Method 4 modified from Novaes et al

Method 4 modified from Novaes et al (2009). Protocol:
1. Add 700 µL extraction buffer (100 mM Tris-HCl, pH 8.0, 20 mM EDTA, pH 8.0, 2% (w/v) CTAB, 1.4 M NaCl, 2 % PVP) to the fine powder before some more grinding, and transfer to a microcentrifuge.
2. Add 1.4 µL (0.2 %) β-mercaptoetanol and 5 µL RNaseA (10 mg/mL) and mix until getting a homogeneous mixture.
3. Add 35 µL of 20 % SDS, mix well and incubate at 65 °C for 15 min with occasional swirling.
4. Add 600 µL chloroform:isoamyl alcohol (24:1) to the tube and inverse gently before centrifuge at 8,800 rpm for 3 min in a microcentrifuge.
5. Transfer the supernatant carefully to new tubes. Add 140 µL 10 % (w/v) CTAB and 280 µL 5 M NaCl, mix well and then incubate at 65 °C for 5 min.
6. Repeat Step CIA.
7. Precipitate the DNA by adding a 0.67 volume of isopropanol, mix well, and centrifuge at 12,000 rpm for 3 min.
8. Pour off the supernatant, and rinse the pellet with 70 % ethanol. Add 150 µL TE, and store the DNA solution at -20 °C.

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

วิธีที่ 4 แก้ไขจาก Novaes et al (2009) โพรโทคอล:1. เพิ่มบัฟเฟอร์สกัด µL 700 (100 mM ทริสเรทติ้ง HCl, pH 8.0, EDTA, pH 8.0, 20 มม. 2% (w/v) CTAB, 1.4 M NaCl, 2% PVP) กับผงก่อนบางเพิ่มเติมบด และโอนไปยังเครื่องไมโคร2. เพิ่ม 1.4 µL (0.2%) 5 µL และβ-mercaptoetanol RNaseA (10 mg/mL) และผสมจนได้ส่วนผสมเป็นเนื้อเดียวกัน3. เพิ่ม 35 µL ของ SDS 20% ส่วนผสม และฟักที่อุณหภูมิ 65 ° C 15 นาทีกับการหมุนเป็นครั้งคราว4. เพิ่มแอลกอฮอล์คลอโรฟอร์ม: isoamyl µL 600 (24:1) ลงในหลอดและผกผันเบา ๆ ก่อนเหวี่ยงที่ 8,800 rpm เป็นเวลา 3 นาทีในการไมโคร5. โอน supernatant ระมัดระวังอย่าให้หลอดใหม่ เพิ่ม 140 µL 10% (w/v) CTAB และ 280 µL 5 M NaCl ผสมให้เข้ากันแล้ว ฟักที่อุณหภูมิ 65 ° C 5 นาที6. ทำซ้ำขั้นตอนที่ CIA7. ตกตะกอนดีเอ็นเอ โดยการเพิ่มปริมาณ 0.67 ของ isopropanol ส่วนผสม และเครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 rpm เป็นเวลา 3 นาที8. เทปิด supernatant และล้างเม็ด ด้วย 70% เอทานอล เพิ่ม 150 µL TE และเก็บโซลูชันดีเอ็นเอที่-20 องศาเซลเซียส

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

วิธีที่ 4 การแก้ไขจาก Novaes, et al (2009) โปรโตคอล:
1 เพิ่มบัฟเฟอร์สกัด 700 ไมโครลิตร (100 มิลลิเมตร Tris-HCl ค่า pH 8.0 20 มิลลิเมตร EDTA, พีเอช 8.0, 2% (w / v) CTAB 1.4 M NaCl, 2% PVP) เพื่อผงละเอียดก่อนบางบดมากขึ้นและการถ่ายโอน เพื่อไมโครได้.
2 เพิ่ม 1.4 ไมโครลิตร (0.2%) β-mercaptoetanol และ 5 ไมโครลิตร RNaseA (10 mg / ml) และผสมจนได้รับการผสมเป็นเนื้อเดียวกัน.
3 เพิ่ม 35 ไมโครลิตร 20% SDS ผสมให้เข้ากันและบ่มเพาะที่ 65 องศาเซลเซียสนาน 15 นาทีกับการหมุนเป็นครั้งคราว.
4 เพิ่ม 600 ไมโครลิตรคลอโรฟอร์ม: เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isoamyl (24: 1) หลอดและผกผันเบา ๆ ก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงที่ 8,800 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 3 นาทีในไมโครได้.
5 โอนใสอย่างรอบคอบเพื่อหลอดใหม่ เพิ่ม 140 ไมโครลิตร 10% (w / v) CTAB และ 280 ไมโครลิตร 5 M NaCl ผสมให้เข้ากันแล้วฟักที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที.
6 ทำซ้ำขั้นตอนของซีไอเอ.
7 ตกตะกอนดีเอ็นเอโดยการเพิ่มปริมาณ 0.67 ของ isopropanol ผสมให้เข้ากันและหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 3 นาที.
8 เทสารละลายออกและล้างอัดเม็ดที่มีเอทานอล 70% เพิ่ม 150 ไมโครลิตร TE และเก็บดีเอ็นเอวิธีการแก้ปัญหาที่ -20 ° C

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

วิธีที่ 4 ที่ดัดแปลงจาก novaes et al ( 2009 ) โปรโตคอล :1 . เพิ่ม 700 µผมใช้สาร ( 100 มม. หรือ HCl , pH 8.0 , 20 mM EDTA pH 8.0 , 2% ( w / v ) ctab 1.4 M NaCl , 2% PVP ) ผงละเอียดก่อนหน่อยคัฟ และโอนไปยังไมโครเซนตริฟิวจ์ .2 . เพิ่ม 1.4 µ L ( 0.2% ) และบีตา - mercaptoetanol 5 rnasea ผมµ ( 10 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร และผสมจนกว่าการผสมเป็นเนื้อเดียวกัน3 . เพิ่ม 35 µ L 20 % SDS , ผสมกันและบ่มเพาะที่อุณหภูมิ 65 องศา C เป็นเวลา 15 นาที ตามโอกาสตก4 . เพิ่ม 600 µชั้นคลอโรฟอร์ม : แอลกอฮอล์ในปริมาณ ( 24 : 1 ) หลอดและผกผันเบาๆก่อนที่เครื่อง 8800 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 3 นาทีในไมโครเซนตริฟิวจ์ .5 . โอนสูงอย่างระมัดระวัง กับหลอดใหม่ เพิ่ม 140 µ L 10 % ( w / v ) ctab 280 µ L 5 M NaCl คลุกเคล้าให้เข้ากัน แล้วพักที่อุณหภูมิ 65 องศา C เป็นเวลา 5 นาที6 . ทำซ้ำขั้นตอนที่ซีไอเอ7 . การเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอโดย 0.67 ของไอโซโพรพานอล ผสมให้เข้ากัน และเครื่อง 12 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 3 นาที8 . เทออกจากน่าน และบ้วนอาหารเม็ดที่มีเอทานอล 70% เพิ่ม 150 µ l te และเก็บสารละลายดีเอ็นเอที่ - 20 องศา

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.