Figure 1. A Basic, Directional Clon

Figure 1. A Basic, Directional Cloning Experiment. (A) The experimental insert is designed to include restriction sites found in the (multiple cloning site) MCS of the vector, in this case for the enzymes HindIII and KpnI (red). Additional nonspecific base pairs (4-6) outside of the restriction enzyme recognition sites are included to provide for efficient restriction enzyme binding [1]. The blue lines indicate the cut sites. (B) HindIII and KpnI restriction digestion of both vector and insert produce complementary overhangs allowing the DNA insert to base pair with the linear plasmid. Hydrogen bonds stabilize this binding, making this method highly efficient. A subsequent ligation reaction covalently links the insert to plasmid.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รูปที่ 1 ทดลองการโคลนพื้นฐาน ทิศทางการ (A) การแทรกทดลองถูกออกแบบมาเพื่อรวมไซต์ข้อจำกัดที่พบใน (หลาย cloning ไซต์) เอ็มซีของเวกเตอร์ ในกรณีนี้สำหรับเอนไซม์ HindIII และ KpnI (สีแดง) เพิ่มเติมเจาะจงฐานคู่ (4-6) ภายนอกไซต์รู้เอนไซม์จำกัดได้ให้เอนไซม์จำกัดมีประสิทธิภาพผูก [1] บรรทัดสีน้ำเงินระบุไซต์ตัด (ข) HindIII และ KpnI การย่อยอาหารข้อจำกัดของทั้งสองเวกเตอร์ และแทรกแทรก overhangs เสริมให้ดีเอ็นเอจับคู่ฐานมี plasmid เส้นผลิต พันธบัตรไฮโดรเจนมุ่งผูกนี้ ทำให้วิธีนี้มีประสิทธิภาพสูง ปฏิกิริยาต่อมาไข่ลิงค์การแทรกกับ plasmid covalently

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รูปที่ 1 พื้นฐานการทดลองโคลนทิศทาง (A) แทรกการทดลองถูกออกแบบมาเพื่อรวมเว็บไซต์ข้อ จำกัด ที่พบใน (เว็บไซต์โคลนหลาย) MCS ของเวกเตอร์ในกรณีนี้สำหรับเอนไซม์ HindIII และ KpnI (สีแดง) ฐานคู่เชิญชมเพิ่มเติม (4-6) นอกสถานที่ได้รับการยอมรับข้อ จำกัด ของเอนไซม์จะถูกรวมเพื่อให้เอนไซม์ จำกัด ที่มีประสิทธิภาพมีผลผูกพัน [1] เส้นสีฟ้าบ่งบอกถึงสถานที่ตัด (B) HindIII และการย่อยอาหาร KpnI ข้อ จำกัด ของทั้งสองเวกเตอร์และแทรกผลิตกระเช้าเสริมที่ช่วยให้ดีเอ็นเอที่ใส่เพื่อให้ฐานคู่กับพลาสมิดเชิงเส้น พันธะไฮโดรเจนมีเสถียรภาพนี้มีผลผูกพันทำให้วิธีนี้มีประสิทธิภาพสูง ปฏิกิริยาที่ตามมา ligation covalently แทรกการเชื่อมโยงไปยังพลาสมิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปที่ 1 พื้นฐานทดลองการโคลนนิ่ง ทิศทาง ( ก ) ใส่ทดลองถูกออกแบบมาเพื่อรวมเว็บไซต์ข้อ จำกัด ที่พบใน ( หลายการโคลนเว็บไซต์ ) เป็นพิธีกรของเวกเตอร์ ในคดีนี้และเอนไซม์ - kpni ( สีแดง ) เพิ่มเติมเจาะจงคู่เบส ( 4-6 ) ด้านนอกของเอนไซม์ การยอมรับเว็บไซต์รวมเพื่อให้มีประสิทธิภาพการเอนไซม์ [ 1 ]เส้นสีฟ้าแสดงตัดเว็บไซต์ ( B ) - kpni จำกัดและการย่อยอาหารของทั้งสองเวกเตอร์และแทรกผลิตประกอบยื่นให้แทรกดีเอ็นเอฐานคู่กับพลาสมิด เชิงเส้น พันธะไฮโดรเจนทรงนี้ผูก ทำให้วิธีนี้มีประสิทธิภาพสูง ปฏิกิริยาที่ตามมา covalently Ligation การเชื่อมโยงแทรก
พลาสมิด