For qualitative RT-PCR reactions, total RNA from different regions of the brain
(telencephalon/preoptic region, optic tectum-thalamus (including midbrain tegmentum),
hypothalamus, posterior brain including cerebellum and medulla) samples were
reverse transcribed, submitted to a PCR using specific primers (Table 1) and ran on a
1.5% agarose gel. Elongation factor 1α (EF1α) was used as an internal control. The goal
of this qualitative assay was to determine in which brain areas GnRH and orexin were
present. Based on our qualitative assays and on previous literature on fish GnRH (Lin
and Peter, 1997; Yu et al., 1998) and orexin (Miura et al., 2007; Suzuki et al., 2007),
orexin mRNA expression was examined in the forebrain (telencephalon/preoptic area)
and hypothalamus and cGnRH-II expression was examined in the forebrain (telencephalon/
preoptic area) and midbrain (hypothalamus and optic tectum-thalamus).
เพื่อคุณภาพปฏิกิริยา RT-PCR, RNA รวมจากภูมิภาคต่างๆของสมอง
(telencephalon / ภูมิภาค preoptic, แก้วนำแสง tectum-ฐานดอก (รวม tegmentum สมองส่วนกลาง)
มลรัฐสมองหลังรวมทั้งสมองและไขกระดูก) ตัวอย่างได้
ย้อนกลับคัดลอกคำสั่งส่งไปยัง PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง (ตารางที่ 1) และวิ่งบน
1.5% เจล agaroseยืดปัจจัย1α (ef1α) ถูกใช้เป็นระบบการควบคุมภายใน เป้าหมายของ
ทดสอบคุณภาพนี้คือการตรวจสอบในพื้นที่ที่สมอง gnrh และ orexin มี
ปัจจุบัน ขึ้นอยู่กับการตรวจคุณภาพของเราและในวรรณคดีก่อนปลา gnrh (lin
และปีเตอร์, 1997. yu, et al, 1998) และ orexin (miura et al, 2007;.. suzuki, et al, 2007),
การแสดงออก orexin mrna ถูกตรวจสอบใน forebrain (telencephalon / พื้นที่ preoptic)
และการแสดงออกมลรัฐและ cgnrh-ii ถูกตรวจสอบใน forebrain (telencephalon /
พื้นที่ preoptic) และสมองส่วนกลาง (hypothalamus และแก้วนำแสง tectum-ฐานดอก)
การแปล กรุณารอสักครู่..
สำหรับ คุณภาพ Rt - pcr ปฏิกิริยารวม rna จากเขตพื้นที่ของสมอง
( telencephalon / preoptic ภูมิภาค ,ออปติก tectum - thalamus (รวมถึง midbrain tegmentum ),
hypothalamus ,ก้นสมองรวมถึง cerebellum และ medulla )ตัวอย่างมี
ย้อนกลับถอดสคริปต์,ส่งไปที่ pcr การใช้ primers (ตารางที่ 1 )และวิ่งไปบน
1.5% agarose เจล.ปัจจัย elongation 1 กล้อง( EF 1 กล้อง)ได้เคยถูกใช้เป็นการควบคุม ภายใน เป้าหมายที่จะสอบในเชิง คุณภาพ ของ
ซึ่งจะช่วยเป็นการกำหนดในสมองที่ orexin และ gnrh
ซึ่งจะช่วยเป็นปัจจุบัน ที่ใช้ assays เชิง คุณภาพ ของเราและในเอกสารก่อนหน้าในปลา gnrh ( LIN
และปีเตอร์ 1997 , Yu Garden , et al . 1998 )และ orexin ( miura et al . 2007 Suzuki et al . 2007 )
การแสดงออกทางความคิดเห็น mrna orexin ก็ตรวจสอบใน forebrain (บริเวณ telencephalon / preoptic )
และการแสดงออกและ hypothalamus cgnrh - II ได้ถูกตรวจสอบใน forebrain (บริเวณ telencephalon /
preoptic )และ midbrain (ออปติกและ hypothalamus tectum - thalamus )
การแปล กรุณารอสักครู่..