Zymomonas mobilis genes for pyruvat

Zymomonas mobilis genes for pyruvate decarboxylase (pdc) and alcohol dehydrogenase II (adhB) were integrated into the Escherichia coli chromosome within or near the pyruvate formate-lyase gene (pfl). Integration improved the stability of the Z. mobilis genes in E. coli, but further selection was required to increase expression. Spontaneous mutants were selected for resistance to high level of chloramphenicol that also expressed high levels of the Z. mobilis genes. Analogous mutants were selected for increased expression of alcohol dehydrogenase on aldehyde indicator plates. These mutants were functionally equivalent to the previous plasmid-based strains for the fermentation of xylose and glucose to ethanol. Ethanol concentrations of 54.4 and 41.6 g/liter were obtained from 10% glucose and 8% xylose, respectively. The efficiency of conversion exceeded theoretical limits (0.51 g of ethanol/g of sugar) on the basis of added sugars because of the additional production of ethanol from the catabolism of complex nutrients. Further mutations were introduced to inactivate succinate production (frd) and to block homologous recombination (recA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Zymomonas mobilis ยีน pyruvate decarboxylase (pdc) และแอลกอฮอล์ dehydrogenase II (adhB) ถูกรวมเข้าในโครโมโซมภายใน หรือ ใกล้ยีน lyase รูปแบบเอกสารของ pyruvate (pfl) coli Escherichia รวมการปรับปรุงเสถียรภาพของยีน z. mobilis ใน E. coli แต่เพิ่มเติม ตัวเลือกจำเป็นต่อการเพิ่มนิพจน์ สายพันธุ์อยู่ได้เลือกสำหรับต้านทานระดับสูงของ chloramphenicol ที่ยัง แสดงระดับสูงของยีน mobilis z สายพันธุ์คู่ถูกเลือกสำหรับการเพิ่มค่าของแอลกอฮอล์ dehydrogenase ในแผ่นตัวบ่งชี้ของแอลดีไฮด์ สายพันธุ์เหล่านี้ก็มีฟังก์ชันเทียบเท่ากับสายพันธุ์ใช้ plasmid ก่อนหน้าสำหรับหมัก xylose และกลูโคสเพื่อเอทานอล ความเข้มข้นของเอทานอล 54.4 และ 41.6 g/ลิตร ได้รับกลูโคส 10% และ 8% xylose ตามลำดับ ประสิทธิภาพของการแปลงเกินขีดจำกัดของทฤษฎี (0.51 กรัมของเอทานอ ล/g น้ำตาล) โดยเพิ่มน้ำตาลเนื่องจากการผลิตเอทานอลจากแคแทบอลิซึมของสารอาหารซับซ้อนเพิ่มเติม กลายพันธุ์ต่อไปได้แนะนำ ให้ยกผลิต succinate (frd) และบล็อก homologous recombination (recA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Zymomonas mobilis ยีนสำหรับไพรู decarboxylase (PDC) และ dehydrogenase แอลกอฮอล์ครั้งที่สอง (adhB) ถูกรวมอยู่ใน Escherichia coli โครโมโซมภายในหรือใกล้ยีนไพรูรูปแบบ-ไอเลส (PFL) บูรณาการการปรับปรุงเสถียรภาพของยีน Z. mobilis ในเชื้อ E. coli แต่เลือกต่อไปจะต้องเพิ่มการแสดงออก การกลายพันธุ์ที่เกิดขึ้นเองถูกเลือกสำหรับความต้านทานต่อการระดับสูงของ chloramphenicol ที่ยังแสดงระดับสูงของยีน Z. mobilis การกลายพันธุ์คล้ายได้รับการคัดเลือกในการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ dehydrogenase บนจานตัวบ่งชี้ลดีไฮด์ การกลายพันธุ์เหล่านี้เป็นหน้าที่เทียบเท่าสายพันธุ์พลาสมิดที่ใช้ก่อนหน้านี้สำหรับการหมักไซโลสและกลูโ​​คสเอทานอล ความเข้มข้นของเอทานอลจาก 54.4 และ 41.6 กรัม / ลิตรที่ได้รับจากกลูโคส 10% และ 8% ไซโลสตามลำดับ ประสิทธิภาพของการแปลงเกินขีด จำกัด ทางทฤษฎี (0.51 กรัมของเอทานอล / กรัมน้ำตาล) บนพื้นฐานของน้ำตาลเพิ่มเนื่องจากการผลิตที่เพิ่มขึ้นของเอทานอลจาก catabolism ของสารอาหารที่ซับซ้อน การกลายพันธุ์ต่อไปถูกนำไปยับยั้งการผลิต succinate (frd) และเพื่อป้องกันการรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกัน (recA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Zymomonas mobilis ยีนไพรูดีคาร์บอกซิเลส ( PDC ) และแอลกอฮอล์ดีไฮโดรจีเนส II ( adhb ) ถูกรวมเข้าไปใน Escherichia coli โครโมโซมภายในหรือใกล้กับไพรู รูปแบบ lyase ยีน ( pfl ) บูรณาการการปรับปรุงเสถียรภาพของ Z . mobilis ยีนในเชื้อ E . coli , แต่เลือกต่อไปคือต้องเพิ่มการแสดงออกธรรมชาติสายพันธุ์ที่ต้านทานระดับการส่งออกที่ยังแสดงระดับสูงของ Z . mobilis ยีน กลายพันธุ์แบบสุ่มเพิ่มการแสดงออกของเอนไซม์แอลกอฮอล์อัลดีไฮด์ ตัวแผ่น สายพันธุ์เหล่านี้เป็นหน้าที่เทียบเท่ากับก่อนหน้านี้ตามสายพันธุ์ สำหรับสายพันธุ์ของกลูโคสและไซโลส การหมักเอทานอลเอทานอลความเข้มข้นสำคัญ 30 กรัม / ลิตรและได้จากกลูโคสและไซโล 10 % 8 % ตามลำดับ ประสิทธิภาพของการแปลงเกินขีดจำกัดทางทฤษฎี ( 0.51 กรัมเอทานอล / กรัมของน้ำตาล ) บนพื้นฐานของน้ำตาลเพิ่ม เพราะการเพิ่มการผลิตเอทานอลจากกระบวนการสลายสารอาหารเชิงซ้อนการกลายพันธุ์ต่อไปจะถูกนำยับยั้งการผลิต Succinate ( frd ) และเพื่อป้องกันการรวมตัว ( โฮโมโลกัสรีก้า )