipin 0.05% ครอบครองเก็บโมดูลัสของ 13.53 Pa ใน LVR ในขณะที่ 0.20% genipin ผล 239.92 บางปะอินธรรมชาติเส้นประสาทอย่างมาก deformable (p < 0.01) กว่า hydrogels genipin ไคโตซานทุกท่านค่าโมดูลัสเก็บ LVR ของ 1.15 ป่า (2 รูป)พีซี-12 เซลล์ชุบบนไคโตซาน genipin เจปฏิบัติตามที่มีความหนาแน่นมาก (p < 0.01) เมื่อเทียบกับการยึดเกาะบน TCPS และกระแทกสหประชาชาติไคโตซานพื้นผิว (รูปที่ 3) ทำนองเดียวกัน ขยายกระบวนการพีซี-12 ถูกวัดในแต่ละพื้นผิว ไคโตซานไม่มีส่วนขยายของกระบวนการที่บุคคลใด ๆ ในการเปรียบเทียบกระบวนการขยายในทุกพื้นผิว genipin ไคโตซานกับ TCPS ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญพบ (p > 0.05)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตอบสนองของเซลลูล่าร์
เพื่อประเมินการตอบสนองของประชากรเซลล์ประสาทเพื่อวัสดุชีวภาพเหล่านี้ความหนาแน่นของการยึดเกาะและการขยายกระบวนการของ PC-12 เซลล์ถูกวัด สั้น ๆ , 150 ไมโครลิตรแต่ละประเภทตัวอย่างกระจายอย่างสม่ำเสมอบนพื้นของมาตรฐาน 24 หลุมแผ่นวัฒนธรรมด้านล่างแบน (Becton Dickinson Labware) กลางวัฒนธรรมประกอบด้วย 84% DMEM น้ำตาลสูง 12.5% ของเกล็ดเลือดซีรั่มม้ายากจน 2.5% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์และ 1% PenStrep เซลล์ที่ถูกชุบบนไคโตซานไคโตซาน genipin และพื้นผิวการควบคุมของสไตรีนการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (TCPS) ความหนาแน่นของเซลล์ 5.0 x104 A / ดีกับ n = 4 หลุม / ตัวอย่าง แผ่นวัฒนธรรมได้รับการเก็บรักษาไว้ในตู้อบที่ 37oC และ CO2 5% สำหรับ 96 ชั่วโมง เซลล์ได้รับการแก้ไขแล้วกับ 4% paraformaldehyde, permeabilized กับ 0.1% Triton X-100 และย้อมด้วยสีไอโอไดด์ propidium (0.05 mg / ml) กล้อง Nikon Diaphot 300 กล้องจุลทรรศน์, โคมไฟปรอท Nikon และ CCD (เครื่องมือวิเคราะห์) ถูกนำมาใช้สำหรับการถ่ายภาพ ความหนาแน่นของการยึดเกาะและระยะเวลาในขั้นตอนการได้รับการวัดที่มีภาพ-J
F. การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลการค้นหาจะรายงานเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย One-Tailed ANOVA ถูกใช้ในการเปรียบเทียบวิธีการ: ระหว่างกลุ่ม โพสต์เปรียบเทียบ-hoc ได้ดำเนินการโดยใช้การทดสอบ Tukey และ Dunnet ของ อย่างมีนัยสำคัญได้รับการกำหนดให้ P-ค่าน้อยกว่า 0.05
III ผล
ลักษณะของแต่ละ Rheometrical ไคโตซาน genipin เปิดเผยแนวโน้มของการเพิ่มการจัดเก็บข้อมูลสำหรับโมดูลัสเพิ่มความเข้มข้น genipin ทุก (รูปที่ 1) ความเข้มข้น 0.05% genipin ครอบครองโมดูลัสการจัดเก็บ 13.53 ต่อปีใน LVR ในขณะที่ 0.20% ส่งผลให้ผู้ genipin 239.92 Pa. ประสาทเนื้อเยื่อธรรมชาติอย่างมีนัยสำคัญมากขึ้น deformable (p <0 01) กว่าไฮโดรเจล genipin ไคโตซานที่โมดูลัสจัดเก็บ LVR 1.15 Pa (รูปที่ 2)
PC-12 เซลล์ชุบบนเจล genipin ไคโตซานยึดติดที่มีความหนาแน่นมากขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.01) เมื่อเปรียบเทียบกับการยึดเกาะบนพื้นผิว TCPS และไคโตซานยกเลิกการเชื่อมขวาง (รูปที่ 3) ในทำนองเดียวกันการขยาย PC-12 ขั้นตอนการวัดในแต่ละพื้นผิว ไคโตซานไม่ได้มีการขยายกระบวนการใด ๆ ที่สามารถระบุตัว ในการเปรียบเทียบการขยายกระบวนการในทุกพื้นผิว genipin ไคโตซานกับ TCPS ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p> 0.05) ขยาย PC-12 ขั้นตอนการวัดในแต่ละพื้นผิว ไคโตซานไม่ได้มีการขยายกระบวนการใด ๆ ที่สามารถระบุตัว ในการเปรียบเทียบการขยายกระบวนการในทุกพื้นผิว genipin ไคโตซานกับ TCPS ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p> 0.05) ขยาย PC-12 ขั้นตอนการวัดในแต่ละพื้นผิว ไคโตซานไม่ได้มีการขยายกระบวนการใด ๆ ที่สามารถระบุตัว ในการเปรียบเทียบการขยายกระบวนการในทุกพื้นผิว genipin ไคโตซานกับ TCPS ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p> 0.05)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตอบสนองของเซลล์เพื่อประเมินการตอบสนองของประชากรเซลล์ประสาทวัสดุชีวภาพเหล่านี้ การยึดเกาะของกระบวนการขยาย pc-12 เซลล์ถูกวัด สั้น ๆ , 150 μ L ของแต่ละตัวอย่างประเภททั่วถึงกระจายบนพื้นของมาตรฐานดีด้านล่างแบนวัฒนธรรมแผ่น ( เบคตอนดิกคินสัน Labware ) อาหารเลี้ยงเชื้อ จำนวน 84% dmem กลูโคสสูง 12.5 % เกล็ดเลือดจนม้า ซีรั่ม ซีรั่มโปรตีน 2.5% ของทารกในครรภ์ และ 1% เพ็นสเตรป . เซลล์มีการชุบบนไคโตซาน ไคโตซานเจนิพินและพื้นผิวการควบคุมของพอลิสไตรีน ( เพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ tcps ) ในอัตราความหนาแน่น 5.0 x104 เซลล์ / ด้วย n = 4 บ่อ / ตัวอย่าง แผ่นที่วัฒนธรรมถูกเก็บรักษาไว้ในตู้อบที่ 37oc และ CO2 ร้อยละ 5 เป็นเวลา 96 ชั่วโมง เซลล์แล้วแก้ไขด้วย 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์ permeabilized , 0.1 % Triton X-100 และย้อมด้วย propidium ไอโอไดด์ ( 0.05 มก. / มล. ) Nikon diaphot 300 กล้องจุลทรรศน์ Nikon , โคมไฟปรอท และ CCD ( เครื่องมือวินิจฉัย ) ใช้สำหรับถ่ายภาพ การยึดเกาะของกระบวนการที่มีความยาววัด image-j.การวิเคราะห์ทางสถิติ .ผลรายงานเป็นค่าเฉลี่ย±ความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย หนึ่งหาง ( ใช้เปรียบเทียบหมายถึง : ระหว่างกลุ่ม โพสต์ hoc การเปรียบเทียบและ dunnet โดยใช้คู่ของการทดสอบ ความหมายคือ ascribed เพื่อ p-values น้อยกว่า 0.053 . ผลลัพธ์คุณสมบัติของไคโตซาน rheometrical แต่ละเจนิพินพบมีแนวโน้มในการเพิ่มค่ากระเป๋าทุกเพิ่มความเข้มข้นในเจนิพิน ( รูปที่ 1 ) ความเข้มข้น 0.05 % เจนิพินมีกระเป๋าัส 13.53 PA ใน lvr ในขณะที่ร้อยละ 0.20 และป่าธรรมชาติ 239.92 เจนิพินเนื้อเยื่อเส้นประสาทอย่างมีนัยสำคัญยิ่ง ( P < 0.01 ) โดยกว่าเจลไคโตซานที่ lvr กระเป๋าเจนิพินัส 1.15 PA ( รูปที่ 2 )pc-12 เซลล์ชุบบนไคโตซานเจลยึดติดที่เจนิพินความหนาแน่นมากขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( p < 0.01 ) เมื่อเปรียบเทียบกับการยึดเกาะบนพื้นผิวชิ้นงาน tcps และสหประชาชาติ ไคโตซาน ( รูปที่ 3 ) อนึ่ง ส่งเสริม pc-12 กระบวนการวัดในแต่ละพื้นผิว ไคโตซานไม่มีกระบวนการระบุนามสกุล ในการส่งเสริมกระบวนการในเจนิพินไคโตซานพื้นผิวกับ tcps ไม่มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ ( p > 0.05 )