Cucumber mosaic virus (CMV) is a tr

Cucumber mosaic virus (CMV) is a tripartite, positive sense RNA virus causing infections and yield losses to many plant species. Here, we generated a construct containing inverted repeat of 1,793 bp fragment of defective CMV replicase gene derived from RNA2 of cucumber mosaic virus strain O (CMV-O). The replicase gene was modified by deleting a 9 bp region between nucleotides 1909–1918. This caused a deletion in the active centre motif of polymerases, producing defective translated product 9 nucleotides shorter than the full length protein. The RNAi construct containing inverted repeat of the defective gene was used to produce transgenic tobacco lines expressing CMV-derived double-stranded RNA via Agrobacterium-mediated transformation. Of the four transgenic lines inoculated with CMV-O or CMV-Y in vitro and ex vivo, three lines (T1, T4 and T5) showed immunity to both strains of CMV as no symptoms were detected, whereas one line (T7) exhibited high resistance with mild symptoms limited to inoculation portions. No virus could be detected in uninoculated new leaves of the transgenic lines after RT-PCR and Dot-immunobinding assay analyses. Small interfering RNAs present in transgenic lines before and after virus challenge indicates that the resistance was acquired through RNA silencing.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แตงกวาไวรัส (CMV) เป็นความรู้สึกบวก tripartite อาร์เอ็นเอไวรัสก่อให้เกิดการติดเชื้อและสูญเสียผลผลิตให้พืชหลายชนิด ที่นี่ เราสามารถสร้างโครงสร้างที่ประกอบด้วยการกลับซ้ำของส่วน bp 1,793 ของยีน replicase CMV บกพร่องมาจาก RNA2 ของแตงกวาต้องใช้ไวรัส (CMV-O) O ยีน replicase ถูกปรับเปลี่ยน โดยการลบ 9 bp บริเวณระหว่างนิวคลีโอไทด์ 1909 – 1918 นี้เกิดจากการลบในแปลนศูนย์การใช้งานของ polymerases การผลิตสั้นกว่าความยาวเต็มโปรตีนนิวคลีโอไทด์สินค้าแปลชำรุด 9 RNAi ที่โครงสร้างประกอบด้วยกลับซ้ำของยีนบกพร่องถูกใช้ในการผลิตยาสูบถั่วเหลืองบรรทัดแสดง CMV มาควั่นคู่อาร์เอ็นเอผ่านการแปลง mediated อโกรแบคทีเรียม บรรทัดถั่วเหลือง 4 inoculated CMV O หรือ CMV Y การเพาะเลี้ยง และ ex vivo บรรทัด (T1, T4 และ T5) เป็นอาการของภูมิคุ้มกันให้ทั้งสองสายพันธุ์ของ CMV พบตรวจพบ ขณะหนึ่งบรรทัด (T7) จัดแสดงความต้านทานสูงกับอาการไม่รุนแรงส่วน inoculation จำกัด ไวรัสไม่สามารถตรวจพบในใบ uninoculated ของใบถั่วเหลืองหลังจาก RT-PCR และจุด immunobinding assay วิเคราะห์ RNAs รบกวนเล็กแสดง ในบรรทัดถั่วเหลืองก่อน และหลัง จากที่ไวรัสท้าทายบ่งชี้ว่า ต่อต้านมาผ่านอาร์เอ็นเอ silencing

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไวรัสแตงกวา (CMV) เป็นไตรภาคีความรู้สึกในเชิงบวกอาร์เอ็นเอไวรัสที่ก่อให้เกิดการติดเชื้อและการสูญเสียผลผลิตพืชหลายชนิด ที่นี่เราสร้างโครงสร้างที่มีการทำซ้ำคว่ำส่วนของ 1,793 bp ของยีน CMV เรพลิข้อบกพร่องมาจาก RNA2 ของไวรัสสายพันธุ์แตงกวา O (CMV-O) ยีนเรพลิถูกปรับเปลี่ยนโดยการลบภูมิภาค bp 9 ระหว่างนิวคลีโอ 1909-1918 เรื่องนี้ทำให้เกิดการลบในบรรทัดฐานที่ใช้งานของศูนย์ polymerases การผลิตผลิตภัณฑ์ที่มีข้อบกพร่องแปล 9 นิวคลีโอสั้นกว่าโปรตีนยาวเต็มรูปแบบ สร้าง RNAi ที่มีการทำซ้ำคว่ำของยีนบกพร่องถูกใช้ในการผลิตสายพันธุ์ยาสูบแสดง CMV ที่ได้มาจากอาร์เอ็นเอเกลียวคู่ผ่านเชื้อ Agrobacterium ของสี่สายพันธุ์เชื้อด้วย CMV-O หรือ CMV-Y ในหลอดทดลองและ ex vivo สามสาย (T1, T4 และ T5) พบภูมิคุ้มกันให้กับทั้งสองสายพันธุ์ของ CMV เป็นไม่มีอาการที่ตรวจพบในขณะที่หนึ่งบรรทัด (T7) แสดงสูง ความต้านทานที่มีอาการไม่รุนแรง จำกัด ให้ส่วนการฉีดวัคซีน ไวรัสไม่สามารถตรวจพบในใบใหม่ uninoculated ของสายพันธุ์หลังจาก RT-PCR และ Dot-immunobinding วิเคราะห์ทดสอบ RNAs รบกวนขนาดเล็กอยู่ในสายพันธุ์ก่อนและหลังการท้าทายไวรัสบ่งชี้ว่าความต้านทานที่ได้มาผ่านสมรอาร์เอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แตงกวาฝังไวรัส ( ซีเ มวี ) เป็นไตรภาคี บวกความรู้สึก rna ไวรัสที่ก่อให้เกิดการติดเชื้อและผลผลิตจากพืชมากมาย ที่นี่เราสร้างแบบทำซ้ำของการสร้างที่มีเบสเบสของยีนบกพร่องซีเ มวี replicase ได้มาจาก rna2 ไวรัสโมเสกแตงกวาสายพันธุ์ O ( cmv-o ) การ replicase ยีนถูกแก้ไขโดยการลบ 9 BP ภูมิภาคระหว่างนิวคลีโอไทด์ 1909 – 1918นี้เกิดจากการใช้ศูนย์บริการรูปแบบของ polymerases การผลิตผลิตภัณฑ์บกพร่องแปล 9 ขนาดสั้นกว่าโปรตีนมีความยาวเต็มรูปแบบ หาที่สร้างประกอบด้วยคว่ำซ้ำของยีนที่บกพร่องถูกใช้เพื่อผลิตต้นยาสูบ เส้นแสดงซีเ มวีได้มาคู่ควั่น RNA ผ่าน Agrobacterium โดยการแปลงทั้ง 4 สายพันธุ์ที่ปลูกด้วยต้น cmv-o หรือ cmv-y ในหลอดทดลองและ ex vivo สามบรรทัด ( T1 , T4 5 ) มีภูมิคุ้มกันทั้งสายพันธุ์ ซีเ มวีที่ไม่มีอาการ และตรวจพบในขณะที่หนึ่งบรรทัด ( * * 3 ) มีความต้านทานสูง ที่มีอาการไม่รุนแรง จำกัด ให้ใช้ส่วนไม่มีไวรัส สามารถตรวจพบได้ในใบใหม่ใส่ของสายต้นหลังนี้ และเป็นจุด immunobinding วิเคราะห์การทดสอบ เล็กรบกวน RNAs ปัจจุบันในสายพันธุกรรมก่อนและหลังจากที่ท้าทายไวรัสพบว่าสามารถต้านทานได้มาผ่าน . .