2.4.3. Determination of guaiacol pe

2.4.3. Determination of guaiacol peroxidase (POD) activity
The assay was performed at 25 °C in a 10-mm path length plastic
cuvette (Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Germany) using UV/
visible spectrophotometer (Ultrospec 3300 pro, Amersham Biosciences,
Sweden) at 485 nm. The reaction mixture consisted of 1500 μl of phosphate
buffer (50 mM NaH2PO4, pH 6.5 containing 1 M NaCl), 200 μl carrot
extract, 200 μl guaiacol (1% w/v in water) and 100 μl H2O2 (1.5% w/v
in water). The increase in absorbance due to formation of oxidised
tetraguaiacol polymer was followed for a total reaction time of 3 min
and recorded with the reaction kinetics program module (SWIFT II program
v. 2.01, Amersham Biosciences, Sweden). The blank was a mixture
of 1700 μl of phosphate buffer (50 mM NaH2PO4, pH 6.5 containing 1 M
NaCl), 200 μl guaiacol (1% w/v) and 100 μl H2O2 (1.5% w/v). One unit
of POD activity was defined as the amount of POD that catalysed the enzymatic
oxidation of 1 μmol of guaiacol by H2O2, forming oxidised
tetraguaiacol polymer per min at 25 °C and pH 6.5.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4.3 การกำหนด peroxidase guaiacol (POD)
กิจกรรมการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการที่25 ° C ในความยาวเส้นทาง 10 มมพลาสติก
cuvette (Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen เยอรมนี) โดยใช้รังสียูวี /
spectrophotometer ที่มองเห็น (Ultrospec 3300 โปร Amersham
ชีววิทยาศาสตร์สวีเดน) ที่ 485 นาโนเมตร ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 1,500
ไมโครลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์(50 มิลลิ NaH2PO4 ค่า pH 6.5 ที่มี 1 M NaCl) 200
ไมโครลิตรแครอทสารสกัดจาก200 ไมโครลิตร guaiacol (1% w / v ในน้ำ) และ 100 ไมโครลิตร H2O2 (1.5% w / v
ในน้ำ) การเพิ่มขึ้นของการดูดกลืนแสงเกิดจากการก่อตัวของเหลี่ยมพอลิเมอ tetraguaiacol ตามมาเป็นเวลาปฏิกิริยารวมของ 3 นาทีและบันทึกด้วยปฏิกิริยาโมดูลโปรแกรมจลนศาสตร์(SWIFT II โปรแกรมv. 2.01, Amersham ชีววิทยาศาสตร์สวีเดน) ว่างเปล่าเป็นส่วนผสม1700 ไมโครลิตรของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มิลลิ NaH2PO4 ค่า pH 6.5 ที่มี 1 M NaCl) 200 ไมโครลิตร guaiacol (1% w / v) และ 100 ไมโครลิตร H2O2 (1.5% w / v) หนึ่งหน่วยของกิจกรรม POD ถูกกำหนดเป็นปริมาณของตัวเร่งปฏิกิริยาที่ POD เอนไซม์ออกซิเดชันของ1 ไมโครโมลของ guaiacol โดย H2O2 รูปเหลี่ยมพอลิเมอtetraguaiacol ต่อนาทีที่ 25 องศาเซลเซียสและ pH 6.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4.3 . การหาค่า peroxidase ( POD ) กิจกรรม
( ทำที่อุณหภูมิ 25 ° C ใน 10 มม. ความยาวเส้นทางพลาสติก
คิวเวตต์ ( ไกรเนอร์ไบโอหนึ่ง frickenhausen GmbH , Germany ) ใช้ UV /
มองเห็น Spectrophotometer ( ultrospec 3300 Pro ชาม ชีววิทยา
สวีเดน ) ที่ 465 นาโนเมตร ปฏิกิริยาผสม จำนวน 1500 μลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์
( 50 มม. nah2po4 , pH 6.5 มี 1 M NaCl ) , 200 μแครอท
lสารสกัด , 200 μฉันได ( 1% w / v ในน้ำ ) และ 100 μ L H2O2 ( 1.5 % W / V
ในน้ำ ) การเพิ่มค่าการดูดกลืนแสงเนื่องจากการก่อตัวของหมด
tetraguaiacol พอลิเมอร์ตามสำหรับเวลารวม 3 นาที
และบันทึกกับปฏิกิริยาจลนพลศาสตร์โปรแกรมโมดูล ( Swift II โปรแกรม
V 2.01 , ชาม ชีววิทยา สวีเดน ) ว่างเป็นส่วนผสมของμ
1700 ลิตร ( 50 มม. nah2po4 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 65 มี 1 M
NaCl ) , 200 μฉันได ( 1% w / v ) และ 100 μ L H2O2 ( 1.5 % W / V )
หน่วยหนึ่งของกิจกรรมฝักถูกกำหนดเป็นปริมาณของฝักที่กระบวนการออกซิเดชันของเอนไซม์
1 μโมลของไดโดย H2O2 , การขึ้นรูปพอลิเมอร์หมด
tetraguaiacol ต่อ นาทีที่ 25 ° C และ pH 6.5 .