using a dual luciferase-based syste

using a dual luciferase-based system. The dual luciferase reporter
plasmid harbored the MaACS1- and MaACO1- promoter fused to
LUC, and the REN driven by the CaMV35S promoter (CaMV35S-
REN/MaACS1/MaACO1 pro-LUC), while an effector plasmid carried
MaC2H2-1/2 expressed under the control of the CaMV 35S
promoter (Fig. 6a). As exhibited in Fig. 6b, compared with empty
control, the LUC/REN ratio was significantly reduced when either
the MaACS1 pro-LUC or the MaACO1 pro-LUC reporter construct
was cotransfected with the effector of CaMV35S-MaC2H2-1 or
CaMV35S-MaC2H2-2. It has been reported that many TFs regulate
ethylene biosynthetic genes (ACS and ACO) via binding to their
promoters during fruit ripening. For example, LeHB-1, an HD-Zip
homeobox protein, can bind to the homeo box cis-elements of the
tomato LeACO1 promoter and modulate the gene's expression
during fruit ripening (Lin et al., 2008). RIN regulates the expression
of two ethylene biosynthetic genes (ACS2 and ACS4) by binding to
CArG box elements in their promoters (Ito et al., 2008; Fujisawa
et al., 2011). In addition, overexpression of ERF022 led to the
inhibition of two ACC synthases (ACS7 and ACS8), suggesting that
ERF022 negatively regulates ethylene biosynthesis (Nowak et al.,
2015). Our previous study showed that banana ERFs differently
regulated the ethylene biosynthesis, in which MaERF9 activated
MaACO1 promoter activity, while the potential repressor
MaERF11 suppressed MaACS1 and MaACO1 activities (Xiao et al.,
2013). The reciprocal control of expression levels of ethylene
biosynthesis between activators and repressors indicates a
complex network involving different mechanisms of transcrip-
tional hierarchy and regulatory loop. In the present work, it was
showed that ethylene activates MaC2H2-1/2 and the latter in turn
repress ethylene biosynthetic genes MaACS1 and MaACO1 by
directly binding to their promoters (Figs. 5 and 6). Similarly,
SlZFP2 was expressed mainly in developing tomato fruit and was
induced by abscisic acid (ABA), but repressed ABA biosynthesis
during fruit development through direct suppression of the ABA
biosynthetic genes, suggesting its role as a repressor fine-tuning

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้ระบบตาม luciferase คู่ ข่าว luciferase คู่plasmid harbored MaACS1 - และ MaACO1-โปรโมเตอร์กับรักษาระบบ และ REN ที่ขับเคลื่อน โดยโปรโมเตอร์ CaMV35S (CaMV35S-REN/MaACS1/MaACO1 โปร-LUC), ใน ขณะที่ดำเนินการมี plasmid effectorMaC2H2-1/2 แสดงภายใต้การควบคุมของ CaMV 35Sโปรโมเตอร์ (รูปที่ 6a) จัดแสดงในรูป 6b เมื่อเทียบกับว่างเปล่าควบคุม LUC/REN อัตราส่วนอย่างมีนัยสำคัญลดลงเมื่อใดโปร MaACS1-รักษาระบบหรือโครงสร้างของข่าวโป LUC MaACO1ถูก cotransfected กับ effector CaMV35S-MaC2H2-1 หรือCaMV35S-MaC2H2-2 มีรายงานว่า หลาย TFs ควบคุมเอทิลี biosynthetic ยีน (ACS และพูดคุยใน) ด้วยการรวมก่อนหน้าพวกเขาก่อระหว่างผลไม้สุก ตัวอย่างเช่น LeHB-1, HD-Zip การสามารถผูก homeobox โปรตีน homeo กล่อง cis-องค์ประกอบของการมะเขือเทศ LeACO1 โปรโมเตอร์ และยีนการปรับระหว่างผลไม้สุก (Lin et al. 2008) รินทำนิพจน์ของสองเอ biosynthetic ยีน (ACS2 และ ACS4) โดยรวมถึงองค์ประกอบของกล่อง CArG ในการก่อ (Ito และ al. 2008 ฟูจิซาวะet al. 2011) นอกจากนี้ overexpression ของ ERF022 ที่นำไปสู่การยับยั้งการสอง ACC synthases (ACS7 และ ACS8), บอกว่าERF022 ผลควบคุมการสังเคราะห์เอทิลีน (โนวัก et al.,2015) การศึกษาของเราก่อนหน้านี้พบว่ากล้วย ERFs แตกต่างกันควบคุมการสังเคราะห์เอทิลีน ใน MaERF9 ซึ่งเปิดใช้งานกิจกรรมผู้ที่ MaACO1 ขณะ repressor ศักยภาพMaERF11 ระงับกิจกรรม MaACS1 และ MaACO1 (เซียว et al.,2013) การควบคุมซึ่งกันและกันของนิพจน์ระดับเอทิลีนบ่งชี้ว่า การสังเคราะห์ระหว่างกระตุ้นและ repressors การเครือข่ายที่ซับซ้อนเกี่ยวข้องกับกลไกต่าง ๆ ของ transcrip-หากคุณลำดับชั้นและห่วงด้านกฎระเบียบ ในการทำงานปัจจุบันแสดงให้เห็นว่า เอทิลีนที่เปิดใช้งาน MaC2H2-1/2 และหลังเปิดรำงับเอ biosynthetic ยีน MaACS1 และ MaACO1 โดยความผูกพันโดยตรงการก่อตัว (มะเดื่อ. 5 และ 6) ในทำนองเดียวกันSlZFP2 ถูกแสดงในผลมะเขือเทศที่กำลังพัฒนา และเป็นเกิดจากกรดแอบไซซิก (ABA), แต่อัดอั้นสังเคราะห์ ABAในระหว่างการพัฒนาผลไม้ผ่านปราบปรามโดยตรงของ ABAยีน biosynthetic แนะนำฐานะ repressor การปรับจูน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โดยใช้ระบบ luciferase ตามคู่ คู่ luciferase นักข่าว
พลาสมิดเก็บงำ MaACS1- และ MaACO1- ก่อการหลอมละลายเพื่อ
LUC และ REN ขับเคลื่อนด้วย CaMV35S ก่อการ (CaMV35S-
REN / MaACS1 / MaACO1 Pro-Luc) ขณะที่พลาสมิด effector ดำเนิน
MaC2H2-1 / 2 แสดงออกภายใต้การ การควบคุมของ CaMV 35S
ก่อการ (รูป. 6A) ขณะที่การจัดแสดงในรูป 6B เมื่อเทียบกับที่ว่างเปล่า
ควบคุมอัตราส่วน / REN LUC ก็ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อทั้ง
MaACS1 Pro-Luc หรือ MaACO1 Pro-Luc นักข่าวสร้าง
ถูก cotransfected กับ effector ของ CaMV35S-MaC2H2-1 หรือ
CaMV35S-MaC2H2-2 มันได้รับรายงานว่าหลาย TFS ควบคุม
ยีนสังเคราะห์เอทิลีน (ACS และ ACO) ผ่านผูกพันกับพวกเขา
ก่อการในช่วงผลไม้สุก ยกตัวอย่างเช่น LeHB-1 เป็น HD-Zip
โปรตีน homeobox สามารถผูกกับกล่อง homeo CIS-องค์ประกอบของ
โปรโมเตอร์มะเขือเทศ LeACO1 และปรับเปลี่ยนการแสดงออกของยีนใน
ช่วงผลไม้สุก (Lin et al., 2008) RIN ควบคุมการแสดงออก
ของยีนที่สองเอทิลีนสังเคราะห์ (ACS2 และ ACS4) โดยจับกับ
CARG องค์ประกอบในกล่องโปรโมเตอร์ของพวกเขา (อิโตะ et al, 2008;. Fujisawa
. et al, 2011) นอกจากนี้การแสดงออกของ ERF022 นำไปสู่การ
ยับยั้งการทำงานของทั้งสองแม็กซินเทส (ACS7 และ ACS8) บอกว่า
ERF022 ในเชิงลบควบคุมการสังเคราะห์เอทิลีน (โนวัก et al.,
2015) การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า ERFs กล้วยที่แตกต่างกัน
ระเบียบการสังเคราะห์เอทิลีนซึ่งในการเปิดใช้งาน MaERF9
กิจกรรมก่อการ MaACO1 ขณะที่อดกลั้นศักยภาพ
MaERF11 ปราบปราม MaACS1 และกิจกรรม MaACO1 (Xiao et al.,
2013) การควบคุมซึ่งกันและกันของระดับการแสดงออกของเอทิลีน
สังเคราะห์ระหว่าง activators และ repressors บ่งชี้ว่ามี
เครือข่ายที่ซับซ้อนที่เกี่ยวข้องกับกลไกที่แตกต่างกันของ transcrip-
ลำดับชั้น tional และห่วงกฎระเบียบ ในการทำงานในปัจจุบันมันก็
แสดงให้เห็นว่าเอทิลีนป็ MaC2H2-1 / 2 และหลังในการเปิด
ปราบปรามยีนสังเคราะห์เอทิลีนและ MaACS1 MaACO1 โดย
มีผลผูกพันโดยตรงกับผู้สนับสนุนของพวกเขา (มะเดื่อ. 5 และ 6) ในทำนองเดียวกัน
SlZFP2 ถูกแสดงหลักในการพัฒนาผลไม้มะเขือเทศและถูก
ชักนำโดยกรดแอบไซซิก (ABA) แต่อัดอั้นสังเคราะห์ ABA
ในระหว่างการพัฒนาผลไม้ที่ผ่านการปราบปรามโดยตรงของ ABA
ยีนสังเคราะห์บอกบทบาทของการเป็นอดกลั้นปรับจูน