2.2. Measurement of fresh and dry w

2.2. Measurement of fresh and dry weight, relative water content,
and electrolyte leakage ratio
The fresh weight (FW) was measured following the separation
of leaves, stems, and roots. For dry weight (DW) determination,
leaves, stems, and roots were dried at 70 C for three days prior to
being weighed. To determine the relativewater content (RWC), four
plants from each treatment were randomly selected and the
method described by Weatherly (1950) was implemented. Briefly,
leaf samples were weighed to determine the FW. The leaf samples
were then soaked in fresh deionized water for 24 h under light, and
were placed on tissue paper to remove excess water. The samples
were then weighed to determine the fully turgid weight (TW).
Samples were next oven-dried at 70 C for three days, and the DW
was obtained. The RWC was determined using the following formula:
RWC ¼ (FW  DW)/(TW  DW)  100.
To determine the electrolyte leakage ratio (ELR), the third leaf
from the top of each plant was dissected and soaked in a bottle
containing 30 mL of deionized water, and the bottles were gently
shaken overnight. Conductivity of the solution was measured with
an EC meter (EC1). The bottles were then autoclaved and cooled,
and the conductivity of the solutionwas again measured (EC2). The
ELR was calculated as the ratio of the conductivity before autoclaving
to the conductivity after autoclaving using the following
formula: ELR ¼ (EC1/EC2)  100.
2.3. Determination of Naþ and Kþ content
The Naþ and Kþ content in leaves, sheaths, and roots was
measured using a flame photometer (ANA-135; Tokyo Photoelectric,
Tokyo, Japan) according to the method of Kushizaki (1968).
Dried samples were gently agitated in 1 N HCl overnight, and the
content of Naþ and Kþ ions was estimated from the Naþ and Kþ
standard curves.
2.4. Expression analysis of genes encoding Naþ/Kþ transport
proteins
Total RNA was extracted from the leaves, sheaths, and roots of
the control and stressed plants using TRIzol reagent (Invitrogen,
Carlsbad, CA). After digestion with DNaseI, total RNA (1 mg) was
reverse-transcribed to cDNA using a ReverTra Ace qPCR RT kit
(Toyobo, Osaka, Japan). Quantitative polymerase chain reaction
(qPCR) was conducted as previously described (Ueda et al., 2013),
using a Thunderbird SYBR qPCR Mix (Toyobo) and an ABI Step One
Plus system (Applied Biosystems). Quantitative RT-PCR was performed
using the following profile: an initial incubation at 95 C for
1 min, followed by 40 cycles of denaturation at 95 C for 15 s and
extension at 60 C for 60 s. Relative expression level of the gene
transcripts was calculated with the comparative 2DDCT method
(Livak and Schmittgen, 2001) using the OsUBQ-5 gene as an internal

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การวัดน้ำหนักสด และแห้ง น้ำสัมพันธ์เนื้อหาและอัตราการรั่วไหลของอิเล็กโทรน้ำหนักสด (FW) ถูกวัดตามแยกของใบ ลำต้น ราก สำหรับการวัดน้ำหนักแห้ง (DW)ใบ ลำต้น และรากตากแห้งที่ 70 C สามวันก่อนการชั่งน้ำหนัก เพื่อกำหนดเนื้อหา relativewater (RWC), 4พืชจากการรักษาแต่ละถูกสุ่มเลือกและวิธีที่อธิบายไว้ โดย Weatherly (1950) ได้ดำเนินการ สั้น ๆตัวอย่างใบถูกชั่งน้ำหนักเพื่อกำหนด FW ตัวอย่างใบได้แล้วนำไปแช่ในน้ำ deionized ใน 24 ชมภายใต้แสง และถูกวางไว้บนกระดาษทิชชู่เพื่อเอาน้ำส่วนเกิน ตัวอย่างแล้วก็ชั่งน้ำหนักเพื่อตรวจสอบน้ำหนักเต็ม turgid (ผู้ที่ใช้)ตัวอย่างมีต่อเตาแห้งที่ C 70 สามวัน และ DWได้รับ RWC ที่กำหนดโดยใช้สูตรต่อไปนี้:RWC ¼ (FW DW) /(TW DW) 100การกำหนดอิเล็กโทรรั่วอัตราส่วน (elr), ใบที่สามจากด้านบนของแต่ละพืช dissected และนำไปแช่ในขวดประกอบด้วย 30 mL น้ำ deionized และขวดถูกเบา ๆยนต์ค้างคืน นำโซลูชันถูกวัดด้วยเมตรมี EC (EC1) ขวดได้แล้ว autoclaved และ เย็น ๆและนำของ solutionwas ที่วัด (EC2) อีกครั้ง ที่Elr ที่คำนวณเป็นอัตราส่วนของนำก่อน autoclavingเพื่อนำหลัง autoclaving ใช้ต่อไปนี้สูตร: elr ¼ (EC1/EC2) 1002.3 การกำหนดเนื้อหาของ Naþ และ Kþเนื้อหา Naþ และ Kþ ในใบไม้ sheaths และรากวัดโดยใช้แบบเปลวไฟเครื่องวัดความสว่าง (ANA-135 Photoelectric โตเกียวโตเกียว ญี่ปุ่น) ตามวิธีของ Kushizaki (1968)ตัวอย่างแห้งถูกเบา ๆ นั้นกระตุ้นทำใน 1 N HCl ค้างคืน และเนื้อหาของ Naþ และ Kþ กันได้ประมาณ Naþ และ Kþเส้นโค้งมาตรฐาน2.4 การการวิเคราะห์นิพจน์ของการเข้ารหัสขนส่ง Naþ/Kþโปรตีนอาร์เอ็นเอทั้งหมดที่สกัดจากใบ sheaths และรากของควบคุมและพืชที่ใช้ TRIzol รีเอเจนต์ (Invitrogen เครียดคาร์ลส CA) หลังจากย่อยอาหารด้วย DNaseI อาร์เอ็นเอทั้งหมด (1 มิลลิกรัม) มีทับศัพท์กลับกับ cDNA ที่ใช้ชุด ReverTra Ace qPCR RT(Toyobo โอซาก้า ญี่ปุ่น) ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสเชิงปริมาณ(qPCR) ได้ดำเนินการเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (ดะ et al., 2013),ใช้ qPCR SYBR ธันเดอร์เบิร์ดผสม (Toyobo) และการลักชัวรี่ขั้นตอนหนึ่งพร้อมระบบ (Biosystems ใช้) มีดำเนินการเชิงปริมาณ RT-PCRใช้ส่วนกำหนดค่าต่อไปนี้: คณะทันตแพทยศาสตร์เริ่มต้นที่ 95 C สำหรับ1 นาที ตาม ด้วยวงจร 40 การ denaturation ที่ 95 C 15 s และ60 C สำหรับ 60 นิพจน์ s ได้สัมพันธ์กับระดับของยีนใบแสดงผลคำนวณ ด้วยวิธี DDCT 2 เปรียบเทียบ(Livak และ Schmittgen, 2001) การใช้ยีน OsUBQ-5 ที่เป็นภายใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การวัดน้ำหนักสดและแห้งปริมาณน้ำญาติและอัตราการรั่วไหลของอิเล็กโทรไลน้ำหนักสด(FW) วัดดังต่อไปนี้การแยกของใบลำต้นและราก สำหรับน้ำหนักแห้ง (DW) มุ่งมั่นใบลำต้นและรากแห้งที่70 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสามวันก่อนที่จะมีการชั่งน้ำหนัก การตรวจสอบเนื้อหา relativewater นี้ (RWC) สี่พืชจากการรักษาแต่ละสุ่มเลือกและวิธีการอธิบายโดยลม(1950) ถูกนำมาใช้ สั้น ๆ , ตัวอย่างใบชั่งน้ำหนักเพื่อตรวจสอบการส่งต่อ กลุ่มตัวอย่างใบแช่แล้วในน้ำปราศจากไอออนสดเวลา 24 ชั่วโมงภายใต้แสงไฟและถูกวางไว้บนกระดาษทิชชูเพื่อเอาน้ำส่วนเกิน กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการชั่งน้ำหนักแล้วการกำหนดน้ำหนักขี้โอ่อย่างเต็มที่ (TW). กลุ่มตัวอย่างเป็นต่อไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสามวันและใบสำคัญแสดงสิทธิอนุพันธ์ที่ได้รับ RWC ถูกกำหนดโดยใช้สูตรต่อไปนี้: RWC ¼ (FW DW) / (ทีดับบลิว DW?)? 100 การตรวจสอบการรั่วไหลของอัตราส่วนอิ (ELR) ใบที่สามจากด้านบนของแต่ละโรงงานที่ถูกชำแหละและแช่ในขวดมี30 มิลลิลิตรน้ำปราศจากไอออนและขวดถูกเบา ๆเขย่าในชั่วข้ามคืน การนำไฟฟ้าของการแก้ปัญหาที่ถูกวัดด้วยเครื่องวัด EC (EC1) ขวดถูกแล้วเบาและระบายความร้อน, และการนำของ solutionwas อีกครั้งวัด (EC2) ELR ที่คำนวณเป็นอัตราส่วนของการนำนึ่งฆ่าเชื้อก่อนการนำหลังจากนึ่งฆ่าเชื้อที่ใช้ต่อไปนี้สูตร: ELR ¼ (EC1 / EC2)? 100 2.3 การกำหนดภูมิพลอดุลยเดชและเนื้อหา KTH ภูมิพลอดุลยเดชและเนื้อหา KTH ในใบฝักและรากถูกวัดโดยใช้มาตรวัดไฟ(ANA-135; โตเกียวอิเล็กทริค, กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น). ตามวิธีการของ Kushizaki นี้ (1968) ตัวอย่างแห้งเป็นเบา ตื่นเต้นใน 1 N HCl ค้างคืนและเนื้อหาของภูมิพลอดุลยเดชและไอออนKTH เป็นที่คาดจากภูมิพลอดุลยเดชและ KTH โค้งมาตรฐาน. 2.4 การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนที่ควบคุมการภูมิพลอดุลยเดช / KTH ขนส่งโปรตีนรวมRNA ถูกสกัดจากใบฝักและรากของการควบคุมและเน้นพืชโดยใช้สารTrizol (Invitrogen, Carlsbad, CA) หลังจากที่มีการย่อยอาหาร DNaseI, RNA รวม (1 มิลลิกรัม) ได้ย้อนกลับไปถ่ายยีนโดยใช้ReverTra Ace qPCR RT ชุด(Toyobo โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเชิงปริมาณ(qPCR) ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (อุเอดะ et al., 2013) โดยใช้ Thunderbird SYBR qPCR ผสม (Toyobo) และขั้นตอนที่หนึ่ง ABI ระบบพลัส (Applied Biosystems) ปริมาณ RT-PCR ได้ดำเนินการโดยใช้รายละเอียดดังต่อไปนี้: บ่มเริ่มต้นที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา1 นาทีตามด้วย 40 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วินาทีและ? การขยายที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 s? ระดับการแสดงออกของความสัมพันธ์ของยีนจิตบำบัดที่คำนวณเปรียบเทียบกับ 2 วิธี DDCT (Livak และ Schmittgen, 2001) โดยใช้ยีน OsUBQ-5 ภายใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การวัดน้ำหนักสดและน้ำหนักแห้ง น้ำเทียบเนื้อหา และอัตราส่วนของอิเล็กโทรไลต์

น้ำหนักสด ( FW ) วัดต่อไปนี้แยก
ของใบ ลำต้น และราก น้ำหนักแห้ง ( แห้ง ) มุ่งมั่น
ใบ ลำต้น และรากแห้งที่อุณหภูมิ 70  C เป็นเวลา 3 วันก่อน
ถูกชั่งน้ำหนัก หา relativewater เนื้อหา ( ทั้ง 4
)พืชจากการรักษาแต่ละวิธีสุ่มเลือก
อธิบายโดยการต้านลม ( 1950 ) ถูกนำมาใช้ สั้น ๆ ,
ตัวอย่างใบชั่งน้ำหนักเพื่อหา FW ตัวอย่างใบ
แล้วแช่สดคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ 24 ชั่วโมงภายใต้แสงและ
ถูกวางไว้บนกระดาษเพื่อเอาน้ำส่วนเกิน ตัวอย่าง
แล้วชั่งเพื่อตรวจสอบน้ำหนักอย่างบวม ( TW ) .
จำนวนครั้ง  เตาอบอุณหภูมิ 70 C เป็นเวลา 3 วัน และ DW
ได้ . ที่สามารถถูกกำหนดโดยใช้สูตรต่อไปนี้ :
สามารถ¼ ( FW  DW ) / ( TW  DW )  100
เพื่อตรวจสอบการรั่วไหลของอิเล็กโทรไลต์ต่อ ( elr ) , สามใบ
จากด้านบนของแต่ละโรงงานชำแหละและแช่ในขวด
ที่มี 30 มล. คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำและ ขวดถูกเขย่าเบาๆ
ค้างคืนค่าการนำไฟฟ้าของสารละลาย EC Meter ( เป็นวัดด้วย
ec1 ) the bottles สำหรับ then autoclaved ( cooled , (
และป้อมยามของ the solutionwas พรุน ( ชนิดใช้ ec2 ) .
elr ถูกคำนวณเป็นอัตราส่วนของความนำก่อนอัตราส่วนโฟกัส
กับการนำหลังจากอัตราส่วนโฟกัสโดยใช้สูตรต่อไปนี้
: elr ¼ ( ec1 / EC2 )  100
2.3 การกำหนดþและ K )
þ naนาþและ K þเนื้อหาในใบ เปลือกและราก คือการวัดโดยใช้ Flame Photometer (

ana-135 ตาแมว ; โตเกียว , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) ตามวิธีการของ kushizaki ( 2511 ) .
แห้งจำนวนค่อยๆปั่นป่วนใน 1 N HCl ในชั่วข้ามคืน และเนื้อหาของนา
þและ K þไอออนคือการประมาณการจาก na þและ K þ
มาตรฐานเส้นโค้ง
2.4 . การศึกษาการแสดงออกของยีนเข้ารหัส na þ / k

þการขนส่งโปรตีนอาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากต้น ใบ ดอก เปลือก และราก ของพืชที่ใช้ควบคุมและเครียด
trizol Reagent ( Invitrogen
, Carlsbad , CA ) หลังจากตัดด้วย dnasei อาร์เอ็นเอทั้งหมด ( 1 มิลลิกรัม ) คือ
ย้อนกลับและวิธีการใช้ revertra เอซ qpcr RT ชุด
( toyobo , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ปริมาณการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
( qpcr ) ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( อุเอดะ et al . , 2013 ) ,
ใช้ Thunderbird SYBR qpcr ผสม ( toyobo ) และ ABI ก้าว
รวมทั้งระบบ ( Applied Biosystems ) การใช้วิธีเชิงปริมาณ
โปรไฟล์ต่อไปนี้ : เริ่มต้นบ่มที่ 95  C
1 นาที ตามด้วย 40 รอบ ( 95  C 15 s
นามสกุลที่ 60  C นาน 60 วินาที สัมพันธ์ของยีนของยีน
ใบคำนวณด้วยวิธี ddct
2  เปรียบเทียบ( livak และ schmittgen , 2001 ) การใช้ยีน osubq-5 เป็นภายใน