Human ESCs (H1, 2) were obtained fr

Human ESCs (H1, 2) were obtained from the University of Connecticut Stem Cell Core. Human iPSCs YK26 were reprogrammed from human dermal fibroblasts (HDF) using retroviral vectors as described (30) and Rx13 were reprogrammed from BJ human foreskin fibroblasts (HFF) using a single excisable polycistronic lentiviral Stem Cell Cassette (STEMCCA) encoding the Yamanaka factors at the University of Connecticut Stem Cell Core facility. Both ESCs and iPSCs were cultured on BD Matrigel (BD Biosciences) with irradiated mouse embryonic fibroblast-conditioned ESC media (GlobalStem) containing DMEM-F 12, 20% knockout serum replacer (Invitrogen), non-essential amino acids (NEAA Invitrogen), 1 mM L-glutamine (Invitrogen), 0.1 mM beta-mercaptoethanol (Sigma) and 4 ng/ml basic Fibroblast Growth Factor (bFGF, Invitrogen). HDFa cells (ATCC) and human foreskin fibroblasts (HFF) (ATCC) were cultured in DMEM containing 10% fetal bovine serum (FBS, Gibco), and NEAA. Hec59 cells (kind gift of Drs. Thomas Kunkel and Alan Clark) were grown in DMEM/F 12 containing 10% FBS. HeLa cells (ATCC) were grown in DMEM containing 10% FBS.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มนุษย์ ESCs (H1, 2) ได้รับจากแกนนำเซลล์ต้นกำเนิดมหาวิทยาลัยคอนเนตทิคัต มนุษย์ iPSCs YK26 ถูก reprogrammed จากมนุษย์ประมาณ fibroblasts (HDF) โดยใช้เวกเตอร์ retroviral อธิบาย (30) และถูก reprogrammed Rx13 จาก BJ fibroblasts มนุษย์หนังหุ้มปลาย (HFF) ใช้ polycistronic ตสินค้าตัวเดียว lentiviral เซลล์ต้นกำเนิดเทป (STEMCCA) เข้าในยามานากะปัจจัยที่สิ่งอำนวยความสะดวกหลักของเซลล์ต้นกำเนิดมหาวิทยาลัยคอนเนตทิคัต ESCs และ iPSCs มีอ่างใน BD Matrigel (เวลาออก BD) กับเมาส์ irradiated ตัวอ่อนปรับอากาศ fibroblast ESC สื่อ (GlobalStem) DMEM F 12, 20% ชนะน็อกโดยเทคนิคเซรั่มเทียมเลี้ยงลูกโค (Invitrogen), กรดอะมิโนไม่จำเป็น (NEAA Invitrogen), 1 mM L glutamine (Invitrogen), 0.1 mM เบต้า-mercaptoethanol (ซิกมา) และ ng/ml ที่ 4 ปัจจัยการเจริญเติบโตของ Fibroblast พื้นฐาน (bFGF, Invitrogen) HDFa เซลล์ (ATCC) และหนังหุ้มปลายมนุษย์ fibroblasts (HFF) (ATCC) มีอ่างใน DMEM ที่ประกอบด้วย 10% ครรภ์วัวซีรั่ม (FBS, Gibco), และ NEAA Hec59 เซลล์ (ประเภทของขวัญของดร. Thomas Kunkel และ Alan Clark) ได้เติบโตขึ้นใน 12 DMEM/F ที่ประกอบด้วย 10% FBS เซลล์ HeLa (ATCC) ได้เติบโตขึ้นใน DMEM ประกอบด้วย 10% FBS

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ESCs มนุษย์ (H1, 2) ที่ได้รับจากมหาวิทยาลัยคอนเนตทิสเต็มเซลล์คอร์ มนุษย์ iPSCs YK26 ถูก reprogrammed จากเซลล์ผิวหนังของมนุษย์ (HDF) โดยใช้พาหะไวรัสตามที่อธิบายไว้ (30) และ Rx13 ถูก reprogrammed จากมนุษย์ BJ หนังหุ้มปลายรบรา (HFF) โดยใช้เพียงครั้งเดียวที่ต้องเสียภาษีต้นกำเนิด polycistronic lentiviral เซลล์เทปคาสเซ็ต (STEMCCA) ปัจจัยการเข้ารหัส Yamanaka ที่ มหาวิทยาลัยคอนเนตทิต้นกำเนิดของเซลล์สิ่งอำนวยความสะดวกที่สำคัญ ทั้ง ESCs และ iPSCs มาเพาะเลี้ยงบน BD Matrigel (BD Biosciences) ด้วยเมาส์ผ่านการฉายรังสีสื่อ ESC fibroblast ปรับอากาศตัวอ่อน (GlobalStem) ที่มี DMEM-F 12, 20% ทดแทนซีรั่มที่น่าพิศวง (Invitrogen) กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น (NEAA Invitrogen) 1 มิลลิ L-glutamine (Invitrogen) 0.1 มิลลิเบต้า mercaptoethanol (Sigma) และ 4 อำเภอ / ml พื้นฐานปัจจัยการเจริญเติบโตลาสท์ (bFGF, Invitrogen) เซลล์ HDFa (ATCC) และมนุษย์หนังหุ้มปลายรบรา (HFF) (ATCC) ถูกนำมาเลี้ยงใน DMEM ที่มี 10% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ (FBS, Gibco) และ NEAA เซลล์ Hec59 (ของที่ระลึกชนิดของ Drs. โทมัสเกิลและอลันคลาร์ก) ได้รับการปลูกใน DMEM / F 12 ที่มี 10% FBS เซลล์ HeLa (ATCC) ได้รับการปลูกใน DMEM ที่มี 10% FBS

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มนุษย์ escs ( H1 , 2 ) ที่ได้รับจากมหาวิทยาลัยคอนเนตทิคัตสเต็มเซลล์หลักมนุษย์ ipscs yk26 ถูก reprogrammed จากเมล็ดข้าวเนื้อมนุษย์ ( HDF ) ใช้เวกเตอร์ retroviral ตามที่อธิบายไว้ ( 30 ) และ rx13 ถูก reprogrammed จาก BJ มนุษย์หนังหุ้มปลาย fibroblasts ( hff ) ใช้เพียงครั้งเดียว excisable polycistronic lentiviral สเต็มเซลล์เทป ( stemcca ) การเข้ารหัสยามานากะ ปัจจัยที่มหาวิทยาลัยคอนเนตทิคัตสเต็มเซลล์หลักสิ่งอำนวยความสะดวกและทั้ง escs ipscs เพาะเลี้ยงบน BD matrigel ( BD BIOSCIENCES ) กับการฉายรังสีเมาส์ตัวอ่อน ESC ส่วนปรับอากาศสื่อ ( globalstem ) ที่มี dmem-f 12 , 20 % มหัศจรรย์เซรั่มเทียม ( Invitrogen ) ที่ไม่ใช่กรดอะมิโน ( neaa Invitrogen ) , 1 มม. Glutamine ( Invitrogen ) mercaptoethanol เบต้า 0.1 มม. ( Sigma ) และ 4 กรัม / มล การพัฒนาปัจจัยพื้นฐานลาสท์ ( bfgf Invitrogen , )hdfa เซลล์ ( ATCC ) และไฟโบรบลาส หนังหุ้มปลายของมนุษย์ ( hff ) ( ATCC ) เพาะเลี้ยงใน dmem ที่มี 10% เซรั่มและทารกในครรภ์ ( FBS gibco ) และ neaa . hec59 เซลล์ ( ประเภทของขวัญของดร. โทมัส คันเกิล และ อลัน คลาร์ก ) ปลูกใน dmem / F 12 ที่มี 10% FBS ล่าเซลล์ ( ATCC ) ปลูกใน dmem ที่มี 10% FBS