2.3.2.3. Inhibitory effect of BCA o

2.3.2.3. Inhibitory effect of BCA on F. solani conidia germination.
2.3.2.3.1. Inhibition by Trichoderma spp. culture filtrates. The inhibition of F. solani spore germination was assessed by the M38-A2
broth macrodilution assay described by CLSI (2008) with minor
modifications. Briefly, 250 lL, 500 lL and 625 lL of sterile PDB
were distributed in 1.5 mL glass tubes. Thereafter, 500 lL, 250 lL
and 125 lL of Trichoderma spp. culture filtrates were respectively
distributed in the tubes and finally 250 lL of conidia (4  105 -
spore/mL) prepared in PDB were introduced in each tube to reach
a final volume of 1 mL. Negative control consisted of tubes containing culture medium with F. solani and sterility control contained
only the culture medium. Triplicate test and control tubes were
incubated at 25 ± 2 C for 24 h. Samples (loop full drop) were taken
from each tube after incubation and examined microscopically.
Conidia enumeration was done using a haemocytometer. Activity
was expressed as percentage of inhibition of conidia germination
(%SGI) calculated as follows:
%CGI ¼ ðGc  Gt=GcÞ  100 ð4Þ
where Gc: Germination in control tubes; Gt: Germination in treated
tubes.
2.3.2.3.2. Inhibitory effect of BCA ethyl acetate extract on F. solani
conidia germination. The ethyl acetate partition was prepared from
the filtrate of the more promising BCA (T. atroviridae) upon the
above experiments. The spore germination assay was performed
using the M38-A2 method (CLSI, 2008) with minor modifications.
Briefly, 100 lL of PDB (Sigma Ltd) were distributed in triplicate
in the wells of a 96-wells plate followed by addition of 100 lL of
stock ethyl acetate extract of T. atroviridae at 5.32 mg/mL to the
first well. After thorough mixing, a twofold serial dilution was
achieved by successive transfer of 100 lL into subsequent wells.
Then, 100 lL of F. solani conidia (4  105 conidia/mL) were introduced in the wells containing the test substances. Sterility control
consisted of blank wells without F. solani conidia. Upon incubation
of the plate at 25 ± 2 C for 24 h, an aliquot of culture was taken
from each well and examined microscopically. The percentage of
inhibition was determined according to the formula (4) given
above.
The lowest concentration of ethyl acetate extract exhibiting
100% inhibition of the germination of F. solani conidia was considered as the Minimum Inhibitory Concentration (MIC).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3.2.3 inhibitory ผลของ BCA F. solani conidia การงอก2.3.2.3.1 การยับยั้ง โดยวัฒนธรรมออกซิเจน Trichoderma filtrates การยับยั้งการงอกของสปอร์ของ F. solani ถูกประเมิน โดย M38-A2ซุป macrodilution ทดสอบอธิบาย CLSI (2008) กับรองการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ 250 lL, 500 lL และ 625 lL ของหมัน PDBถูกแจกจ่ายในหลอด 1.5 มิลลิลิตร หลังจากนั้น 500 lL, 250 lLและ 125 จะของ Trichoderma ออกซิเจนวัฒนธรรม filtrates ได้ตามลำดับกระจายในหลอด และในที่สุด 250 จะของ conidia (4 105 -เตรียมสปอร์/มล.) ใน PDB ถูกนำมาใช้ในแต่ละหลอดถึงเสียงสุดของ 1 มล. ลบตัวควบคุมที่ประกอบด้วยท่อที่ประกอบด้วยขนาดกลางวัฒนธรรม F. solani และเป็นหมันควบคุมอยู่เฉพาะวัฒนธรรมสื่อ หลอดทดสอบและการควบคุมที่เพิ่มขึ้นสามเท่าได้รับการกกที่ 25 ± 2 C ตัวอย่าง 24 h. (วนหล่นเต็ม) ถ่ายจากท่อหลังจากบ่ม และตรวจสอบความConidia การแจงนับเสร็จเรียบร้อยแล้วใช้แบบ haemocytometer กิจกรรมถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์การยับยั้งการงอกของ conidia(% SGI) คำนวณดังต่อไปนี้:% CGI ¼ ðGc Gt = GcÞ 100 ð4Þที่ Gc: การงอกในหลอดควบคุม Gt: การงอกในรักษาหลอด2.3.2.3.2 ผล inhibitory ของ BCA เอทิลอะซิเตแยกบน F. solaniconidia การงอก พาร์ติชันเอทิลอะซิเตทถูกเตรียมจากการกรองของ BCA สัญญาเพิ่มเติม (T. atroviridae) ตามการทดลองข้างต้น ดำเนินการทดสอบการงอกของสปอร์ใช้วิธี M38-A2 (CLSI, 2008) ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสั้น ๆ 100 lL ของ PDB (Sigma Ltd) ถูกแจกจ่ายลข้อในหลุมจานหลุม 96 ตาม ด้วยเพิ่ม 100 lL ของหุ้นสารสกัดเอทิลอะซิเตทของ T. atroviridae ที่ 5.32 mg/mL เพื่อการครั้งแรก ดี หลังจากผสมอย่างละเอียด เจือจางเป็นประจำสองเท่าได้ทำได้ โดยการโอนต่อเนื่อง 100 จะเป็นหลุมตามมาแล้ว 100 lL ของ F. solani conidia (4 105 conidia mL) ถูกนำมาใช้ในบ่อที่ประกอบด้วยสารทดสอบ ควบคุมเป็นหมันประกอบ ด้วยหลุมที่ว่างเปล่าโดย F. solani conidia เมื่อบ่มนำส่วนลงตัวของวัฒนธรรมของแผ่นที่ 25 ± 2 C ใน 24 hจากแต่ละที่ดี และตรวจสอบความ เปอร์เซ็นต์ของกำหนดยับยั้งตามสูตร (4) กำหนดข้างต้นความเข้มข้นต่ำสุดของตัวสารสกัดเอทิลอะซิเตท100% ยับยั้งการงอกของ F. solani conidia ได้พิจารณาเป็นความเข้มข้น Inhibitory ต่ำสุด (MIC)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2.3 ผลยับยั้งการเก็บกวาดในเอฟงอก conidia solani.
2.3.2.3.1 ยับยั้งเชื้อรา Trichoderma spp กรองวัฒนธรรม โดยการยับยั้งการสร้างสปอร์เอฟ solani งอกได้รับการประเมินโดย M38-A2
ทดสอบน้ำซุป macrodilution อธิบายโดย CLSI (2008) กับผู้เยาว์
การปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , 250 LL 500 LL และ 625 LL ของหมัน PDB
ถูกกระจายไปในหลอดแก้ว 1.5 มิลลิลิตร หลังจากนั้น 500 LL 250 LL
125 LL เชื้อรา Trichoderma spp กรองตามลําดับวัฒนธรรม
กระจายอยู่ในหลอดและในที่สุดก็ 250 LL ของสปอร์ (4 105 -
สปอร์ / มิลลิลิตร) จัดทำขึ้น PDB ถูกนำมาใช้ในแต่ละหลอดไปถึง
ปริมาณสุดท้ายของ 1 มิลลิลิตร การควบคุมเชิงลบประกอบด้วยท่อที่มีขนาดกลางวัฒนธรรมกับเอฟ solani การฆ่าเชื้อและการควบคุมที่มีอยู่
เพียงสื่อวัฒนธรรม เพิ่มขึ้นสามเท่าการทดสอบและการควบคุมหลอดถูก
บ่มที่อุณหภูมิ 25 ± 2 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ตัวอย่าง (เต็มวงวาง) ถูกนำมา
จากแต่ละหลอดหลังจากการบ่มและตรวจสอบกล้องจุลทรรศน์.
conidia การแจงนับได้กระทำโดยใช้สไลด์นับเม็ดเลือด กิจกรรม
ถูกแสดงเป็นร้อยละของการยับยั้งการงอกของสปอร์
(% SGI) คำนวณดังนี้
CGI% ¼ DGC? GT = GcÞ? 100 ð4Þ
ที่ Gc: งอกในหลอดควบคุม GT: งอกในการรักษา
. หลอด
2.3.2.3.2 ผลยับยั้งการเก็บกวาดสารสกัดเอทิลอะซิเตทในเอฟ solani
งอก conidia พาร์ทิชันเอทิลอะซิเตทถูกจัดทำขึ้นจาก
การกรองของ BCA มีแนวโน้มมากขึ้น ( T. atroviridae) เมื่อ
การทดลองดังกล่าวข้างต้น ผลการวิเคราะห์ของสปอร์งอกได้ดำเนินการ
โดยใช้ M38-A2 วิธี (CLSI 2008) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย.
สั้น ๆ , 100 LL ของ PDB (ซิกม่า จำกัด ) มีการกระจายในเพิ่มขึ้นสามเท่า
ในหลุมของแผ่น 96 หลุมตามด้วยนอกเหนือจาก 100 LL ของ
หุ้นเอทิลอะซิเตทสารสกัดจากที atroviridae ที่ 5.32 mg / ml ไป
กันเป็นครั้งแรก หลังจากตรวจสอบอย่างละเอียดผสมเจือจางอนุกรมสองเท่าได้รับการ
ประสบความสำเร็จโดยการโอนต่อเนื่อง 100 LL ลงในหลุมต่อมา.
แล้ว 100 LL ของเอฟ solani สปอร์ (4? 105 ปอร์ / มิลลิลิตร) เป็นที่รู้จักในหลุมที่มีสารทดสอบ การควบคุมการฆ่าเชื้อ
ประกอบด้วยหลุมว่างเปล่าโดยไม่ต้องสปอร์เอฟ solani เมื่อฟักตัว
ของแผ่นที่ 25 ± 2 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงการหารของวัฒนธรรมถูกนำตัว
ออกจากกันได้ดีและตรวจสอบกล้องจุลทรรศน์ ร้อยละของ
การยับยั้งถูกกำหนดตามสูตร (4) ที่กำหนด
ข้างต้น.
ความเข้มข้นต่ำสุดของสารสกัดจากน้ำนม exhibiting
ยับยั้ง 100% ของการงอกของสปอร์เอฟ solani ได้รับการพิจารณาเป็นที่ขัดขวางความเข้มข้นขั้นต่ำ (MIC)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2.3 . ผลยับยั้งของ BCA ใน F . solani โคนิงอก2.3.2.3.1 . การยับยั้งโดย Trichoderma spp . วัฒนธรรม สารละลาย . การยับยั้งการงอกของสปอร์และ F . solani โดย m38-a2ซุป macrodilution ( อธิบายโดยต่างๆ ( 2008 ) กับผู้เยาว์การปรับเปลี่ยน สั้น 250 จะ 500 จะให้เส้นใยจะเป็นหมันกระจายอยู่ในแก้วหลอด 1.5 ml . หลังจากนั้น , 500 จะ 250 จะและ 125 จะของวัฒนธรรมตามลำดับสารละลายไอโซเลทที่กระจายอยู่ในท่อ และสุดท้าย 250 จะของโคนิ ( 105 - 4สปอร์ / มิลลิลิตร ) เตรียมเส้นใยมีการแนะนำในแต่ละหลอดจะเข้าถึงเป็นเล่มสุดท้ายของการควบคุม 1 มิลลิลิตร ประกอบด้วยหลอดบรรจุอาหารเลี้ยงเชื้อลบด้วย F . solani และเป็นหมัน ควบคุม ประกอบด้วยเพียงแต่วัฒนธรรมสื่อ ทำสำเนาสามฉบับทดสอบและควบคุมหลอดคืออุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ± 2 ตัวอย่าง ( ห่วงเต็มวาง ) ถ่ายจากแต่ละหลอดหลังจากบ่ม และตรวจสอบผล .ผลการศึกษาการทำโดยใช้ haemocytometer . กิจกรรมจะแสดงเป็นร้อยละของการยับยั้งการงอกของโคนิเดีย( % SGI ) ที่คำนวณได้ดังนี้% CGI ¼ð GC GT = GC Þ 100 ð 4 Þที่ GC : งอกในหลอดควบคุม ; GT : ในการงอกหลอด2.3.2.3.2 . ผลของสารสกัดเอทิลอะซีเตท BCA ใน F . solaniผลการศึกษาการงอก เอทิลอะซิเตตจากพาร์ทิชันที่ถูกเตรียมไว้ปัญหาหนักของสัญญาเพิ่มเติม ( T . atroviridae ) บนข้างต้นนี้ การสร้างสปอร์งอกต่อได้ใช้วิธี m38-a2 ต่างๆ , 2008 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสั้น 100 จะของ PDB ( ซิกม่าจำกัด ) ทั้งสามใบถูกแจกจ่ายในบ่อของบ่อ จาน ตามด้วย 96 จาก 100 จะของหุ้นเอทิลอะซิเตท สารสกัด ที atroviridae ที่ 5.32 มก. / มล. ต่อก่อนกัน หลังจากอย่างละเอียดผสมเจือจางสองเท่าเป็นอนุกรมสามารถโอนต่อเนื่อง 100 จะเป็นบ่อน้ำที่ตามมาแล้ว 100 จะจาก F . solani เดีย ( 4 ) conidia / ml ) ถูกแนะนำในบ่อที่มีสารทดสอบ ควบคุมการเป็นหมันมีเวลว่างโดย F . solani เดีย . เมื่อบ่มของจานที่ 25 ± 2 เป็นเวลา 24 ชั่วโมงเป็นส่วนลงตัวของวัฒนธรรมถูกจากแต่ละและตรวจสอบผล . ร้อยละของการกำหนดตามสูตร ( 4 ) ให้ข้างต้นค่าความเข้มข้นของสารสกัดเอทิลอะซีเตทแสดง100% ยับยั้งการงอกของสปอร์ของ F . solani เป็นสมาธิขั้นการยับยั้ง ( MIC )