The strain of Pseudomonas aeruginos

The strain of Pseudomonas aeruginosa NS2001, isolated from a sample soil in Thailand, was used. The stock culture of this strain was maintained on minimum medium plates [(NH4)2SO4 1.3 g/l, KH2PO4 0.9 g/l, K2HPO4 0.6 g/l, MgSO4.7H2O 0.2 g/l, yeast extract 0.1 g/l and olive oil 10 g/l, adjusted to pH 7.0].

Cultivation medium
Each inoculum was developed in minimum medium. Fifty ml of medium was dispensed into 250 ml Erlenmeyer flasks, capped with cotton plugs and sterilized by autoclaving at 121°C for 15 min. The medium was inoculated with 1 loop from the minimum medium plate. The flasks were incubated in a Psychotherm shaker operating at 250 rpm, 37°C for 15 hours. The growth was measured by monitoring the culture OD600 at 1 cm. with various time intervals. The growth experiment was done in triplicate.

Laboratory fermentation
A 5-L fermenter (New Brunswick Scientific EDISON N.J., U.S.A.) was filled with 4 L of culture medium and sterilized at 121°C for 20 min. Standard operating conditions of the fermenter were: 1% (v/v) inoculum size; 37°C; agitation speed at 250 rpm; pH 7.0; aeration 1.0 vvm. The pH was automatically monitored and maintained with HCL/NaOH addition throughout the fermentation cycle. Growth (OD660) and lipase activity were measured after 48 hours of cultivation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์ของพ aeruginosa ns2001 แยกได้จากตัวอย่างดินในประเทศไทยถูกนำมาใช้ วัฒนธรรมหุ้นของสายพันธุ์นี้ได้รับการเก็บรักษาไว้บนจานขั้นต่ำกลาง [(NH4) 2SO4 1.3 g / l, kh2po4 0.9 g / l, K2HPO4 0.6 g / l, mgso4.7h2o 0.2 g / l, สารสกัดจากยีสต์ 0.1 กรัม / ลิตรและมะกอก น้ำมัน 10 กรัม / ลิตรปรับ ph 7.0]


สื่อการเพาะปลูกในแต่ละเชื้อได้รับการพัฒนาในกลางขั้นต่ำห้าสิบมิลลิลิตรของกลางถูกจ่ายเข้ามาใน 250 มล. ขวด erlenmeyer ต่อยอดกับปลั๊กฝ้ายและผ่านการฆ่าเชื้อโดย autoclaving ที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที สื่อที่ถูกเชื้อด้วย 1 วงจากจานกลางขั้นต่ำ ขวดบ่มในปฏิบัติการ psychotherm เขย่าที่ 250 รอบต่อนาที 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 ชั่​​วโมง การเจริญเติบโตถูกวัดโดยการตรวจสอบ OD 600 วัฒนธรรมที่ 1 ซม. ด้วยช่วงเวลาต่างๆการเจริญเติบโตของการทดลองทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า


ห้องปฏิบัติการการหมักถังหมัก 5 ลิตร (นิวบรุน nj เอดิสันวิทยาศาสตร์ usa) ก็เต็มไปด้วย 4 ลิตรเลี้ยงเชื้อและฆ่าเชื้อที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที สภาพการทำงานของถังหมักมาตรฐานคือ 1% (v / v) ขนาดหัวเชื้อ; 37 ° c; ความเร็วกวนที่ 250 รอบต่อนาที ph 7.0; การเติมอากาศ 1.0 vvm สำหรับph ได้รับการตรวจสอบโดยอัตโนมัติและการบำรุงรักษาด้วยการเพิ่ม hcl / NaOH ตลอดวงจรการหมัก การเจริญเติบโต (od660) และกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสถูกวัดหลังจาก 48 ชั่วโมงของการเพาะปลูก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใช้สายพันธุ์ Pseudomonas aeruginosa NS2001 แยกต่างหากจากดินตัวอย่างในประเทศไทย วัฒนธรรมหุ้นนี้ต้องใช้ที่อยู่ในแผ่นต่ำสุดปานกลาง [(NH4) 2SO4 1.3 g/l, KH2PO4 0.9 g/l, K2HPO4 0.6 g/l, MgSO4.7H2O 0.2 g/l ยีสต์สกัด 0.1 g/l และมะกอกน้ำมัน 10 g/l ปรับค่า pH 7.0]

ปลูกกลาง
inoculum แต่ละได้รับการพัฒนาในขั้นต่ำ 50 Ml ของกลางถูกคำลงในน้ำ 250 ml Erlenmeyer ปรบมือ ด้วยปลั๊กฝ้าย และ sterilized โดย autoclaving ที่ 121° C สำหรับ 15 นาที สื่อถูก inoculated กับลูป 1 จากแผ่นปานกลางต่ำ น้ำถูก incubated ในเชคเกอร์ Psychotherm การดำเนินงานที่ 250 รอบต่อนาที 37° C 15 ชั่วโมง การเจริญเติบโตถูกวัด โดยการตรวจสอบวัฒนธรรม OD600 ที่ 1 cm. มีช่วงเวลาต่าง ๆ ทดลองการเจริญเติบโตภายใน triplicate

ห้องปฏิบัติการหมัก
fermenter 5 L (รัฐนิวบรันสวิกวิทยาศาสตร์เอดิสันเอ็นเจ สหรัฐอเมริกา) ด้วย 4 L ของสื่อวัฒนธรรม และ sterilized ที่ 121° C ประมาณ 20 นาทีมาตรฐานปฏิบัติเงื่อนไขที่ fermenter ได้: ขนาด inoculum 1% (v/v) 37° C อาการกังวลต่อความเร็วที่ 250 รอบต่อนาที pH 7.0 vvm aeration 1.0 PH ถูกตรวจสอบโดยอัตโนมัติ และรักษา ด้วย HCL/NaOH เพิ่มตลอดทั้งวงจรของการหมัก เจริญเติบโต (OD660) และกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสที่วัดหลังจาก 48 ชั่วโมงของการเพาะปลูก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความเครียดในใจ pseudomonas NS 2001 แยกออกจากดินตัวอย่างในประเทศไทยก็นำมาใช้ ที่ตลาดหลักทรัพย์แห่งวัฒนธรรมความเมื่อยล้าของโรงแรมแห่งนี้มีขนาดกลางได้รับการดูแลรักษาเป็นอย่างดีในแผ่นความร้อนต่ำสุด[( NH 4 ) 2 และ 4 1.3 กรัม/ลิตร, KH 2 PO 4 0.9 กรัม/ลิตร, K 2 hpo 4 0.6 กรัม/ลิตร, mgso 4.7 H 2 O 0.2 กรัม/ลิตร,ยีสต์สกัด 0.1 กรัม/ลิตรและน้ำมันมะกอก 10 กรัม/ L ,การปรับค่า pH 7.0 ] inoculum ปลูกขนาดกลาง


แต่ละได้รับการพัฒนาขึ้นในขนาดกลางต่ำสุดห้าสิบมล.ขนาดกลางมีน้ำบริสุทธิ์ในใบลูกปืนหลาย erlenmeyer 250 มล.ปกคลุมไปด้วยพร้อมด้วยปลั๊กผ้าฝ้ายและฆ่าเชื้อได้โดย autoclaving ที่ C 121 °สำหรับ 15 แผ่นนาทีขนาดกลางที่เป็น inoculated พร้อมด้วย 1 แบบต่อพ่วงจากขนาดกลางต่ำสุด ใบลูกปืนหลายที่ก็ incubated ใน C 37 ° psychotherm เครื่องเขย่าทำงานที่ 250 รอบต่อนาทีสำหรับ 15 ชั่วโมง การขยายตัวทางเศรษฐกิจยังมีวัดได้จากการตรวจสอบทางวัฒนธรรม OD 600 ซม.ที่ 1 ในแต่ละช่วงเวลาต่างๆด้วยการทดลองการขยายตัวที่เป็นการกระทำที่เป็นสาม


ห้องปฏิบัติการหมัก 5 - L fermenter ( New Brunswick ทางวิทยาศาสตร์ Edison N . J .,, U . S . A .)เป็นไปด้วย 4 L ของวัฒนธรรมขนาดกลางและฆ่าเชื้อได้ที่ 121 ° C สำหรับ 20 นาทีตามมาตรฐานการทำงานของ fermenter เป็น 1% ( v / v ) inoculum ขนาด; 37 ° C ;ความรู้สึกความเร็วที่ 250 รอบต่อนาที; pH 7.0 ;ผึ่งลม 1.0 vvm.pH ให้ได้ติดตามและการดูแลรักษาเป็นอย่างดีพร้อมด้วยโซดาไฟ HCL /การเพิ่มเติมตลอดทั้งวงจรหมักโดยอัตโนมัติ การเติบโต( OD 660 )และกิจกรรม lipase เป็นวัดหลังจาก 48 ชั่วโมงของการเพาะปลูก